NLRP3炎症小体在自身免疫性甲状腺炎免疫细胞中的作用及其机制研究

发布时间：2024-04-21 02:26

　　目的:自身免疫性甲状腺炎(Autoimmune thyroiditis,AIT)作为临床甲减的主要病因,是一种常见的器官特异性自身免疫病。其明确病因虽未完全清楚解释,但目前认为是遗传、环境等多因素共同作用所致的免疫稳态失衡。由胞浆内模式识别受体及其组分组装而成的高分子蛋白复合体被称为炎症小体,有相关研究报道炎症小体参与激活T细胞等过程,NLRP3是目前研究最多的炎症小体,NLRP3炎症小体在AIT的发病中起作用已被本课题组证实。那么,碘是AIT发病的重要环境因素之一,AIT经典动物模型NOD.H-2h4小鼠也证实碘是诱发和加重AIT的必要条件,但碘过量是否影响NLRP3炎症小体分泌尚未见报道。本文旨在AIT患者外周血培养的PBMC原代细胞中探讨碘对NLRP3炎症小体的作用以及对辅助性T细胞分化的影响,以及观察与炎症小体激活有关的唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-1(Si glec-1)在自身免疫甲状腺炎患者外周血单个核细胞(PBMC)的表达水平,分析其与AIT炎症反应指标的相关性;并进一步在培养的PBMC原代细胞中探讨siglec1激活对调节辅助性T细胞分化、促进炎症反应的作用。方法:本研...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分:NLRP3炎症小体在自身免疫性甲状腺炎免疫细胞中的表达及其机制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 主要仪器及耗材
        2.2 研究对象及标本采集
        2.3 方法
            2.3.1 密度梯度离心法分离外周血单个核细胞
            2.3.2 PBMC细胞培养
            2.3.3 RNA提取及Real-time PCR
            2.3.4 蛋白提取及Western-Blot
            2.3.5 免疫印记(Western-Blot)
            2.3.6 流式细胞术
        2.4 统计学处理
    3 结果
        3.1 患者一般资料统计
        3.2 碘化钠对AIT组及NC组 PBMC上 NLRP3 炎症小体及其组分mRNA相对表达的影响
        3.3 碘化钠对AIT组及NC组 PBMC上 NLRP3 炎症小体及其组分蛋白表达水平的影响
        3.4 LPS刺激下碘对AIT患者单核细胞NLRP3 表达及Th1、Th17 分化比例的影响
    4 讨论
第二部分:与炎症小体激活可能相关的Siglec-1在AIT患者外周血单个核细胞高表达并与炎症反应指标相关
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 主要仪器
        2.2 方法
            2.2.1 分离外周血PBMCs和提取细胞总RNA
            2.2.2 PBMC细胞培养
            2.2.3 sSiglec-1 检测
            2.2.4 RT-PCR检测Siglec-1mRNA
            2.2.5 蛋白提取及Western-Blot
            2.2.6 流式细胞术
            2.2.7 统计学处理
    3 结果
        3.1 AIT组及正常对照组血清sSiglec-1 水平
        3.2 Siglec-1在AIT患者PBMC中表达水平升高
        3.3 Siglec-1在AIT患者单核细胞中表达水平升高
        3.4 PBMC中各T细胞亚群的比例
        3.5 PBMC中 Siglec-1 m RNA及 Th1 细胞比例(%)、Th17 细胞比例(%)表达水平与血清TPOAb/TgAb的相关性分析
        3.6 碘化钠对AIT组及正常对照组单核细胞中Siglec-1 表达水平、PBMC中Th1细胞比例(%)、Th17 细胞比例(%)的影响
    4 讨论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3960277