阿托伐他汀钙对3T3-E1细胞增殖与分化的影响及其与内质网应激的联系

发布时间：2023-03-03 13:08

　　目的:观察给予不同浓度的阿托伐他汀钙作用24小时后,对体外培养的成骨前体细胞3T3-E1增殖与分化影响,分析该过程与内质网应激信号通路的关系,初步探讨骨骼疾病的治疗靶点。方法:1.显微镜下观察成骨前体细胞3T3-E1形态结构和生长状态。2.3T3-E1细胞培养至对数期,设置对照组(不加入阿托伐他汀钙),实验组加入含不同浓度阿托伐他钙(10^-8mol/L、10^-7mol/L、10^-6mol/L)的培养液继续培养细胞,24小时后利用CCK-8比色法观察阿托伐他汀钙对3T3-E1细胞增殖能力的影响,测定吸光度值。3.3T3-E1细胞培养至对数期,设置对照组(不加入阿托伐他汀钙),实验组加入含不同浓度阿托伐他钙(10^-8mol/L、10^-7mol/L、10^-6mol/L)的培养液继续培养细胞,24小时后利用碱性磷酸酶测定试剂盒测定ALP活力,测定吸光度值。4.向3T3-E1细胞中加入对细胞增殖及分化作用最明显的10^-6mol/L阿托伐他汀钙,...

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
引言
第一章 实验材料
    1.1 实验细胞
    1.2 主要仪器
    1.3 试剂与药品
第二章 实验方法
    2.1 阿托伐他汀钙干预浓度的配置
    2.2 成骨前体细胞3T3-E1的复苏、传代及冻存
        2.2.1 成骨前体细胞3T3-E1的复苏
        2.2.2 成骨前体细胞3T3-E1的传代培养
        2.2.3 成骨前体细胞3T3-E1的冻存
    2.3 CCK-8比色法检测成骨前体细胞3T3-E1增殖能力
    2.4 成骨前体细胞3T3-E1ALP活力测定
    2.5 qRT-PCR检测Runx2、Osterix及内质网应激信号通路标志性基因Bip、PERK、eIF2a在mRNA水平的表达
        2.5.1 总RNA的提取
        2.5.2 cDNA的合成
        2.5.3 RT-PCR反应步骤
    2.6 统计学处理
第三章 实验结果
    3.1 显微镜下成骨前体细胞3T3-E1细胞的形态
    3.2 阿托伐他汀钙对成骨前体细胞3T3-E1细胞增殖的影响
    3.3 阿托伐他汀钙对成骨前体细胞3T3-E1细胞成骨分化的影响
    3.4 mRNA水平显示：阿托伐他汀钙作用于3T3-E1细胞过程中,促进Runx2、Osterix的表达
    3.5 mRNA水平显示：阿托伐他汀钙作用于3T3-E1细胞过程中,促进内质网应激标志性基因Bip、PERK、eIF2α的表达
第四章 讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录或缩略词表
致谢



本文编号：3752747