代谢综合征患者肠道菌群特征及其与脾虚痰湿证的相关性研究

发布时间：2017-08-14 07:42

  本文关键词：代谢综合征患者肠道菌群特征及其与脾虚痰湿证的相关性研究

  更多相关文章： 肠道菌群 代谢综合征 辨证分型 实时荧光定量 PCR

【摘要】：研究背景代谢综合征(Metabolic Syndrome,MS)在全球及我国均广泛流行并呈现明显的上升趋势,目前,MS病因及发病机制尚不十分明确,治疗上亦无明显突破。近年,肠道“微生态失衡”学说与代谢性疾病发生、发展的相关性已成为国内外研究的热点,研究表明,肠道菌群失调在糖尿病、肥胖症的发生发展中起重要作用;而MS与糖尿病、肥胖有着共同土壤——胰岛素抵抗;传统医学认为脾胃与肠道菌群直接相关,而MS与“脾”的关系最为密切。这些均提示MS发生、发展可能与肠道菌群之间存在某种相关性。目前,国内外关于肠道菌群与代谢性疾病的研究大多集中在肥胖症、2型糖尿病,而与MS相关性的研究较少,且仅局限于动物实验水平,关于人体肠道菌群结构和数量的研究尚未见系统报道,MS作为多种重大慢性疾病的“高危”因素及“前期”状态,对其进行深入研究意义重大。研究目的1)本研究拟采用实时荧光定量PCR技术(Q-PCR),通过对中老年MS患者及健康对照者肠道内的4大菌门的9类主要菌群进行定量分析,进而比较MS患者与健康人在肠道菌群数量上的差异,以阐述肠道菌群与MS的相关性,为MS的发病机制寻找新线索,为其防治寻求新靶点。2)同时探讨MS脾虚痰湿证肠道菌群特征,为MS的中医辨证分型提供理论依据,探讨脾虚证的实质,并指导今后治疗。研究方法根据CDS(2013)MS西医学诊断标准,选取MS患者80例(脾虚痰湿证患者40例,气阴两虚证40例),并选取30例健康人作对照,留取粪便标本,提取粪便基因组DNA,应用16sr RNAV3序列设计各菌属特异性引物,以质粒作为标准品制作标准曲线,通过Q-PCR反应,对各目标菌属进行绝对定量分析。研究结果1)MS与健康组各目标菌属数量的比较:MS患者在肠道总菌属、双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌属数量低于健康对照组(P0.05),球形梭菌、柔嫩梭菌、大肠杆菌数量高于对照组(P0.05)。2)MS脾虚痰湿证组、气阴两虚证组及健康对照组3组间各目标菌属数量比较:3组在总菌属、球形梭菌、双歧杆菌、乳酸杆菌、柔嫩梭菌、肠球菌属、大肠杆菌差异存在统计学意义(P0.05),进一步对有统计学差异的菌属进行两两比较:(1)MS脾虚痰湿证组与健康对照组相比在总菌属、双歧杆菌、乳酸杆菌含量均降低,球形梭菌、柔嫩梭菌、肠球菌属、大肠杆菌显著增高,差异具有统计学意义(P0.05)。(2)MS脾虚痰湿证与气阴两虚证相比双歧杆菌含量显著降低,大肠杆菌含量显著增高(P0.05)。(3)MS气阴两虚证组与健康组相比肠道总菌群数量减少,肠球菌属数量增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论1)MS患者存在菌群失调,肠道菌群的失调可能与MS的发生发展相关。2)MS不同中医证型间肠道菌群存在差异。3)肠道菌群失调在脾虚痰湿证MS中起重要作用,肠道菌属的变化可以作为MS脾虚证的客观指标之一。
【关键词】：肠道菌群 代谢综合征 辨证分型 实时荧光定量 PCR
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R589
【目录】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 资料及方法14-26
• 1 实验材料14-17
• 1.1 研究对象14-15
• 1.2 研究菌群15-16
• 1.3 主要试剂16
• 1.4 主要仪器16-17
• 1.5 人体测量及标本采集17
• 2 实验步骤17-26
• 2.1 粪便样品中总DNA提取17-19
• 2.2 粪便细菌总DNA纯度及浓度测定19
• 2.3 标准品构建19-24
• 2.4 标准曲线制作24-25
• 2.5 各菌群的定量分析25-26
• 2.6 数据统计与分析26
• 结果26-35
• 3.1 研究对象的基本信息及代谢指标统计结果26-27
• 3.2 DNA 的纯度、完整性检测结果27
• 3.3 实时荧光定量PCR结果27-33
• 3.4 MS与健康对照组各菌属数量比较33-34
• 3.5 MS脾虚痰湿证组与气阴两虚组及健康组各菌属数量的比较34-35
• 讨论35-39
• 结论39-40
• 参考文献40-43
• 综述 代谢综合征研究概况43-53
• 参考文献49-53
• 附件53-54
• 致谢54-55

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本文编号：671546