低频脉冲电磁场通过cAMP/PKA信号通路促进成骨细胞分化的研究

发布时间：2024-02-26 23:58

　　目的研究50 Hz 0.6 m T低频脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMFs)是否通过cAMP/PKA信号通路促进成骨细胞分化。方法体外培养大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs),传代融合后采用50 Hz 0.6 m T低频脉冲电磁场处理不同时间后检测细胞内cAMP浓度及PKA磷酸化水平的变化。使用2’,3’-双脱氧腺苷(DDA)抑制细胞内腺苷酸环化酶(AC)活性,检测经低频脉冲电磁场刺激后细胞碱性磷酸酶(ALP)活性及成骨性基因转录的变化;使用KT5720抑制PKA的磷酸化,检测经低频脉冲电磁场刺激后细胞成骨性基因转录及蛋白表达的变化。结果采用50 Hz 0.6 m T低频脉冲电磁场处理20 min后,ROBs内cAMP浓度显著升高,持续至40 min后迅速下降,至2 h时再次升高,p-PKA亦表现出同样的变化趋势,说明低频脉冲电磁场激活了cAMP/PKA信号通路;使用DDA抑制腺苷酸环化酶活性后,由低频脉冲电磁场引起的ALP活性及成骨性基因转录升高显著下降,同样使用KT5720抑制PKA磷酸化后,...

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【部分图文】：

图1低频电磁场细胞处理仪Fig.1Thedeviceproducingelectromagneticfieldsforcellexposure.

促进骨形成，对此本文进行了研究，以深入探讨电磁场促进骨形成的分子机理。1材料和方法1.1低频电磁场细胞处理仪本研究所用低频电磁场细胞处理仪由本课题组自行研制，发明专利号：ZL201110423102.0。整套装置由计算机控制模块、数模转化模块、信号放大模块、线圈、磁场传感器和温度....

图2低频脉冲电磁场处理后ROBs内cAMP浓度变化

提高成骨性基因转录的影响，结果如图6所示，低频脉冲电磁场显著提高了成骨性基因Osx、Col-I、Bmp-2的表达（**P<0.01，*P<0.05），抑制剂KT5720未对ROBs成骨性基因的转录产生明显影响，而当其抑制PKA的活性后，由低频脉冲电磁场引起的成骨性基因转录增强的现....

图3低频脉冲电磁场处理后ROBs内p-PKA浓度变化

图4抑制剂DDA对低频脉冲电磁场处理后ALP活性变化的影响

http://www.j-smu.comJSouthMedUniv,2016,36(11):1508-1513对照组有显著的统计学意义（**P<0.01），之后回归至对照组水平，于2h时再次升高（**P<0.01），说明第二信使cAMP浓度的升高引起了PKA磷酸化水平的变化。2.....

本文编号：3912057