可示踪转基因斑马鱼胰岛β细胞破坏和再生模型分析

发布时间：2017-09-13 10:29

  本文关键词：可示踪转基因斑马鱼胰岛β细胞破坏和再生模型分析

  更多相关文章： 胰岛β细胞 斑马鱼 转基因

【摘要】：本研究目的是在斑马鱼体内建立符合高通量药物筛选条件的胰岛β细胞破坏模型,用于筛选出针对糖尿病胰岛β细胞再生的药物。利用胰岛素-硝基还原酶-绿色荧光蛋白(insulin-nfs B-green fluorescent protein;INS-nfs B-GFP)转基因系F1/F2代胚胎分为A组(正常对照组),根据胚胎时相大小分为3个大组,B组受精后24 h(24 hours postfertilization,24 hpf)、C组受精后36 h(36 hours postfertilization,36 hpf)、D组受精后48 h(48 hours postfertilization,48 hpf),分别在不同毫摩尔(mmol/L)浓度(5 mmol/L,7.5 mmol/L,10 mmol/L,15 mmol/L)的甲硝唑中孵育24~48 h,通过体式倒置荧光显微镜和共焦显微镜观察斑马鱼胰岛β细胞破坏及荧光表达的情况,同时用原位杂交方法进一步在分子水平证实。结果显示,斑马鱼胚胎36 hpf加10 mmol/L浓度的甲硝唑并孵育36 h,荧光明显消失,并且畸形率和死亡率较低,是创造胰岛条件β细胞破坏的转基因斑马鱼模型的理想条件,在此基础上去甲硝唑10~86 h后继续观察胰岛β细胞再生,结果发现在去除甲硝唑24 h(即斑马鱼胚胎96 hpf)时胰岛β细胞开始再生。本模型的建立对于糖尿病的临床价值和应用前景有着非常重要的意义,利用这一条件使高通量筛选具有胰岛功能恢复作用药物成为可能,将为糖尿病的治疗开辟新的道路。
【作者单位】： 贵阳中医学院;
【关键词】： 胰岛β细胞 斑马鱼 转基因
【基金】：国家自然科由学基金(编号:30860376)资助
【分类号】：R587.1
【正文快照】： Analysis of Damage and Regeneration Model of Traceable Transgenic Zebr-afish PancreaticβCellLi Shanshan Kong Deming*Qin Shuai Deng MinGuiyang University of Chinese Medicine,Guiyang,550003*Corresponding author,kongdeminggy@sina.com图1甲硝唑处理后斑马鱼胰

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 ;“瑞金国际内分泌论坛-胰岛β细胞研究”会讯及征文通知(第二轮)[J];中华内分泌代谢杂志;2006年04期

2 合湫;苏恒;;胰岛β细胞损伤的分子机制探讨[J];实用糖尿病杂志;2011年06期

3 杨淑秋;;胰岛β细胞瘤[J];广西医学;1987年01期

4 韩凤兰;胰岛β细胞瘤(附13例临床分析)[J];广东医学;1988年04期

5 童名瑞,田新良;睁眼昏迷1月的胰岛β细胞癌1例报告[J];新医学;1988年09期

6 邱子谦;杨传之;刘广和;;误诊为癔病的胰岛β细胞瘤2例[J];临床误诊误治;1988年03期

7 张瑞军;胰岛β细胞瘤1例[J];山东医药;1997年08期

8 蒋旭超;谢志芳;章卫平;;胰岛β细胞发育与再生的研究进展[J];中国病理生理杂志;2013年10期

9 逄曙光,孙金凤;胰岛β细胞瘤5例误诊原因分析[J];山东医药;2000年11期

10 郝淑梅,蒋丹峰;长期误诊的胰岛β细胞瘤1例报告[J];中国综合临床;2000年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 费玉娥;金雪光;;屡次误诊为竭症的胰岛β细胞瘤一例[A];2006年浙江省精神病学学术会议论文汇编[C];2006年

2 刘静;田利民;郭茜;王锐;樊瀛哲;余烨;;大鼠内吗啡肽对胰岛β细胞损伤的保护作用[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年

3 林建立;侯建明;高政南;陈刚;黄慧彬;温俊平;梁继兴;;应用细胞片层技术研究胰岛β细胞的细胞保护[A];中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2012年

4 龙健;苏艳新;邓华聪;;脂联素抗胰岛β细胞脂性凋亡及其机制[A];中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2012年

5 李珊珊;孔德明;李雪梅;;使用遗传学可示踪转基因斑马鱼技术进行甲硝唑诱导胰岛β细胞破坏和再生的初步研究[A];2010年贵州省中西医结合学会内分泌学术会议论文集[C];2010年

6 鹿国晖;曾凡星;方子龙;;注射重组人生长激素对运动大鼠胰岛β细胞形态和功能的影响[A];2002年第9届全国运动医学学术会议论文摘要汇编[C];2002年

7 张宏利;骆天红;冯龄;赵臾;李文毅;徐佳;李杲;罗敏;;多发性内分泌肿瘤1型基因对胰岛β细胞发育和分化作用的研究[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年

8 周琳;薛耀明;沈洁;高方;;胰淀素对体外培养胰岛β细胞胰岛素分泌影响的分子机制[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年

9 李淼;何清华;国汉邦;黄秀清;满永;路永刚;周迎生;王抒;黎健;;低密度脂蛋白与极低密度脂蛋白引起胰岛β细胞氧化损伤作用的机制探讨[A];第四届全国血脂分析与临床学术研讨会暨第九届全国脂蛋白学术会议论文汇编[C];2008年

10 赵玉峰;裴建明;朱运龙;陈晨;;亚油酸通过双信号途径激活大鼠胰岛β细胞上ATP敏感性钾通道[A];2008年神经内分泌暨神经免疫内分泌学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 记者 白毅;调控胰岛β细胞代偿性增殖新机制被发现[N];中国医药报;2014年

2 吴一福;僵知饮对胰岛β细胞损伤有修复作用[N];中国医药报;2005年

3 冯卫东;外分泌细胞直接转化胰岛β细胞获得成功[N];科技日报;2008年

4 解放军总医院内分泌科主任医师 潘长玉;降糖同时勿忽略胰岛β细胞[N];健康报;2010年

5 中山大学附属第二医院内分泌科主任医师 程桦 教授;儿童糖尿病患病率明显增加[N];健康时报;2008年

6 ;一线降糖药物存在严重先天不足[N];卫生与生活报;2007年

7 本报记者　赵绍华;关于“干细胞移植治愈糖尿病”[N];健康时报;2003年

8 郑倩怡;肠促胰素研究带来降糖新理念[N];中国医药报;2010年

9 陈金伟;药名差以毫厘 药效失之千里[N];保健时报;2007年

10 吴纪;营造生命的春天[N];大众科技报;2000年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 王洪东;长期雄激素暴露对大鼠胰岛β细胞GSIS功能的影响及机制研究[D];南京医科大学;2015年

2 米宝明;两种胰岛β细胞PET显像探针的制备与实验研究[D];苏州大学;2016年

3 陈志红;携有鼠胰岛素样生长因子1重组腺病毒对胰岛β细胞的保护性研究[D];山东大学;2009年

4 凌家俭;一氧化氮在胰岛β细胞内对环加氧酶2表达、前列腺素E2合成的影响及前列腺素E2引起胰岛β细胞功能紊乱作用机制的研究[D];南京医科大学;2005年

5 李敏;高迁移率族蛋白1在1型糖尿病鼠胰岛β细胞损伤中的作用机制[D];复旦大学;2012年

6 龙健;脂联素抑制胰岛β细胞脂性凋亡及其机制研究[D];重庆医科大学;2012年

7 陈文斌;表观遗传调控对胰岛β细胞发育和功能以及糖尿病发病的影响和机制[D];山东大学;2013年

8 卢忠燕;FOXO1转录因子在胰岛β细胞中的作用及机制研究[D];第三军医大学;2009年

9 孙中华;实验性糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡、再生与氧化自由基、TGF-β相关因子的研究[D];吉林大学;2004年

10 付青姐;IL-1β诱导后NIT-1胰岛β细胞差异表达基因的分离、监定和序列分析[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 甘秋兰;西格列汀拮抗糖尿病胰岛β细胞炎症反应及与Keap1-Nrf2-ARE通路的关系[D];福建医科大学;2015年

2 唐冉琪;基于靶点PTP1B的胰岛β细胞保护的实验研究及抗代谢综合征药物筛选[D];北京协和医学院;2015年

3 苗天翼;苹果多酚基于GLP-1受体途径降糖作用的机制研究[D];河北医科大学;2015年

4 张建伟;亮氨酸对2型糖尿病的影响[D];苏州大学;2015年

5 刘潺潺;抵当芪桂汤对糖尿病大鼠FFA、ADPN及胰岛β细胞结构影响的实验研究[D];陕西中医药大学;2015年

6 谢心苗;Irisin与betatrophin的关系以及对β细胞增殖作用的研究[D];南方医科大学;2015年

7 邢云芝;沙格列汀通过抑制SDF-1α降解促进2型糖尿病大鼠胰岛β细胞增殖作用的研究[D];天津医科大学;2015年

8 高丽丽;PKR蛋白结合功能促进胰岛β细胞增殖机制研究[D];南京医科大学;2015年

9 宛晓梦;PKR激活通过SUMO化修饰上调P53抑制胰岛β细胞增殖[D];南京医科大学;2015年

10 焦成;慢性间歇性低氧下mTOR信号通路变化对大鼠胰岛β细胞数量的影响[D];南京医科大学;2015年

，

本文编号：843189