小胶质细胞在系统性红斑狼疮自身抗体诱导的脑认知障碍中的作用及机制的研究

发布时间：2023-04-11 17:36

　　目的:系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种多系统受累的慢性自身免疫性疾病。临床表现多种多样,累及肾脏出现蛋白尿,血尿乃至肾衰竭;心血管系统受累则常出现心包炎,心内膜炎及冠状动脉损害。当SLE患者出现无菌性脑炎,脑血管病变,头痛,急性意识错乱,认知功能减退,情绪障碍及精神病等中枢神经系统(central nervous system,CNS)受累症状时,称之为神经精神性狼疮,即狼疮脑病(neuropsychiatric SLE,NPSLE)。目前有关NPSLE的病理机制仍不清楚。已有临床研究发现抗核糖体P蛋白自身抗体(autoantibodies against ribosomal P protein,Anti-P)等来自SLE患者血清中的自身抗体与NPSLE的神经精神症状密切相关。在动物实验中发现这些自身抗体可攻击大脑海马区神经元从而造成空间记忆功能的损害。然而既往有关NPSLE研究大多只检验了自身抗体对大脑神经元的直接作用,而在CNS中发挥免疫和神经调节作用的小胶质细胞却很少受到关注。目前已有越来越多的证据表明,小胶质细胞介导的神经...

【文章页数】：104 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要试剂和仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器及耗材
    2.2 实验材料和方法
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 血清收集和Anti-P IgG的纯化
        2.2.3 小鼠侧脑室套管植入及微量注射
        2.2.4 米诺环素给药处理
        2.2.5 小鼠脑血管活体显微成像
        2.2.6 小鼠听皮层电极植入手术过程
        2.2.7 电生理记录和声音刺激
        2.2.8 BBB开放,Anti-P IgG注射及脑电图记录
        2.2.9 电生理数据采集与分析
        2.2.10 建立小胶质细胞消除模型
        2.2.11 小鼠腹侧海马套管植入手术
        2.2.12 海马vCA1区局部微量注射
        2.2.13 Rapa给药处理
        2.2.14 行为测试
        2.2.15 脑组织取材及切片制作
        2.2.16 免疫荧光染色
        2.2.17 实时荧光定量PCR检测脑组织内细胞因子表达水平
        2.2.18 数据分析
实验一 :侧脑室注射SLE血清对小鼠脑小胶质细胞及微血管内白细胞活动的影响
    3 结果
        3.1 ICV注射SLE血清后激活小胶质细胞
        3.2 SLE血清触发白细胞向CNS募集
        3.3 SLE血清注射导致脑微血管内皮细胞活化
        3.4 SLE血清诱导脑组织内炎症因子和趋化因子水平升高
        3.5 米诺环素治疗缓解了SLE血清诱导的小胶质细胞活化及炎症反应
实验二 :SLE患者Anti-P IgG对大脑听觉稳态反应的损害及小胶质细胞的保护作用
    4 结果
        4.1 Anti-P IgG造成ASSR反应一过性增强
        4.2 Anti-P IgG激活小胶质细胞
        4.3 当小胶质细胞缺失时Anti-P IgG造成ASSR不可逆损害
        4.4 小胶质细胞缺失后Anti-P IgG导致神经元数量减少
实验三 :Anti-P IgG对腹侧海马CA1 区介导的社会认知功能的影响
    5 结果
        5.1 Anti-P IgG损害小鼠社会认知记忆能力
        5.2 Anti-P IgG对嗅觉和运动功能无显著影响
        5.3 Anti-P IgG导致海马神经元数量减少及胶质细胞活化
        5.4 Anti-P IgG增加促炎细胞因子的产生
        5.5 Rapa缓解Anti-P IgG导致的社交认知记忆障碍
        5.6 Rapa缓解Anti-P IgG导致的神经数量减少及胶质细胞活化
        5.7 Rapa抑制Anti-P IgG诱导的促炎细胞因子产生
6 讨论
    6.1 SLE患者血清诱导的小胶质细胞活化及微血管内白细胞响应
    6.2 ASSR与 Anti-P IgG诱导的神经电生理活动异常
    6.3 小胶质细胞对Anti-P IgG诱导的神经损伤的保护作用
    6.4 Anti-P IgG与社会认知功能障碍
    6.5 Rapa对 Anti-P IgG诱导的脑功能障碍的防治作用
7 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3789477