高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠血浆microRNA表达谱及其与TLR4的关系
本文关键词：高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠血浆microRNA表达谱及其与TLR4的关系
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【摘要】：目的:筛选高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠,以及应用Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)抑制剂TAK-242干预的胰岛素抵抗小鼠血浆差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA),探讨胰岛素抵抗、TLR4和差异表达miRNAs的关系。方法:血浆标本来自前期实验的3组小鼠,即以普通基础饲料喂养(Low fat diet,LFD)的正常对照组、给予TAK-242的高脂饮食组(Treated high fat diet,HFD-T)和单纯高脂饮食组HFD-C,应用小鼠miRNA芯片检测血浆miRNA表达谱,筛选差异表达的miRNAs;采用实时荧光定量PCR方法验证芯片结果。应用生物信息学方法,以TLR4及其信号传导通路为中心,预测差异表达miRNAs的靶基因,并对靶基因分别进行GO和KEGG富集分析,以判定差异miRNAs主要影响的生物学功能或者通路。结果:miRNA基因芯片筛查结果显示,单纯高脂饮食组与正常饮食组比对,筛选出差异显著的miRNAs共计185种,其中6种miRNAs表达上调,179种miRANs表达下调;给予TAK-242的高脂饮食组与正常饮食组比对,筛选出差异显著的miRANs共计171种,均表达下调;给予TAK-242的高脂饮食组与单纯高脂饮食组比对,筛选出差异表达的miRNAs共计13种,均为下调。生物信息学分析结果显示,以TLR4为中心挖掘与其互作的蛋白质,共发现有10种蛋白;在TAK-242给予的高脂饮食组与单纯高脂饮食组中差异表达倍数均在1 000以上的4种miRNAs(mmu-miR-3095-3p、mmu-miR-5113、mmu-miR-709和mmumiR-335-3p),可在TLR4的互作蛋白质或Toll样受体信号通路中找到其作用的靶基因,发现这些靶基因74%属于生物过程基因,其中转录调控因子占82%。实时荧光定量PCR检测mmu-miR-3095-3p、mmu-miR-5113、mmu-miR-709和mmu-miR-335-3p水平,变化趋势与芯片结果一致。结论:胰岛素抵抗发生时,血浆miRNAs表达谱存在改变,此变化与TLR4及其信号通路相关。该研究结果丰富了胰岛素抵抗发生的机制,为寻找胰岛素抵抗血浆miRNAs诊断标志物提供了实验依据。
【作者单位】： 河北北方学院附属第一医院检验科;河北北方学院临床检验诊断学重点实验室;
【关键词】： 高脂饮食 胰岛素抵抗 Toll样受体 微小RNA表达谱
【基金】：河北省自然科学基金资助项目(C2011405015) 河北北方学院创新人才培育项目(CXRC1316)
【分类号】：R589.2
【正文快照】： 2河北北方学院附属第一医院检验科,张家口075000。肥胖被认为是21世纪公共健康的最大威胁,肥胖患者忍受生活质量和期望值的降低,并提高了2型糖尿病、心血管疾病、肝的脂肪变性和癌症的发病风险[1,2]。肥胖相关的胰岛素抵抗是糖尿病等多种疾病起始进程的早期事件,与血脂障碍、
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