miR-326、miR-330-5p和DNMT1在SLE患者外周血单个核细胞中的表达与临床意义

发布时间：2024-01-21 08:55

　　目的:研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中mi R-326、mi R-330-5p及其靶基因DNMT1的表达水平,以及其与SLE患者的临床疾病活动度关系,初步探索mi R-326和mi R-330-5p调控DNMT1的表达在系统性红斑狼疮中的作用机制,为SLE的诊断和病情判读提供可靠的实验室指标。方法:首先,选取符合系统性红斑狼疮诊断标准的患者72例,根据系统性红斑狼疮患者系统性红斑狼疮的活动度评分(Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index,SLEDAI)标准,可以将SLE病例组分为高活动组21例(SLEDAI≥15分),中活动组25例(15分>SLEDAI≥10分)和低活动组26例(10分>SLEDAI≥5分),同时选取健康人群40例作为对照组,收集SLE病例组和健康对照组外周血单个核细胞,提取总RNA。采用实时荧光定量PCR技术(Quentitative Real-time,q PCR)技术检测mi R-326、mi R-330-5p以及...

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 系统性红斑狼疮的概况
        1.1.2 系统性红斑狼疮的病因及发病机制
        1.1.3 系统性红斑狼疮的治疗
    1.2 MicroRNA
        1.2.1 miRNA与系统性红斑狼疮
        1.2.2 miR-326/miR-330-5p与系统性红斑狼疮
    1.3 DNMT1与系统性红斑狼疮
第二章 实验材料与试剂
    2.1 实验设备与仪器
    2.2 试剂与耗材
第三章 实验及研究方法
    3.1 研究对象
        3.1.1 系统性红斑狼疮患者的选择标准
        3.1.2 健康对照组的选择标准
        3.1.3 健康对照组的排除标准
    3.2 实验方法
        3.2.1 SLE患者实验室指标及测定
        3.2.2 密度梯度法(Ficoll)分离外周血的单个核细胞(PBMCs)
        3.2.3 totalRNA的提取
        3.2.4 mRNA逆转录体系的配制
        3.2.5 合成引物及扩增体系的配制
        3.2.6 m RNA实时荧光定量PCR检测
        3.2.7 miRNA逆转录合成c DNA
        3.2.8 miRNA实时荧光定量PCR检测
    3.3 实验数据整理及统计学分析
        3.3.1 实验数据分析
        3.3.2 统计分析
第四章 实验结果
    4.1 .SLE患者常规实验室项目检测评表
    4.2 Real-time PCR检测miR-326和mi R-330-5p在 SLE患者PBMCs中的表达
    4.3 Real-time PCR检测DNMT1在SLE患者PBMCs中的表达
    4.4 miR-326、miR-330-5p与 DNMT1 之间的相关性分析及对SLE的诊断价值
    4.5 DNMT1mRNA与 SLEDAI的相关性分析
    4.6 miR-326、miR-330-5p与 SLEDAI的相关性分析
第五章 讨论
第六章 结论
参考文献
缩略词表
在学期间的研究成果
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3881659