低分子量褐藻糖胶对破骨细胞凋亡的影响

发布时间：2017-08-01 16:02

  本文关键词：低分子量褐藻糖胶对破骨细胞凋亡的影响

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【摘要】：目的探讨低分子量褐藻糖胶(LMWF)对小鼠单核细胞RAW264.7诱导成熟破骨细胞凋亡的影响。方法通过100ng/m L RANKL诱导RAW264.7细胞株分化为破骨细胞,经TRAP特异性染色和骨吸收陷窝对诱导后的细胞进行鉴定。鉴定成功后,用100 ng/m L RANKL诱导RAW264.7细胞株5 d后,使用含有LMWF的培养基继续培养3 d,通过对TRAP阳性细胞计数和分析骨吸收面积来观察低分子量褐藻糖胶对破骨细胞的抑制和骨吸收功能情况;采用流式细胞术检测LMWF对破骨细胞凋亡的影响,capsase-3活性测试试剂盒检测LMWF对capsase-3活性进行测定;RT-PCR检测LMWF对成熟破骨细胞BAX与BCL-2基因表达的影响。结果单纯采用100 ng/m L的RANKL可成功诱导成熟的、有功能的破骨细胞。LMWF可以明显抑制RANKL诱导成熟破骨细胞的形成以及成熟破骨细胞的骨吸收功能;流式细胞术显示LMWF可增加成熟破骨细胞的早期凋亡率;并且能升高capsase-3的活性;PCR显示LMWF可明显下调破骨细胞凋亡相关的BCL-2和上调BAX基因mRNA表达,降低BCL-2/BAX的比值。结论低分子量褐藻糖胶可抑制破骨细胞的活性与骨吸收能力,促进破骨细胞凋亡,其主要机制是通过下调BCL-2和上调BAX mRNA基因表达实现的。
【作者单位】： 天津市天津医院骨科研究所;中国中医科学院;
【关键词】： 低分子量褐藻糖胶 破骨细胞 骨质疏松 凋亡 caspase- BCL-
【基金】：天津市卫生局科技基金(2011KZ57) 天津市中医药管理局(13123)
【分类号】：R580
【正文快照】： 褐藻多糖硫酸酯是一类从海带中提取的天然硫酸化多糖,其主要成分为褐藻糖、硫酸根以及少量糖醛酸、半乳糖和木糖。国内外大量研究表明,褐藻糖胶具有多种生物活性,如抗肿瘤、抗病毒、抗凝血、抗氧化等[1]。骨重建是成骨细胞与破骨细胞共同参与的过程,骨形成与骨吸收的失衡是导

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本文编号：605019