高脂血症大鼠种植体早期骨结合界面的微观分析及分子机制探究

发布时间：2017-08-30 03:40

  本文关键词：高脂血症大鼠种植体早期骨结合界面的微观分析及分子机制探究

  更多相关文章： 种植体 骨结合 扫描电镜 X射线能谱仪 DVL 大鼠

【摘要】：目的研究高脂血症大鼠种植体早期骨结合界面的微观形态和微观成分,并探究其与Dishevelled-2 (DVL2)相关的可能的分子机制。方法(1).Wistar大鼠60只,均为雄性,依照随机原则,分为实验组和对照组分别以高脂饲料和普通饲料喂养。(2).12周后,检测实验组大鼠血脂水平,去除实验组中不符合高脂血症标准的大鼠以及对照组中血脂异常的大鼠。在全麻下分别将一枚种植体植入,两组大鼠左右两侧股骨干骺端。在种植体植入后的1天、3天和5天分别处死一批大鼠,取出含有种植体的骨组织(图1),分别进行不同的检测。(3).种植体植入后1天和5天的标本固定包埋后制作硬组织切片,分别进行光学显微镜和和扫描电镜(scanning electronic microscopy, SEM)观测,分析种植体早期骨结合界面的微观形态的动态变化。光学显微镜观测种植体周围的成骨细胞、破骨细胞和骨小梁；SEM进一步在高倍镜下,观测种植体周围的成骨细胞、破骨细胞和骨质状况。(4).种植体植入后1天和5天的标本固定包埋后制作硬组织切片,在种植体中部1/3,沿种植体向组织方向,以10 um为间隔依次选“1-6”六个微区(图2),通过X射线能谱仪(energy dispersive X-ray spectrometer, EDS)分析种植体早期骨结合界面的微观成分的动态变化,进行钙、磷、氧和钛元素定量测定；计算Ca/P原子个数百分比。(5).1天、3天和5天的标本,一部分液氮冻存通过荧光定量PCR (relative fluorescence quantitative polymerase chain-reaction, RT-PCR)检测种植体周围1mm骨组织中DVL2基因的表达情况；另外一部分,迅速提取蛋白,通过Western Bolt检测种植体周围1mm骨组织中DVL2蛋白和磷酸化的DVL2蛋白的表达情况。结果(1).光学显微镜分析发现,种植体植入后的1-5 d,种植体周围的成骨细胞和破骨细胞逐渐增多。实验组骨质疏松,骨小梁稀疏、排列紊乱；对照组骨质致密。实验组种植体周围的成骨细胞少于对照组(P0.05),破骨细胞多于对照组(P0.05)。(2).SEM观测到的结果与光学显微镜相似,在种植体植入后的1-5 d,种植体周围的成骨细胞和破骨细胞逐渐增多。实验组骨质疏松,对照组骨质致密。实验组种植体周围的成骨细胞少于对照组,破骨细胞多于对照组。(3).实验组Ca/P原子个数百分比低于对照组(P0.05),O元素的原子百分比高于对照组(P0.05)；由种植体至骨组织Ti元素的原子百分比逐渐减少,实验组和对照组各取样微区内的Ti元素原子百分比无明显差异。实验组和对照组的“5、6”取样微区的Ca/P原子个数百分比,均随时间的增加而减少,并且“5”取样微区的Ca/P原子个数百分比略小于“6”取样微区的Ca/P原子个数百分比；“4”取样微区的Ca/P原子个数百分比,随种植体植入时间的增加而略增加。“1、2、3”取样微区均未检测到Ca、P元素。实验组和对照组的“5、6”取样微区的O元素原子百分比,随种植体植入时间的增加而略增加,并且“5”取样微区的O元素原子百分比大于“6”取样微区的O元素原子百分比；“4”取样微区的O元素原子百分比,随种植体植入时间的增加而略微减少。“1、2、3”取样微区均未检测到O元素。实验组和对照组的“6”取样微区未检测到Ti元素,“1、2、3、4、5”取样微区的Ti元素原子百分比逐渐减少,“4、5”取样微区的Ti元素原子百分比,表现出随种植体植入时间的增加而稍减少的趋势；“1、2、3”取样微区的Ti元素原子百分比,随种植体植入时间的增加而略增加。(4).实验组的DVL2基因的表达水平不及对照组(P0.05)。实验组DVL2的mRNA的表达水平在1-3天呈现下降趋势,在3-5天内呈现出上升趋势(p0.05)；对照组DVL2的mRNA的表达水平在1-3天以内略微上升,在3-5天内略微下降。(5).DVL2蛋白的表达水平与DVL2的mRNA的表达水平相似。实验组的DVL2蛋白的表达水平低于对照组(P0.05)。实验组DVL2蛋白的表达水平在1-3天呈现下降趋势,在3-5天内呈现出上升趋势(p0.05)；对照组DVL2蛋白的表达水平在1-3天以内呈现上升趋势,在3-5天内略微下降。(6).实验组的磷酸化的DVL2蛋白的表达水平低于对照组(P0.05)。实验组磷酸化的DVL2蛋白的表达水平在1-3天呈现下降趋势,在3-5天内呈现出上升趋势(p0.05)；对照组磷酸化的DVL2蛋白的表达水平在1-3天以内也呈现下降趋势,之后基本维持在恒定的水平。结论高脂血症通过抑制DVL2基因、DVL2蛋白和磷酸化的DVL2蛋白的表达,在一定程度上干扰种植体的早期骨结合。此研究为提高高脂血症患者种植的成功率提供了理论支持。
【关键词】：种植体 骨结合 扫描电镜 X射线能谱仪 DVL 大鼠
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R783.6;R589.2
【目录】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-11
• 英文缩略词11-12
• 前言12-15
• 实验材料15-18
• 实验方法18-28
• 结果28-35
• 讨论35-39
• 结论39-40
• 参考文献40-43
• 致谢43-44
• 攻读硕士学位期间发表文章44-45
• 学位论文评阅及答辩情况表45

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 栗兴超;董福生;;种植体表面优化处理对其骨结合促进的研究进展[J];现代口腔医学杂志;2007年06期

2 曾庆香;王涛;;种植体表面处理技术对骨结合影响研究进展[J];中国实用口腔科杂志;2013年01期

3 高麒;牛强;李永锋;沈舒宁;张永强;申明明;孔亮;李永明;;掺锶仿生涂层用于促进种植体早期骨结合的初步研究[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2014年04期

4 李德超;朱杨;关键;丁明超;韩磊;张丽娜;林娜;张爱琴;李慕勤;;3种不同种植体表面特征及骨结合力的比较分析[J];口腔医学研究;2011年09期

5 郭莉，，蒋中华，张志光;聚四氟乙烯膜在即时植入的种植体与骨结合过程中的作用[J];临床口腔医学杂志;1996年03期

6 贾爽;范震;苏剑生;;种植体表面粗糙度对骨结合影响的研究现状[J];中国口腔种植学杂志;2007年02期

7 周群;谭兆军;方铁钧;郭亚峰;;C/C-SiC复合材料-骨结合界面的组织学研究[J];口腔医学;2012年02期

8 徐娟;胡敏;;钛合金表面改性与骨结合能力的研究进展[J];中华老年口腔医学杂志;2013年02期

9 容明灯;张雪洋;李少冰;卢海滨;黄雁红;巫燕辉;金爱琼;周磊;;活性表面种植体在同一植入位点不同骨结构的早期骨结合差异[J];广东医学;2014年11期

10 马明福;钛合金与骨结合力学负载衰退分离的评价[J];国外医学.生物医学工程分册;1995年04期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 丛锘锘;谭包生;;关于种植体受持续水平力作用发生移动的实验研究[A];第六届全国口腔种植学术会议论文汇编[C];2009年

中国博士学位论文全文数据库 前4条

1 石磊;种植体表面改性—光诱导超亲水性表面骨结合机制研究[D];第四军医大学;2013年

2 石磊;种植体表面改性—光诱导超亲水性表面骨结合机制研究[D];第四军医大学;2013年

3 颜世果;SATB2基因转染促进钛种植体的骨结合[D];山东大学;2010年

4 戴婧;早期负重状态下三种种植体形态对骨结合的影响[D];武汉大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王会;高脂血症大鼠种植体早期骨结合界面的微观分析及分子机制探究[D];山东大学;2016年

2 张欣蔚;3D打印多孔钛种植体结合CS/HA涂层促骨结合作用的研究[D];山东大学;2016年

3 牛强;两种不同微/纳米化处理方法对钛种植体表面材料学性能及早期骨结合影响的实验研究[D];河北医科大学;2014年

4 孙荟颜;氟离子注入钛表面改性种植体早期骨结合的实验研究[D];大连医科大学;2012年

5 王丽华;HF+阳极氧化处理的微/纳米表面种植体早期骨结合的实验研究[D];河北医科大学;2013年

6 焦铁军;紫外光催化种植体对2型糖尿病大鼠种植体周围骨结合的影响[D];第四军医大学;2013年

7 于惠;不同植入扭矩值对BLBⅢ代种植体—骨结合的影响[D];大连医科大学;2011年

8 袁京;牙种植体扭转共振频率与骨结合相关性的动物实验研究[D];第四军医大学;2014年

9 阎旭;富含血小板血浆（PRP）在口腔种植体骨结合中的应用[D];安徽医科大学;2007年

10 张双越;rhBMP-2诱导成骨和促进松质骨移植同期牙种植形成骨结合的实验研究[D];南京医科大学;2004年

本文编号：757085