atRA通过上调脂肪细胞VEGF表达促进内皮细胞管形成及其机制研究

发布时间：2024-03-11 04:06

　　【背景与目的】在与肥胖相关的多种慢性代谢性疾病的发生发展过程中,脂肪细胞肥大、氧气弥散障碍,是造成脂肪组织缺氧和脂肪细胞坏死的首要原因。研究发现,促进脂肪组织血管新生,能够减轻脂肪组织缺氧,改善肥胖及其相关的糖脂代谢紊乱。本实验旨在研究全反式维甲酸是否可上调脂肪细胞血管内皮生长因子的分泌,促进内皮细胞小管形成,并初步探讨其作用机制。【方法】(1)以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,以不同浓度的全反式维甲酸(all-trans Retionic Acid,atRA)与脂肪细胞诱导分化液同处理3T3-L1前脂肪细胞,通过油红O实验及细胞内脂肪酸水平反映脂肪细胞分化成熟的情况;(2)收集上述各组脂肪细胞的培养基上清液(conditioned medium of adipose cells,ACs-CM),采用Transwell实验和内皮细胞成管实验检测上清液对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)迁移和管形成的诱导情况;(3)采用蛋白质免疫印迹(western blot,WB)和实时定量聚合酶链反应(quantitati...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要英文缩略词索引
第1章 绪论
第2章 实验材料
    2.1 细胞及主要试剂
    2.2 主要实验仪器
    2.3 主要试剂配制
第3章 实验方法
    3.1 3T3-L1小鼠前脂肪细胞的培养
        3.1.1 细胞复苏
        3.1.2 细胞传代
        3.1.3 细胞冻存
    3.2 3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化
    3.3 油红O染色实验
    3.4 3T3-L1小鼠前脂肪细胞内TG水平测定
    3.5 人脐静脉内皮细胞血管形成实验
    3.6 人脐静脉内皮细胞迁移实验
    3.7 atRA对3T3-L1 细胞PI3K/AKT/mTOR/VEGF基因m RNA表达的影响
    3.8 atRA对3T3-L1 细胞PI3K/AKT/mTOR/VEGF基因和蛋白表达的影响
    3.9 数据处理与分析
第4章 实验结果
    4.1 atRA抑制3T3-L1 前脂肪细胞分化成熟
    4.2 atRA处理组脂肪细胞上清液诱导HUVECs血管形成
    4.3 atRA处理组脂肪细胞上清液诱导HUVECs迁移
    4.4 atRA促进3T3-L1 前脂肪细胞VEGF表达
    4.5 at RA通过PI3K/AKT/mTOR信号通路促进3T3-L1 前脂肪细胞VEGF表达
        4.5.1 atRA激活PI3K/AKT/mTOR信号通路
        4.5.2 at RA促进3T3-L1 前脂肪细胞VEGF表达依赖PI3K/AKT/-m TOR信号通路
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
综述
    参考文献
硕士期间发表论文
资助项目
致谢



本文编号：3925796