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MiR-30b-5p调节Huh-7细胞脂质代谢的作用及机制研究

发布时间:2023-04-25 00:54
  背景:MiRNAs是一种22nt左右的多功能非编码RNA,能够与靶mRNA的3’UTR通过碱基互补配对的原则进行结合,抑制靶mRNA的翻译或导致mRNA降解,也能够分泌到细胞外介导细胞间的信息传递。MiRNAs能调控蛋白合成,影响多种信号通路,在肿瘤发生和代谢疾病中发挥着重要的作用,在疾病的早期检测、治疗、疾病进展监测以及机体对各种治疗的反应等方面具有重要的潜力和应用价值。近期研究表明miR-30b-5p与NAFLD患者脂代谢异常密切相关,在NAFLD细胞模型和小鼠模型中均观测到miR-30b-5p的表达下降,但miR-30b-5p对脂质代谢的影响还存在争议,在脂代谢中的具体作用机制尚不清楚。本研究的目的是探讨miR-30b-5p对肝癌细胞系Huh-7细胞脂质代谢的影响及其机制。材料和方法:不同浓度的FFAs(油酸:棕榈酸=2:1)处理细胞24h,提取各组细胞总RNAs并进行反转录,通过q RT-PCR的方检测miR-30b-5p的表达量,研究在Huh-7细胞和HepG2细胞中FFAs刺激的对mi R-30b-5p表达的影响。建立miR-30b-5p过表达和抑制的单克隆稳定细胞株。使用...

【文章页数】:44 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
引言
实验材料与方法
    1 细胞培养
    2 游离脂肪酸处理
    3 慢病毒感染及单克隆稳定细胞株的建立
    4 油红O染色
    5 细胞内甘油三酯检测
    6 Real-time PCR
    7 Western blot
    8 MiR-30b-5p靶点的确定
    9 统计
实验结果
    1 游离脂肪酸处理后细胞内miR-30b-5p的表达
    2 MiR-30b-5p稳定过表达或抑制的单克隆细胞株的建立
    3 MiR-30b-5p调节Huh-7细胞的脂质积累
    4 MiR-30b-5p调节Huh-7细胞内脂质代谢相关基因的表达
    5 MiR-30b-5p调控PPARGC1A的表达
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号:3800376

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