不同成熟状态下树突状细胞与TRAF6间的关系

发布时间：2017-08-23 05:27

  本文关键词：不同成熟状态下树突状细胞与TRAF6间的关系

  更多相关文章： 类风湿关节炎 树突状细胞 肿瘤坏死因子受体相关因子6

【摘要】：目的:类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种常见的慢性、损伤性自身免疫性疾病,其发病机制被认为是由于体内免疫平衡打破,体液免疫亢进。树突状细胞(Dendritic Cell,DC)是体内抗原提呈能力最强也是唯一能激活初始T细胞诱发正向免疫应答的细胞,成熟DC被认为在RA的发病机制中发挥关键作用。肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)是DC发育、生长、成熟的关键分子,研究TRAF6与DC成熟程度之间的关系,为将来治疗RA提供新的药物靶点及方向。方法:细胞因子rmGM-CSF、rmIL-4诱导C57小鼠骨髓细胞定向分化为未成熟DC,然后用细胞因子rmGM-CSF、rmIL-4、TNF-?、LPS、FK506分成四组分别诱导DC分化为不同成熟状态,用流式细胞仪检测细胞表面CD80、CD86、MHC-II分子证明DC处于不同成熟程度;ELISA检测DC不同成熟状态下IL-12的表达情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测各组DC中TRAF6的mRNA以及蛋白的表达情况。结果:细胞因子rm GM-CSF、rmIL-4成功诱导骨髓细胞定向分化为DC,四组中表面分子CD80、CD86、MHC-II的表达量都有显著的统计学差异(P?0.05),其中以CD86表现得最为明显;四组中IL-12的分泌量随着DC的分化程度越高,分泌量也逐渐增加,组间存在明显的统计学而差异(P?0.05),D组中IL-12分泌量达到10620.73?276.73pg/ml;D组中mRNA-TRAF6的表达水平显著高于其它三组(P0.01);B、C两组之间mRNA-TRAF6的表达无统计学差异,但都高于对照组(A组)(P0.01);D组中TRAF6的蛋白表达量最高,与其它三组有显著的统计学差异(P0.01),B、C组与A组比较也存在明显的统计学差异(P0.01),C组的表达比B组高(P0.01)。结论:不同分化成熟状态下DC表面共刺激分子的表达量逐渐增加;IL-12、mRNA-TRAF6、Protein-TRAF6的表达量与DC的成熟程度呈正相关。TRAF6在DC的发育、分化、成熟中发挥重要的作用。
【关键词】：类风湿关节炎 树突状细胞 肿瘤坏死因子受体相关因子6
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R593.22
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 英汉缩略词对照表9-10
• 前言10-11
• 第一部分 利用细胞因子体外诱导C57小鼠骨髓中树突状细胞的分化并刺激成熟11-19
• 1 材料与方法11-15
• 1.1 实验材料与仪器11-12
• 1.2 实验方法12-15
• 1.3 统计分析15
• 2 结果15-18
• 2.1 树突状细胞的培养15-16
• 2.2 DC的成熟表现变化16-17
• 2.3 不同成熟状态下IL-12 的表达17-18
• 3 讨论18
• 4 结论18-19
• 第二部分 TRAF6在小鼠不同成熟度树突状细胞中的表达19-31
• 1 材料与方法19-27
• 1.1 实验材料与仪器19-20
• 1.2 实验方法20-27
• 1.3 结果的检测和分析27
• 2 结果27-28
• 2.1 mRNA-TRAF6电泳情况27-28
• 2.2 DC中TRAF6蛋白表达情况28
• 3 讨论28-30
• 4 结论30-31
• 参考文献31-37
• 综述37-44
• 参考文献41-44
• 攻读学位期间发表的学术论文目录44-45
• 致谢45-46

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈锋;何生松;邱荣元;庞然;许娟娟;董继华;;Influence of Silencing TRAF6 with shRNA on LPS/TLR4 Signaling in vitro[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2010年03期

2 辛利军;TRAF:一种重要的接头分子[J];国外医学(免疫学分册);2002年03期

3 李珊;杨桂文;安利国;;TRAF1以及它的生物学功能[J];科技信息(学术研究);2008年25期

4 ;TRAF-mediated regulation of immune and inflammatory responses[J];Science China(Life Sciences);2010年02期

5 王新禹;黄懿;李礼;魏群;;肿瘤坏死因子受体作用因子3(TRAF3)结构及生物学功能[J];中国生物化学与分子生物学报;2012年06期

6 孙利;王晓辉;关薇;唐刘君;王建;杨晓明;汪思应;;TRAF6-GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化[J];生物技术通讯;2011年05期

7 张波;周芳亮;卢芳国;严杰;王成;周建林;张健;;过表达TRAF2降解外源性绿色荧光蛋白[J];中国生物化学与分子生物学报;2012年08期

8 王沂;张秀军;刘青;余源;慈雅丽;王洋;;人TRAF3IP3基因的克隆及真核表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2013年05期

9 曾凡龙;卫荣华;朱敬;沈君豪;;以TRAF2为样本检验证实的一种通过模式关键位点研究未知蛋白质功能的方法[J];湖北医药学院学报;2013年05期

10 张文;张p，

本文编号：723259