n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的作用差异及CDK5/PPARγ介导的机制研究

发布时间：2024-02-15 05:00

　　背景与目的脂联素是防治肥胖及相关疾病极具价值的分子靶点。PUFA对脂联素的调节一直备受关注,现有研究提示n-3、n-6PUFA对脂联素的影响很可能不同,但无直接证据。因此,本研究拟在正常及炎症状态下比较n-3、n-6PUFA调节脂联素的效应差异,并首次从PPARγ、CDK5/p-PPARγ两条信号通路探讨二者调节脂联素的分子机理,试图揭示n-3、n-6PUFA作用差异的产生原因。其结果将为合理摄入PUFA提供新的科学依据,为预防和治疗肥胖等疾病提供新思路。方法3T3-L1前体脂肪细胞100%融合后加入地塞米松、胰岛素、IBMX,诱导分化至≥80%细胞变为成熟脂肪细胞。正常状态:10Oμmol/L n-3(EPA、DHA、α-ALA)、n-6PUFA(LA、AA)作用于脂肪细胞24h;n-3、n-6PUFA加或不加GW9662作用于脂肪细胞24h;EPA、α-ALA、LA作用于脂肪细胞24h后加或不加roscovitine继续培养2h;DHA、AA作用干脂肪细胞24h后加或不加TNF-α继续培养2h。炎症状态:100、200、300μmol/LPA作用于脂肪细胞24h;PA加或不加罗格列...

【文章页数】：122 页

【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 研究背景
    2 研究目的与意义
    3 创新之处
第二章 材料与方法
    1 3T3-L1脂肪细胞的培养
    2 油红O染色鉴定成熟脂肪细胞
    3 细胞受试
    4 MTT法测定细胞活性
    5 TBA法测定细胞培养液中MDA含量
    6 Real-time RT-PCR测定mRNA含量
    7 Western blot测定蛋白含量
    8 ELISA测定细胞培养液中脂联素含量
    9 免疫共沉淀(Co-IP)测定p-PPARγ (Ser273)含量、CDK5与PPARγ的相互作用
    10 数据的统计分析
    11 技术路线图
第三章 结果
    第一节 正常状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的作用差异及CDK5/PPARγ介导的机制研究
        1 3T3-L1脂肪细胞的诱导分化
        2 n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的作用差异
        3 n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的PPARγ分子机制研究
        4 n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的CDK5/p-PPARγ分子机制研究
        小结
    第二节 炎症状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的作用差异及CDK5/PPARγ介导的机制研究
        1 PA构建3T3-L1脂肪细胞炎症模型
        2 PA调节脂联素表达的CDK5/PPARγ分子机制研究
        3 炎症状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的作用差异
        4 炎症状态下n-3和n-6 PUFA调节CDK5/PPARγ的分子机制研究
        小结
第四章 讨论
    第一节 正常状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的作用差异及其分子机制研究
        1 n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的作用差异
        2 n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的PPARy分子机制
        3 n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的CDK5/p-PPARγ分子机制
        4 n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的效应差异主要与二者对PPARγ含量的不同影响有关
    第二节 炎症状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的作用差异及其分子机制研究
        1 炎症状态下PA抑制脂联素表达的CDK5/PPARγ分子机制研究
        2 炎症状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的效应差异
        3 炎症状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素表达的CDK5/PPARγ分子机制研究
    第三节 正常及炎症状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素、CDK5/PPARγ的作用比较
        1 正常及炎症状态下同一脂肪酸调节脂联素、CDK5/PPARγ的作用差异
        2 不同状态下n-3和n-6 PUFA调节脂联素、CDK5/PPARγ的现实意义
        3 研究局限性
第五章 结论
参考文献
附录
攻读博士学位期间成果
致谢



本文编号：3899250