氟对大鼠骨组织RBPJ及相关基因表达的影响

发布时间：2017-09-06 22:44

  本文关键词：氟对大鼠骨组织RBPJ及相关基因表达的影响

  更多相关文章： 氟 骨组织 成骨细胞 Notch经典通路 RBPJ

【摘要】：目的:通过研究氟中毒大鼠骨组织中RBPJ、Notch3、Jag1和Hes5基因表达变化,探讨Notch通路与氟骨症关系,为氟骨症发生机制提供理论依据。方法:成年SD大鼠24只,随机分为3组:对照组(饮水含氟1mg/L),低氟组(饮水含氟50mg/L),高氟组(饮水含氟100 mg/L),每组8只,组内雌雄各半。饲养6个月后,收集动物尿样,观察氟斑牙发生情况,采用氟离子选择电极法测定尿氟和骨氟,常规石蜡切片HE染色观察骨组织学变化并采用图像分析软件测定骨组织形态学指标,免疫组化法(Immunohistochemistry,IHC)观察成骨细胞中RBPJ、Notch3、Jag1和Hes5蛋白表达情况,免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR法(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分别检测骨组织RBPJ、Notch3、Jag1和Hes5蛋白与mRNA表达量。结果:1.氟骨症大鼠模型复制成功,表现为染氟组出现不同程度氟斑牙,同时与对照组(2.00±0.34 mg/L、1753.67±184.68μg/g)比较,低氟组(11.80±1.08 mg/L、5974.76±2036.13μg/g)、高氟组(18.08±1.13 mg/L、7996.51±2669.93μg/g)大鼠尿氟和骨氟明显升高(P0.05);且染氟组大鼠骨皮质厚度、骨小梁宽度、骨小梁密度、成骨细胞指数明显升高(P0.05),表现骨质硬化病理改变特征。2.Western blot法检测显示,高氟组大鼠骨组织Notch3蛋白(0.201±0.093)显著低于对照组(0.434±0.218,P0.05);Jag1蛋白在高氟组(0.112±0.024)大鼠的表达水平不仅明显低于对照组(0.516±0.144),也明显低于低氟组(0.475±0.189,P0.05);而低氟组(4.985±0.913),高氟组(4.279±1.507)大鼠RBPJ蛋白表达升高,与对照组(2.892±1.001)比较差异有统计学意义(P0.05);低氟组(0.147±0.039),高氟组(0.128±0.039)Hes5蛋白表达则又明显低于对照组(0.282±0.099,P0.05)。3.采用免疫组化法观察成骨细胞上述因子表达情况,并对阳性成骨细胞Notch3、Jag1、RBPJ、Hes5平均光密度的检测发现,低氟组,高氟组大鼠Notch3平均光密度(0.022±0.007,0.019±0.005)、Jag1平均光密度(0.024±0.008,0.029±0.009)水平明显低于对照组(0.045±0.016、0.044±0.023,P0.05),而低、高氟组RBPJ平均光密度(分别为0.032±0.017,0.033±0.017)明显高于对照组(0.021±0.013,P0.05);但染氟组与对照组之间Hes5平均光密度差异无统计学意义(P0.05)。4.RT-qPCR法检测骨组织内上述因子mRNA水平,结果显示高氟组大鼠骨组织Notch3 mRNA(0.0044±0.0040)、Jag1 mRNA(0.0057±0.0054)相对表达量明显低于对照组(0.0116±0.0072、0.0087±0.0059,P0.05),同时高氟组大鼠骨组织Jag1 mRNA相对表达量也明显低于低氟组(0.0066±0.0060,P0.05);而低氟组(0.0058±0.0037),高氟组(0.0055±0.0044)大鼠RBPJ mRNA相对表达量明显低于对照组(0.0122±0.0059,P0.05);但染氟组与对照组之间Hes5 mRNA相对表达量差异无统计学意义(P0.05)。5.相关性分析显示大鼠成骨细胞中RBPJ蛋白水平与成骨细胞指数呈正相关关系(r=0.465,P0.05),Notch3蛋白水平与骨皮质厚度、骨小梁宽度、骨小梁密度、成骨细胞指数均呈负相关关系(r=-0.612、-0.557、-0.640、-0.716,P0.05),Jag1蛋白水平与骨小梁宽度、骨小梁密度均呈负相关关系(r=-0.446、-0.609,P0.05),而Hes5蛋白水平与骨小梁密度呈负相关关系(r=-0.452,P0.05)。结论:过量氟可能抑制骨组织Notch经典信号通路,抑制下游靶基因表达,从而减弱对成骨细胞的分化抑制作用,使成骨作用增强,该过程可能参与氟骨症发病机制。
【关键词】：氟 骨组织 成骨细胞 Notch经典通路 RBPJ
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R599.1
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-11
• 略缩词表11-12
• 引言12-14
• 材料与方法14-28
• 结果28-35
• 讨论35-41
• 结论41-42
• 参考文献42-46
• 综述46-58
• 参考文献54-58
• 作者简历58-59
• 致谢59-60
• 学位论文数据集60

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 孙磊;全逸先;;《骨组织库管理》标准出台 我国骨组织库管理迈出第一步[J];中国卫生标准管理;2010年05期

2 李章;;骨组织的无机和有机成分在~(239)钚代谢中的作用[J];国外医学参考资料(放射医学分册);1978年03期

3 王金华;用非损伤方法研究长期低动态条件下骨组织的状态[J];航天医学与医学工程;1988年02期

4 危小燕;;碰撞骨组织微观力学模型[J];国外医学.生物医学工程分册;1989年02期

5 杨耀林,沈阳;介绍一种骨组织快速制片法[J];临床与实验病理学杂志;1992年03期

6 孙庆妹,金岩,常青,杨连甲;微波技术在牙齿和骨组织标本制备中的应用[J];实用口腔医学杂志;1993年04期

7 谈勤明,朱静;骨组织快速制片改良法[J];江西医学院学报;2004年06期

8 姜秀英，赖晃文，杨传红，江悦华，刘连璞;含骨组织的电镜样品制备技术探讨[J];第一军医大学学报;1995年02期

9 陈元栋,陈同钰,虞华明,万晓莉;骨组织脱钙的超声处理[J];江西医药;2001年04期

10 毛萌;钙与人体 第4讲钙元素怎样进出骨组织[J];中国临床医生;2001年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 叶铭;张绍祥;王成焘;;力学虚拟人骨组织曲面模型重建及有限元建模技术[A];第八届全国生物力学学术会议论文集[C];2006年

2 王军;吕荣;;图象融合重叠技术在骨组织显微图象采集中的应用[A];第十一届中国体视学与图像分析学术会议论文集[C];2006年

3 彭若龙;钱梦，

本文编号：805891