自噬对胰腺脂质沉积及胰岛素敏感性的影响

发布时间：2017-06-14 03:04

  本文关键词：自噬对胰腺脂质沉积及胰岛素敏感性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：建立高脂饮食所致肥胖大鼠模型，同时给予自噬抑制剂干预，检测胰腺脂质沉积程度与自噬相关蛋白LC3的表达情况，分析自噬对胰腺脂质沉积及胰岛素敏感性的影响；观察不同糖耐量人群胰腺脂质沉积与胰岛素敏感性的差异，探讨胰腺脂质沉积与胰岛素抵抗的关系，为进一步探讨自噬在人体内2型糖尿病发生发展中可能的作用提供参考依据。 方法： 1.实验研究：8周龄雄性SD大鼠30只适应性喂养7天后随机平均分为普通喂养(NC)组、高脂喂养(HF)组和高脂喂养加氯喹干预(HFC)组，12周后采集空腹血检测甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)和空腹血糖(FBG)、胰岛素(Fins)含量，计算稳态模型胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数评估胰岛素敏感性；口服葡萄糖耐量试验(OGTT)，评估大鼠糖耐量水平；胰腺组织切片行HE染色，观察各组大鼠胰腺组织形态及脂质沉积情况；Western blot法检测胰腺组织自噬相关蛋白LC3表达水平。 2.临床研究：纳入受试者120例，分为糖耐量正常的对照(NC)组37例，糖调节受损(IGR，包括空腹血糖调节受损和糖耐量异常)组37例，2型糖尿病(T2DM)组46例，收集身高、体重、腰围、臀围，计算体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)；空腹10小时留取外周血分离血清，采用全自动生化分析仪检测FBG、糖负荷后2小时血糖(2hPG)、TG、TC、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。采用放射免疫法(RIA)检测Fins和糖负荷后2小时胰岛素(Ins)水平；采用稳态模型评估HOMA-IR和HOMA-β指数；所有受试者均接受上腹部计算机断层扫描(computed tomography, CT)技术平扫，用脾胰CT差值评估胰腺脂质沉积程度，以肝脾CT比值评估肝脏脂质沉积；采用SPSS13.0软件分析自噬、胰腺脂质沉积的组间差异及其与各项指标的相关性。 结果： 1.实验研究结果： 1.1三组大鼠生长指标的比较 各组大鼠基线体重、体长、腰围等生长指标差异无统计学意义，至实验第12周时高脂喂养的HF组、HFC组大鼠体重、Lee's指数、腰围(WC)较普通喂养NC组大鼠明显增加，差异有统计学意义(P0.05)。 1.2三组大鼠OGTT结果的比较 OGTT试验结果显示，HF组、HFC组大鼠各时点血糖值和葡萄糖曲线下面积(AUCG)均高于NC组(P＜0.05)，血糖在OGTT20'达到血糖峰值，后长时间处于较高水平，而NC组在OGTT40'达血糖峰值后逐渐降至正常水平。 13三组大鼠糖脂代谢及胰岛素敏感性的比较 HF组、HFC组大鼠的FBG、TG、TC和Fins均较NC组明显升高，HOMA-IR在3组中逐渐增加，而HOMA-β指数明显降低(P＜0.05)。 1.4三组大鼠胰腺形态和脂质沉积的比较 胰腺组织病理切片HE染色结果显示，，NC组大鼠胰腺组织内未见明显的脂滴空泡，HF组大鼠胰腺组织细胞内空泡数量较NC组明显增加；而HFC组胰岛内大量脂滴空泡形成，胰岛周围可见脂肪组织浸润。 采用图像分析软件，计算每高倍视野（小叶内、小叶间）内脂肪细胞的百分比，发现胰腺脂肪沉积程度在NC、HF及HFC三组间逐渐增加，差异有统计学意义(P0.05)。 1.5胰腺脂质沉积与代谢指标的相关性分析 线性相关分析表明，胰腺脂质沉积与体重、Lee’s指数、WC、TG、TC、FBG、Fins、HOMA-IR指数呈正相关，多元回归分析表明，HOMA-IR指数、TC是胰腺脂质沉积的独立影响因素。 1.6三组大鼠胰腺自噬蛋白LC3表达的比较 在相对分子量16ku附近可见LC3蛋白杂交条带，经光密度分析显示，NC组蛋白表达基本相同，HF组蛋白表达较NC组明显升高，而HFC组则明显降低(P＜0.05)。 2.临床研究结果： 2.1三组一般临床资料和生化特征 NC组、IGR组、T2DM各组间性别、年龄、SBP、DBP、LDL-C差异无统计学意义(均P0.05)。 IGR组和T2DM组WHR、FBG、Fins、2hPG、Ins、HOMA-IR指数较NC组升高，T2DM组BMI、TG、TC较其余两组明显增加，而HDL-C、HOMA-β指数则明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。 2.2各组脾胰CT差值和肝脾CT比值的差异 IGR组较NC组脾胰CT差值升高，肝脾CT比值降低，但差异无统计学意义，T2DM组脾胰CT差值较NC组、IGR组均明显增加，肝脾CT比值明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。 2.3脾胰CT差值与其他指标的相关性分析 线性相关分析表明，脾胰CT差值与HOMA-IR、HOMA-β、肝脾CT比值、年龄、BMI、WHR、FBG、FIns、2hPG、Ins、TG、TC及HDL相关(R分别为0.758，-0.549，-0.732，0.283，0.657，0.687，0.683，0.734，0.659，0.311，0.559，0.460，-0.294，P＜0.05)，与SBP、DBP、LDL-C无显著相关性。 多元逐步回归分析显示，HOMA-IR、肝脾CT比值、BMI、WHR、年龄、TC与脾胰CT差值独立相关，可能是胰腺脂质沉积的独立影响因素(P0.05)。 结论： 1.高脂饮食能诱导肥胖、糖脂代谢紊乱和胰腺脂质沉积，加重IR和β细胞功能障碍。 2.高脂饮食可引起胰腺组织自噬激活，可能是一种代偿性保护机制。 3.抑制自噬活性后，高脂饮食诱导的IR和胰腺脂质沉积更加明显，可能与自噬的代偿性保护机制缺失有关。 4.自噬可能参与IR和胰岛β细胞功能调节，在2型糖尿病的发病中起重要保护作用。 5.随着胰腺脂质沉积程度增加，不同糖耐量人群糖脂代谢紊乱和IR也明显加重，提示胰腺脂质沉积可能参与IR的发生。
【关键词】：自噬 胰腺脂质沉积 胰岛素敏感性 2型糖尿病
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R589.2
【目录】：

• 目录4-5
• 主要英文缩略词表5-7
• 摘要7-11
• Abstract11-16
• 第一部分 实验研究 自噬对大鼠胰腺脂质沉积及胰岛素敏感性的影响16-39
• 1．前言16-19
• 2．材料与方法19-25
• 3．结果25-31
• 4．讨论31-35
• 5．结论35-36
• 6．参考文献36-39
• 第二部分 临床研究 不同糖耐量人群胰腺脂质沉积与胰岛素敏感性的关系39-55
• 1．前言39-41
• 2．材料与方法41-44
• 3．结果44-48
• 4．讨论48-52
• 5．结论52-53
• 6．参考文献53-55
• 不足之处及下一步研究方向55-56
• 综述56-66
• 参考文献63-66
• 附录66-68
• 致谢68

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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