CEMP1基因修饰骨质疏松大鼠BMSCs与β-TCP体外复合培养实验

发布时间：2023-02-12 14:33

　　目的探讨牙骨质蛋白1(cementum protein 1,CEMP1)基因修饰骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)与β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)体外复合培养的可行性。方法体外培养骨质疏松大鼠BMSCs,将携带有CEMP1基因的慢病毒LV-CEMP1-EGFP转染BMSCs,采用荧光显微镜观察转染情况,通过流式细胞仪检测转染率,通过实时荧光定量PCR检测转染后BMSCs中CEMP1基因的表达,Western Blot及免疫细胞化学染色检测BMSCs中CEMP1蛋白的表达情况。将CEMP1基因修饰的BMSCs与β-TCP体外复合培养,在荧光显微镜和扫描电镜下观察细胞的生长状况。结果LV-CEMP1-EGFP具有较高的转染率,CEMP1基因修饰的BMSCs可高表达CEMP1,且在β-TCP上保持良好的生长状态。结论CEMP1基因修饰骨质疏松大鼠BMSCs与β-TCP复合培养,有望应用于骨质疏松状态下的牙周组织再生研究。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物:
        1.1.2 主要试剂与仪器:
    1.2 方法
        1.2.1 PMO大鼠BMSCs的获取及体外培养:
        1.2.2 PMO大鼠BMSCs体外成骨分化能力检测:
        1.2.3 PMO大鼠BMSCs基因转染检测:
        1.2.4 基因转染PMO大鼠BMSCs与β-TCP复合培养:
2 结果
    2.1 PMO大鼠BMSCs原代培养及成骨分化能力检测
    2.2 CEMP1基因转染PMO大鼠BMSCs检测
    2.3 基因转染后PMO大鼠BMSCs中CEMP1基因表达检测
    2.4 基因转染后PMO大鼠BMSCs中CEMP1蛋白表达检测
    2.5 基因转染PMO大鼠BMSCs与β-TCP复合培养
3 讨论



本文编号：3741281