谷物肽对1型糖尿病的作用及机制研究

发布时间：2023-05-06 23:23

　　1型糖尿病(T1D)是一种自身免疫性疾病,患者分泌胰岛素的胰腺β细胞被浸润性免疫细胞靶向破坏,从而导致其对外源性胰岛素的终生依赖。近年来,T1D的发病率和致死率快速上升已经对公众健康构成重大的威胁。食物是影响T1D发生和发展的一个重要环境因素。食源肽不仅具有易消化、易吸收的营养功能,还具有增强免疫力、抗氧化和抗炎等生理功能,已被广泛认可具有应用于药食同源食品方面的巨大开发潜力。T1D也是一种炎症性疾病,具有抗炎性的食源肽可能会对T1D发挥有益作用。因此,本文利用T1D小鼠动物实验模型,考察大豆肽、绿豆肽、玉米肽、玉米肽分离纯化产物、小麦肽和小麦肽分离纯化产物对T1D的影响效果,阐明上述物质的特性与降血糖效果之间的关系,并探索它们的作用机理。在此基础上,从具有降糖效果的肽中筛选出具有具有保护T1D作用的纯化肽。利用大豆肽、绿豆肽、玉米肽和小麦肽喂食由STZ诱导的C57BL/6J糖尿病小鼠,根据血糖水平、胰岛形态和胰岛炎结果,发现玉米肽和小麦肽缓解C57BL/6J小鼠糖尿病的作用比较显著。利用玉米肽和小麦肽喂食非肥胖糖尿病(NOD)小鼠,进一步确定它们的降血糖效果。研究发现玉米肽延缓NOD...

【文章页数】：93 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
缩略符号对照表
第一章 绪论
    1.1 1型糖尿病概述
        1.1.1 1型糖尿病发病机理
        1.1.2 1型糖尿病与炎症
        1.1.3 1型糖尿病细胞模型
        1.1.4 1型糖尿病动物模型
    1.2 食源肽
        1.2.1 食源肽概述
        1.2.2 食源肽的分离纯化和鉴定
        1.2.3 食源肽的生理功能
        1.2.4 肽对T1D的影响
        1.2.5 肽在T1D中的临床应用
    1.3 大豆肽、绿豆肽、玉米肽和小麦肽在T1D方面的国内外研究进展
    1.4 本论文的立题意义和研究内容
        1.4.1 立题意义
        1.4.2 研究内容
第二章 几种谷物肽对T1D小鼠发病率的影响
    2.1 引言
    2.2 实验材料与设备
        2.2.1 试剂与耗材
        2.2.2 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 STZ诱导的C57BL/6J糖尿病小鼠和动物实验设计
        2.3.2 NOD小鼠和动物实验设计
        2.3.3 血糖的监测
        2.3.4 口服糖耐量实验
        2.3.5 ELISA法测定胰岛素和细胞因子
        2.3.6 组织学评价
        2.3.7 免疫组化分析
        2.3.8 免疫荧光分析
        2.3.9 RT-qPCR
        2.3.10 数据统计与分析
    2.4 结果和讨论
        2.4.1 几种谷物肽对STZ诱导的C57BL/6J糖尿病小鼠血糖和血清中胰岛素含量的影响
        2.4.2 几种谷物肽对STZ诱导的C57BL/6J糖尿病小鼠胰腺胰岛的影响
        2.4.3 几种谷物肽对STZ诱导的C57BL/6J糖尿病小鼠血清中细胞因子的影响
        2.4.4 玉米肽和小麦肽对NOD小鼠发病和血清中胰岛素含量的影响
        2.4.5 玉米肽和小麦肽对NOD小鼠胰岛炎性浸润、β细胞增殖和面积的影响
        2.4.6 玉米肽和小麦肽对NOD小鼠血清中细胞因子含量的影响
        2.4.7 玉米肽对糖尿病NOD小鼠血糖的影响
        2.4.8 玉米肽和小麦肽的混合物对NOD小鼠发病和血清中胰岛素含量的影响
        2.4.9 玉米肽和小麦肽的混合物对NOD小鼠胰岛炎性浸润和β细胞面积的影响
        2.4.10 玉米肽和小麦肽的混合物对NOD小鼠血清和胰腺中细胞因子水平的影响
        2.4.11 玉米肽和小麦肽的混合物对NOD小鼠血清中氨基酸含量的影响
    2.5 本章小结
第三章 玉米肽和小麦肽的组分分离及对T1D小鼠发病率的影响
    3.1 引言
    3.2 实验材料与方法
        3.2.1 试剂与耗材
        3.2.2 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 相对分子量分布测定
        3.3.2 Sephadex G-15 凝胶柱分离玉米肽和小麦肽
        3.3.3 NOD小鼠和动物实验设计
        3.3.4 血糖的监测
        3.3.5口服糖耐量实验
        3.3.6 ELISA法测定胰岛素和细胞因子
        3.3.7 数据统计与分析
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 玉米肽和小麦肽的相对分子量分布
        3.4.2 玉米肽各组分相对分子量分布
        3.4.3 C1和C2对NOD小鼠发病和血清中胰岛素含量的影响
        3.4.4 C1和C2对NOD小鼠血清中细胞因子含量的影响
        3.4.5 小麦肽各组分相对分子量分布
        3.4.6 W1和W2对NOD小鼠发病和血清中胰岛素含量的影响
        3.4.7 W1和W2对NOD小鼠血清中细胞因子含量的影响
    3.5 本章小结
第四章 保护T1D肽的体外筛选方法的建立
    4.1 引言
    4.2 实验材料与方法
        4.2.1 试剂与耗材
        4.2.2 实验仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 抗氧化性测定
        4.3.2 疏水性测定
        4.3.3 氨基酸测定
        4.3.4 MIN-6 细胞培养
        4.3.5 CCK-8 法测细胞增殖活性
        4.3.6 RT-qPCR
        4.3.7 ELISA法测定细胞上清液中细胞因子含量
        4.3.8 数据统计与分析
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 肽对T1D的影响效果与抗氧化性的关系
        4.4.2 肽对T1D的影响效果与疏水性的关系
        4.4.3 肽对T1D的影响效果与氨基酸组成和含量的关系
        4.4.4 肽对T1D的影响效果与体外促进MIN-6 细胞增殖能力的关系
        4.4.5 肽对T1D的影响效果与体外抗炎能力的关系
    4.5 本章小结
第五章 C2和W2 中肽氨基酸序列鉴定和具有保护T1D作用肽的筛选
    5.1 引言
    5.2 实验材料与方法
        5.2.1 试剂与耗材
        5.2.2 实验仪器
    5.3 实验方法
        5.3.1 肽序列的质谱鉴定
        5.3.2 细胞培养
        5.3.3 CCK-8 法测细胞增殖
        5.3.4 RT-qPCR
        5.3.5 Western blot
        5.3.6 数据统计与分析
    5.4 结果与讨论
        5.4.1 C2和W2 中肽的氨基酸序列鉴定
        5.4.2 LK和 FL对 MIN-6 细胞增殖的影响
        5.4.3 LK和 FL对体外LPS刺激的MIN-6 细胞中IL-6和TNF-α基因表达水平的影响
        5.4.4 肽保护T1D的作用机理
    5.5 本章小结
主要结论与展望
    主要结论
    展望
论文创新点
致谢
参考文献
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文



本文编号：3809796