EGCG对高脂饮食诱导肥胖小鼠棕色脂肪活性及下丘脑炎症通路的调控作用研究

发布时间：2023-03-30 05:51

　　肥胖作为一种全球性的公共卫生问题,主要是由能量摄入与支出的不平衡造成的。表没食子儿茶素没食子酸酷((-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)作为茶叶中含量最高、生理活性最强、研究最广泛的儿茶素成分,已有诸多文献报道其有助于预防肥胖和减轻肥胖相关的慢性疾病的功效。然而,EGCG在高脂饮食诱发的能量代谢紊乱及调控相关活动的中枢神经系统功能障碍中的作用仍有待阐明。本论文就EGCG对高脂饮食诱导肥胖的棕色脂肪组织产热和小胶质细胞介导的下丘脑中枢炎症反应的作用效果与作用机制开展研究,建立相关细胞模型与动物模型,检测了肥胖相关代谢指标、棕色脂肪组织活性、适应性产热能量消耗、主要炎症细胞因子释放情况、下丘脑小胶质标记物Iba-1免疫荧光染色以及NF-κB和JAK2/STAT3信号通路关键蛋白的磷酸化水平等。实验结果表明,EGCG能够有效抑制高脂饮食造成的肥胖反应,增加小鼠棕色脂肪产热与能量消耗,并减少小胶质细胞的过度活化和下丘脑的炎症反应,为EGCG降脂减肥功效的作用机理及相关的神经调控机制提供了实验参考。主要研究结果如下:(1)建立高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型。将C57...

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
缩写、符号清单、术语表
1 文献综述
    1.1 肥胖概述
        1.1.1 肥胖的影响因素
        1.1.2 肥胖的危害
        1.1.3 肥胖的预防与治疗
    1.2 肥胖与慢性炎症
        1.2.1 脂肪组织慢性炎症及其发生机制
        1.2.2 肥胖与肝脏组织慢性炎症
        1.2.3 肥胖与肠道菌群紊乱所致炎症反应
        1.2.4 肥胖与中枢神经系统炎症反应
    1.3 EGCG的生物活性与研究现状
        1.3.1 EGCG的抗氧化作用
        1.3.2 EGCG的抗肿瘤作用
        1.3.3 EGCG的神经保护作用
        1.3.4 EGCG的心脑血管保护作用
        1.3.5 EGCG的抗菌抗病毒作用
    1.4 EGCG降脂减肥作用机制
        1.4.1 EGCG抑制消化酶活性并影响能量吸收
        1.4.2 EGCG对肠道菌群的影响
        1.4.3 EGCG对脂质合成代谢的影响
        1.4.4 EGCG对能量消耗的影响
        1.4.5 EGCG对内分泌系统的影响
        1.4.6 EGCG对中枢神经系统的影响
    1.5 本课题研究目的和内容
        1.5.1 研究目的与意义
        1.5.2 主要研究内容
        1.5.3 研究技术路线
    1.6 创新点
2 EGCG对高脂喂养小鼠体重、摄食量、血糖血脂和脂肪积累的影响
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 材料与试剂
        2.2.2 仪器与设备
        2.2.3 实验动物与饲料
        2.2.4 动物分组与实验设计
        2.2.5 血液与组织样本采集
        2.2.6 血液生化指标检测
        2.2.7 脂肪组织苏木精-伊红(HE)染色
        2.2.8 数据处理
    2.3 实验结果与分析
        2.3.1 EGCG对小鼠体重、摄食量和食物热量利用率的影响
        2.3.2 EGCG对小鼠血糖血脂的影响
        2.3.3 EGCG对小鼠脂肪积累的影响
    2.4 讨论
    2.5 小结
3 EGCG对高脂喂养小鼠棕色脂肪活性及产热能力的影响
    3.1 引言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 材料与试剂
        3.2.2 仪器与设备
        3.2.3 棕色脂肪组织样本采集
        3.2.4 HE染色
        3.2.5 小鼠低温暴露实验
        3.2.6 实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测目的基因表达
    3.3 实验结果与分析
        3.3.1 EGCG对小鼠棕色脂肪组织形态的影响
        3.3.2 EGCG对低温暴露小鼠体温与热量分布的影响
        3.3.3 EGCG对小鼠棕色脂肪组织产热关键基因表达的影响
    3.4 讨论
    3.5 小结
4 EGCG对棕榈酸诱导的BV-2小胶质细胞炎症反应的影响
    4.1 引言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 材料与试剂
        4.2.2 仪器与设备
        4.2.3 试剂配制
        4.2.4 小鼠BV-2小胶质细胞的培养
        4.2.5 实验分组
        4.2.6 MTT法测定细胞增殖率
        4.2.7 油红O染色
        4.2.8 酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测相关炎症因子水平
        4.2.9 RT-PCR检测目的基因表达
        4.2.10 蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测目的蛋白表达
    4.3 实验结果与分析
        4.3.1 EGCG对BV-2小胶质细胞活力的影响
        4.3.2 EGCG对PA诱导的BV-2小胶质细胞脂质积累的影响
        4.3.3 EGCG对PA诱导的BV-2小胶质细胞炎症因子释放水平的影响
        4.3.4 EGCG对PA诱导的BV-2小胶质细胞NF-κB和JAK2/STAT3通路关键基因表达的影响
        4.3.5 EGCG对PA诱导的BV-2小胶质细胞NF-κB和JAK2/STAT3通路关键蛋白表达的影响
    4.4 讨论
    4.5 小结
5 EGCG对高脂喂养小鼠下丘脑炎症反应的影响
    5.1 引言
    5.2 材料与方法
        5.2.1 材料与试剂
        5.2.2 仪器与设备
        5.2.3 试剂配制
        5.2.4 动物分组与实验设计
        5.2.5 心脏灌流取脑
        5.2.6 脑组织冰冻切片
        5.2.7 免疫荧光染色
        5.2.8 ELISA检测相关炎症因子水平
        5.2.9 WB检测目的蛋白表达
    5.3 结果与分析
        5.3.1 EGCG对小鼠下丘脑小胶质细胞激活情况的影响
        5.3.2 EGCG对高脂喂养小鼠下丘脑炎症因子释放水平的影响
        5.3.3 EGCG对高脂喂养小鼠下丘脑NF-κB和JAK2/STAT3通路关键蛋白表达的影响
    5.4 讨论
    5.5 小结
6 总结与展望
    6.1 总结
    6.2 展望
参考文献
作者简历



本文编号：3775327