CP-25的外周血单个核细胞药动学研究及与P-糖蛋白的相互作用

发布时间：2023-04-17 03:26

　　类风湿关节炎(RA)是一种自身性免疫性疾病。免疫细胞在RA病程的不同阶段充当了重要角色,它们之间形成一个细胞-细胞相互作用的复杂网络,控制RA的发生与发展,包括释放炎症介质、诱导细胞增殖以及血管生成等。细胞药动学的研究已逐渐成为传统药动学的一个分支,并且越来越受到关注。药物通常通过被动转运或主动运输进入细胞,但同时又会被转运蛋白外排出细胞,转运蛋白的过表达是某些药物产生耐药性的主要原因,这往往会引起细胞中药动学性质的改变,降低药物在细胞中的累积量。多药耐药性(MDR)被普遍认为是导致肿瘤和感染性疾病患者治疗失败的一个重要原因。然而最近的研究发现这种现象也存在于RA这种自身免疫性疾病中。P-糖蛋白(P-gp)作为ABC转运超家族中的重要一员,与MDR密切相关,参与转运多种改善病情抗风湿药(DMARDs)。研究表明芍药苷(Pae)是P-gp的底物,同时Pae可以下调肿瘤细胞P-gp的表达。芍药苷-6-氧-苯磺酸酯(CP-25)作为一个新型活性单体化合物,免疫细胞是其发挥抗炎免疫调控作用的重要靶细胞。本所正在进行的研究发现CP-25可以和免疫细胞胞质中的GRK2相结合,抑制炎症相关信号通路的...

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

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英文缩略词表(Abbreviation)
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 CP-25在PBMC的吸收特性以及药物浓度-时间曲线的研究
    1 实验材料
        1.1 药品和试剂
        1.2 仪器和设备
        1.3 实验动物
    2 实验方法
        2.1 大鼠PBMC的制备
        2.2 大鼠血浆和PBMC样品中CP-25和Pae的UPLC-MS/MS分析方法的建立
        2.3 细胞增殖反应的检测
        2.4 细胞外浓度和时间对PBMC转运CP-25和Pae的影响
        2.5 温度对PBMC转运CP-25和Pae的影响
        2.6 单次给药后检测CP-25和Pae在血浆和PBMC中的浓度
        2.7 多次给药后检测CP-25在血浆和PBMC中的浓度
        2.8 正常和AA大鼠单次和多次给药后检测CP-25在PBMC中的浓度
        2.9 CP-25在血浆和PBMC中浓度的相关性研究
        2.10 细胞总蛋白的测定
        2.11 检测指标
        2.12 数据处理及分析
    3 结果
        3.1 方法学结果
        3.2 CP-25和Pae对PBMC活性的影响
        3.3 细胞总蛋白的测定
        3.4 细胞外浓度和时间对PBMC转运CP-25和Pae的影响
        3.5 温度对PBMC转运CP-25和Pae的影响
        3.6 单次给药后CP-25和Pae在血浆和PBMC中浓度的比较
        3.7 多次给药后CP-25在血浆和PBMC中的药物浓度-时间曲线
        3.8 正常和AA大鼠单次和多次给药后CP-25在PBMC中的药物浓度-时间曲线及药动学参数
        3.9 血浆和PBMC中CP-25浓度的相关性研究
第二部分 CP-25在PBMC外排的特性以及对PBMCP-gp表达和功能的影响
    1 实验材料
        1.1 药品和试剂
        1.2 仪器和设备
    2 实验方法
        2.1 维拉帕米对CP-25在PBMC中浓度的影响
        2.2 时间对CP-25在PBMC上外排的影响
        2.3 时间对转运蛋白抑制剂影响CP-25在PBMC上外排的研究
        2.4 浓度对转运蛋白抑制剂影响CP-25在PBMC上外排的研究
        2.5 时间和浓度对TNF-α影响正常PBMCP-gp表达的研究
        2.6 P-gp对CP-25在PBMC上外排的影响
        2.7 CP-25对TNF-α刺激的PBMCP-gp表达的影响
        2.8 CP-25对TNF-α刺激的PBMC的P-gp功能的影响
        2.9 CP-25影响自身在TNF-α刺激的PBMC中的浓度
        2.10 检测指标和数据处理及分析
    3 结果
        3.1 维拉帕米增加CP-25在PBMC中的浓度
        3.2 时间对CP-25在PBMC上外排的影响
        3.3 五种转运蛋白抑制剂对CP-25在PBMC上外排的影响
        3.4 TNF-α对PBMC上P-pg表达的影响
        3.5 P-gp对CP-25在PBMC上外排的影响
        3.6 CP-25降低TNF-α刺激的PBMC上P-pg的表达
        3.7 CP-25降低TNF-α刺激的PBMC上P-pg的功能
        3.8 CP-25增加自身在TNF-α刺激的PBMC中的浓度
第三部分 CP-25对AA大鼠PBMC和组织中P-gp表达的影响
    1 实验材料
        1.1 药品和试剂
        1.2 仪器和设备
        1.3 实验动物
    2 实验方法
        2.1 AA对大鼠PBMC中P-gp表达的影响以及CP-25的抑制作用
        2.2 AA大鼠给药后体内PBMC中CP-25浓度的变化
        2.3 正常和AA及给药治疗的大鼠各组织P-gp表达的研究
        2.4 检测指标和数据处理及分析
    3 结果
        3.1 CP-25对AA大鼠整体指标的影响
        3.2 CP-25降低AA大鼠PBMCP-gp的表达
        3.3 AA大鼠给药后PBMC中CP-25浓度的变化
        3.4 正常和AA及给药治疗的大鼠各组织P-gp表达
讨论
结论
课题创新点
下一步工作设想
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3792469