人外周血单个核细胞的尿酸盐转运蛋白基因表达谱及其在原发性痛风患者表达量变化的意义

发布时间：2017-08-21 16:18

  本文关键词：人外周血单个核细胞的尿酸盐转运蛋白基因表达谱及其在原发性痛风患者表达量变化的意义

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【摘要】：目的:从20种尿酸盐转运蛋白基因(ABCG2、LGALS9、ABCC4、PDZK1、GCKR、LRRC16A、SLC2A9、SLC5A8、SLC5A12、SLC13A2、SLC13A3、SLC17A1、SLC17A3、SLC16A9、SLC22A6、SLC22A7、SLC22A8、SLC22A11、SLC22A12、SLC22A13)中筛选出在外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中可明确表达的尿酸盐转运蛋白基因,检测原发性痛风性关节炎(gouty arthritis,GA)患者PBMCs中可表达的尿酸盐转运蛋白基因mRNA表达量变化,分析其与GA患者临床实验指标的关系,初步探讨PBMCs可表达的尿酸盐转运蛋白在GA患者发病中可能的作用。方法:1.采集40例GA患者[包括20例痛风性关节炎急性期(acute gouty arthritis,AGA)、20例痛风性关节炎间歇期(interval gouty arthritis,IGA)]和20例健康体检者(health control,HC)的外周血标本以及人体正常肾脏、小肠粘膜、肝脏组织的标本,分离提取所有标本的总RNA,并逆转录为cDNA。2.逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)筛选出PBMCs中可明确表达的尿酸盐转运蛋白基因。3.采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测PBMCs中可表达的尿酸盐转运蛋白基因mRNA表达水平,并分析各基因mRNA表达量与血常规、肝肾功能、血脂的相关性以及各基因mRNA表达量之间的相关性。结果:1.7种尿酸盐转运蛋白基因(abcg2、lgals9、abcc4、pdzk1、lrrc16a、slc2a9、slc17a3)可在ga患者及健康人pbmcs中表达。2.ga患者abcg2、lgals9基因mrna表达量高于健康人(p0.05);ga患者abcc4、slc2a9、slc17a3基因mrna表达量低于健康人(p0.05);ga患者pdzk1、lrrc16a基因mrna表达量与健康人未见统计学差异(p0.05)。组间比较,aga、iga患者中abcg2、lgals9基因mrna表达量均显著高于健康人(p0.05),aga、iga患者中abcg2、lgals9基因mrna表达量未见统计学差异(p0.05);aga、iga患者中abcc4基因mrna表达量显著低于健康人(p0.05),aga、iga患者中abcc4基因mrna表达量未见统计学差异(p0.05);ga患者与健康人的pdzk1、lrrc16a基因mrna表达量均未见统计学差异(p0.05),但aga患者lrrc16a基因mrna表达量显著低于iga患者(p0.05);aga、iga患者中slc2a9基因mrna表达量均显著低于健康人(p0.05),aga患者slc2a9基因mrna表达量显著高于iga患者(p0.05);aga、iga患者中slc17a3基因mrna表达量均显著低于健康人(p0.05),aga患者slc17a3基因mrna表达量显著低于iga患者(p0.05)。3.spearman相关性分析发现,ga患者abcg2基因表达量与血液尿酸浓度呈正相关(r=0.24,p0.05),abcc4基因表达量与血液甘油三酯浓度呈正相关(r=0.308,p0.05),slc17a3基因表达量与血液淋巴细胞数呈负相关(r=-0.354,p0.05),而上述指标在健康人均未见明显相关性。4.ga患者中abcc4基因与lrrc16a、slc17a3基因的mrna表达量均呈正相关(r=0.24,p0.05),健康人中abcc4基因与lrrc16a基因的mrna表达也呈正相关(p0.05),ga患者中LRRC16A基因与PDZK1、SLC17A3基因的mRNA表达量均呈正相关,健康人中LRRC16A与PDZK1、SLC17A3的mRNA表达量也呈正相关(P0.05)。结论:尿酸盐转运蛋白基因ABCG2、LGALS9、ABCC4、PDZK1、LRRC16A、SLC2A9、SLC17A3均可在人PBMCs中表达,并且在GA患者的表达量呈现不同程度变化,提示通过研究这7种基因在健康人及GA患者PBMCs中的表达差异的生理病理意义,可能从新的角度阐释原发性痛风性关节炎的发病机制。
【关键词】：原发性痛风性关节炎 单个核细胞 尿酸盐转运蛋白 分布 表达
【学位授予单位】：川北医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R589.7
【目录】：

• 致谢4-5
• 摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-16
• 第一部分 人外周血单个核细胞的尿酸盐转运蛋白基因表达谱16-25
• 材料与方法16-20
• 结果20-23
• 讨论23-25
• 第二部分 人外周血单个核细胞的尿酸盐转运蛋白基因在原发性痛风患者表达量变化的意义25-44
• 材料与方法25-27
• 结果27-39
• 讨论39-44
• 结论44-45
• 附图45-52
• 参考文献52-56
• 综述：尿酸盐转运蛋白的研究进展56-68
• 参考文献64-68
• 附录68-70
• 个人简历70-71
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文71

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本文编号：713889