miR-20b在肥胖小鼠脂肪组织中的表达及对前脂肪细胞增殖和分化的影响

发布时间：2023-06-03 03:54

　　目的探究miR-20b在肥胖小鼠不同脂肪组织中的表达情况及对小鼠前体脂肪细胞(3T3-L1)增殖、分化的影响。方法构建C57BL/6小鼠的肥胖模型,实时荧光定量PCR检测性腺脂肪(g-Fat)、腹股沟脂肪(i-Fat)及肾周脂肪(p-Fat)组织中miR-20b表达水平。培养并诱导3T3-L1细胞,脂质体法将miR-20bmimic(miR-20bmimic组)、miR-20binhibitor(miR-20binhibitor组)和阴性对照(NC组)转染至3T3-L1细胞,CCK-8法和EdU法检测miR-20b对3T3-L1细胞增殖的影响;油红O染色与三酰甘油测定评估miR-20b对3T3-L1细胞分化的影响;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测miR-20b对3T3-L1细胞中增殖、分化标志物mRNA和蛋白表达的影响;双荧光素酶报告基因检测法验证miR-20b靶向调控3T3-L1细胞分化的基因。结果与正常对照组小鼠比较,肥胖造模组小鼠g-Fat、i-Fat、p-Fat中miR-20b均显著高表达(P<0.05或P<0.01)。与NC组比较,miR-20...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物与饲料
    1.2 主要材料与试剂
    1.3 方法
        1.3.1 动物造模与脂肪组织采集
        1.3.2 细胞培养与诱导分化
        1.3.3 细胞转染
        1.3.4 CCK-8检测
        1.3.5 EdU检测
        1.3.6 油红O染色及胞内三酰甘油水平测定
        1.3.7 实时荧光定量PCR
        1.3.8 Western blot
        1.3.9 双荧光素酶报告基因分析
    1.4 统计学处理
2 结果
    2.1 miR-20b在肥胖小鼠脂肪组织中高表达
    2.2 miR-20b抑制3T3-L1细胞的增殖
    2.3 miR-20b促进前脂肪细胞的分化
    2.4 miR-20b靶向Tcf4基因调控3T3-L1前脂肪细胞分化
3 讨论



本文编号：3828615