机械敏感离子通道Piezo1与小鼠胰岛素抵抗的相关性及可能的炎症机制

发布时间：2023-03-25 00:18

　　【研究目的】脂肪作为储存和释放全身能量的重要代谢器官,可以根据机体热量摄入的变化,而改变自身的大小和体积。脂肪组织的这种可塑性对全身性脂质代谢和胰岛素敏感性起着重要作用。随着脂肪细胞大小和体积变化,特别是在营养过剩条件下脂质堆积的过程中,脂肪细胞壁的所承受的机械压力也会相应改变。在这里,我们探讨了机械敏感离子通道Piezo1在调节全身脂质代谢和胰岛素敏感性中的作用。【方法】收集普通饮食野生型小鼠各组织脏器,测量Piezo1/Piezo2在各组织脏器的表达丰度;普通或高脂饮食饲养普通野生型小鼠连续16周以上,分离其各脂肪组织中的成熟脂肪细胞和原代前脂肪细胞,测量Piezo1的表达变化。通过将adiponectin-Cre转基因小鼠和Piezo1^flox/flox转基因小鼠进行杂交,以构建脂肪组织Piezo1基因特异性敲除小鼠Adipoq-Cre^+/-,Piezo1^flox/flox(adipose-Piezo1^-/-)及其对照Adipoq-Cre^-/-,Piezo1^fl...

【文章页数】：101 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
一、前言
二、实验材料和方法
    实验材料
        1.实验仪器
        2.实验耗材
        3.实验动物
        4.实验试剂
        5.试剂配制
    实验方法
        1.小鼠模型构建和基因型鉴定
        2.动物实验的分组
        3.小鼠代谢相关表型的测量
        4.血清胰岛素、NEFA、甘油三脂水平测定
        5.肝脏甘油三酯水平测定
        6.动物组织标本收集
        7.提取和培养原代前脂肪细胞
        8.提取成熟脂肪细胞
        9.实时荧光定量PCR
        10.蛋白质免疫印迹
        11.石蜡标本制备、切片及HE染色
        12.统计
三、实验结果
    1.Piezo1 在脂肪组织中高表达
    2.高脂饮食可以诱导脂肪Piezo1 进一步表达增加
    3.增加的Piezo1 主要来源于成熟脂肪细胞
    4.Piezo2 在脂肪组织中的表达
    5.构建脂肪细胞特异性Piezo1 敲除小鼠
    6.脂肪特异性Piezo1 敲除对小鼠体重影响
    7.脂肪特异性Piezo1 敲除小鼠的代谢表型
    8.脂肪特异性Piezo1 敲除对小鼠脂肪组织重量和脂肪细胞大小的影响
    9.脂肪特异性Piezo1 敲除对小鼠基础脂解作用的影响
    10.脂肪特异性Piezo1 敲除诱导脂肪肝形成
    11.脂肪特异性Piezo1 敲除不影响细胞凋亡
    12.脂肪特异性Piezo1 敲除参与脂肪组织炎症反应和脂解作用的调控
    13.Piezo1 调控脂肪细胞炎症反应
    14.TLR4 抑制剂TAK-242 可以减轻由于Piezo1 抑制引起的脂肪细胞炎症反应
四、结果讨论
五、实验结论
六、参考文献
综述 脂肪组织影响衰老及老年病的研究进展
    参考文献
附录：主要英文缩略词表
攻读学位期间发表文章情况
致谢



本文编号：3770144