致淀粉样变轻链对心肌损伤的机制研究

发布时间：2022-11-12 09:54

　　背景及目的轻链型淀粉样变（light chain amyloidosis,AL）是一种由异常错配的免疫球蛋白轻链沉积于组织或器官并造成器官损害的致死性浆细胞病。患者的预后主要取决于心脏受累的严重程度。目前认为,异常轻链通过在心脏内沉积,以及轻链对心肌细胞的直接细胞毒作用这两种机制造成了心脏功能的严重损伤。然而,其造成心肌损伤的关键步骤以及具体机制尚不清楚。本文旨在对AL轻链进入心肌细胞的方式、其亚细胞器定位、心肌细胞损伤的具体表现及其分子机制进行研究。方法使用真核细胞表达并提取具有心肌嗜性的致淀粉样变轻链（AL轻链）。选取H9C2细胞系,使用荧光共聚焦显微镜观察AL轻链进入细胞随时间的变化,以及加入不同种类内吞抑制剂后细胞中AL轻链含量的差异。使用荧光染料标记细胞的溶酶体与线粒体,在共聚焦显微镜下观察AL轻链进入细胞后的亚细胞器定位及其对亚细胞结构的影响;使用透射电镜观察细胞线粒体形态变化。通过TUNEL法与CCK-8法检测AL轻链对H9C2细胞凋亡与活力的影响;使用DCFH-DA标记的流式细胞技术检测H9C2细胞内的ROS水平;并通过Western blot、免疫荧光、透射电镜检测自... 

【文章页数】：71 页

【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 轻链进入心肌细胞的途径及其亚细胞定位研究
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
第二部分 轻链对心肌细胞的毒性机制研究
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
第三部分 轻链作用于心肌细胞的表达谱分析
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
参考文献
缩略词表
致谢



本文编号：3706153