急性百草枯中毒SD大鼠模型不同浓度漂白土洗胃方案效果的实验研究

发布时间：2017-09-20 20:06

  本文关键词：急性百草枯中毒SD大鼠模型不同浓度漂白土洗胃方案效果的实验研究

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【摘要】：研究目的探究不同的洗胃时间及不同浓度的漂白土混悬洗胃液对急性百草枯中毒SD大鼠血浆百草枯浓度的影响,为临床急性百草枯中毒患者的最优洗胃方案的制定提供科学的理论基础。研究方法按照随机数字表法将48只大鼠随机分为八组:A1模型组、A2模型组、B1清水组、B2清水组、C115%漂白土混浊液组、C215%漂白土混浊液组、D130%漂白土混浊液组、D230%漂白土混浊液组,每组6只,A1、B1、C1、D1四组为灌胃染毒30min后洗胃,A2、B2、C2、D2四组为灌胃染毒1h后洗胃。取漂白土30g加入量杯(Fuller's earth,CAS NO:8031-18-3,纯度:-100mesh particle size,由上海市将来试剂公司提供),加入无菌蒸馏水100ml,配制成30%漂白土混悬液;同样方法配制15%漂白土混悬液备用。灌胃前对每只大鼠称重,按150mg/kg的标准使用同一剂型的百草枯溶液(上海兴农药业有限公司,20%水溶液20ml/瓶)对大鼠进行灌胃,灌胃后30min抽取大鼠眼眶内静脉血2ml置于抗凝管中,离心半径20cm,4000r/min,离心10min,取血清-80℃保存,使用HPLC法检测血浆百草枯浓度,对各组大鼠百草枯浓度进行方差分析,差异无统计学意义说明急性百草枯中毒大鼠模型构建成功。采用均数+标准差对各组大鼠血浆百草枯浓度进行描述性统计;采取同样的方法在大鼠染毒后1.5h、2.5h及4.5h检测其血浆百草枯浓度,将所得数据采用双人核对录入法录入SPSS,对不同取血点各组大鼠血浆百草枯浓度进行析因分析;同时对各组大鼠四个时点的血浆百草枯浓度进行重复测量方差分析,检验水准α为0.05。研究结果1、不同时间点血浆百草枯浓度:(1)大鼠染毒30min后,大鼠血浆百草枯浓度A1组、B1组、C1组、D1组分别为52.97±3.53ug/ml、56.00±4.53ug/ml、54.60±3.94 ug/ml、53.35±9.70 ug/ml;A2组、B2组、C2组、D2组分别为54.60±5.28 ug/ml、56.27±4.88 ug/ml、55.82±4.52 ug/ml、54.78±4.50 ug/ml。(2)大鼠染毒1.5h后,大鼠血浆百草枯浓度A1组、B1组、C1组、D1组分别为251.22±6.92 ug/ml、210.15±8.49 ug/ml、161.48±5.83 ug/ml、132.60±7.37 ug/ml;A2组、B2组、C2组、D2组分别为283.97±7.89 ug/ml、240.67±6.05 ug/ml、195.68±6.27 ug/ml、167.22±3.62 ug/ml。(3)大鼠染毒2.5h后,大鼠血浆百草枯浓度A1组、B1组、C1组、D1组分别为266.15±7.78 ug/ml、216.68±8.39 ug/ml、173.73±4.66 ug/ml、143.73±7.63 ug/ml;A2组、B2组、C2组、D2组分别为291.38±9.74 ug/ml、246.82±9.72 ug/ml、201.32±8.52 ug/ml、166.90±7.32 ug/ml。(4)大鼠染毒4.5h后,大鼠血浆百草枯浓度A1组、B1组、C1组、D1组分别为228.00±8.07 ug/ml、162.73±5.24 ug/ml、123.42±6.58 ug/ml、84.62±4.44 ug/ml;A2组、B2组、C2组、D2组分别为240.85±5.01 ug/ml、183.72±5.30 ug/ml、142.37±5.10 ug/ml、111.72±5.12 ug/ml。2、统计分析结果(1)大鼠染毒30min后,各实验组血浆百草枯浓度差异无统计学意义,说明急性百草枯中毒SD大鼠模型构建成功;(2)染毒后1.5h的析因分析结果显示(F=0.229,P=0.876)说明洗胃液浓度与洗胃液时间之间无交互作用;洗胃液浓度(F=718.006,P0.05)洗胃液时间(F=291.162,P0.05),说明两者的主效应差异均具有统计学意义,且由描述性统计分析结果可知,血浆百草枯浓度由高到低分别为模型组(267.59±18.51)、清水组(225.41±17.42)、15%漂白土混悬液组(178.58±18.77)、30%漂白土混悬液组(149.91±18.91)。(3)染毒后2.5h的析因分析结果显示(F=0.412,P=0.745)说明洗胃液浓度与洗胃液时间之间无交互作用;洗胃液浓度(F=526.093,P0.05)洗胃液时间(F=128.375,P0.05),说明两者的主效应差异均具有统计学意义,且由描述性统计分析结果可知,血浆百草枯浓度由高到低分别为模型组(278.77±15.63)、清水组(231.75±17.96)、15%漂白土混悬液组(187.53±15.82)、30%漂白土混悬液组(155.32±14.04)。(4)染毒后4.5h的析因分析结果显示(F=3.177,P=0.034)洗胃液浓度与洗胃液时间之间交互作用差异有统计学意义,且由描述性统计分析结果可知,血浆百草枯浓度由高到低分别为模型组(234.43±9.72)、清水组(173.23±12.05)、15%漂白土混悬液组(132.89±11.37)、30%漂白土混悬液组(98.17±14.87)。结合交互作用轮廓图可知染毒30min后采用30%漂白土混悬液洗胃,即二者联合时洗胃效果最佳,二者之间存在协同作用。(5)重复测量方差分析对各组大鼠不同时间点血浆百草枯浓度进行纵向分析,重复测量方差分析显示不同洗胃液浓度(F=815.17,P0.05)、不同洗胃时间(F=197.60,P0.05)、各个时点(F=10359.40,P0.05)、各洗胃时点*各洗胃浓度(F=371.368,P0.05)以及各洗胃时点*不同洗胃时间(F=92.148,P0.05)之间差异有统计学意义;结合不同时间点洗胃的MEASURE-1的估算边际均值趋势图可知,洗胃延缓了大鼠体内血浆百草枯浓度的上升,且大鼠染毒后30min洗胃,采用30%的漂白土混悬液时效果最佳。3、肺组织病理结果模型组(不洗胃组)可见肺组织整体结构严重异常,肺泡消失,肺组织实质化伴肺泡隔毛细血管扩张充血,肺组织整体淤血;清水洗胃组可见肺组织部分肺泡萎缩,肺泡隔增粗,部分肺泡融合成肺大泡;15%漂白土混悬液洗胃组与30%漂白土混悬液洗胃组整体肺组织结构有些异常,肺泡隔增粗伴毛细血管扩张充血,部分肺泡融合形成肺大泡,除此之外还有支气管周围可见炎症细胞浸润。结论清水组、15%漂白土混悬液组、30%漂白土混悬液组与模型组之间的比较证明中毒后洗胃能够有效减少胃对百草枯药物的吸收,减缓血浆百草枯浓度的上升;15%漂白土混悬液组、30%漂白土混悬液组、清水组之间的两两比较,结果显示漂白土洗胃组洗胃效果明显优于清水组,而30%漂白土混悬液洗胃效果优于15%漂白土洗胃组;染毒后30min启动洗胃组各个时间点的血浆百草枯浓度显著低于染毒后60min洗胃组;因此,百草枯中毒后应尽早洗胃,并且洗胃液浓度以30%漂白土悬浊液为佳。
【关键词】：急性百草枯中毒 漂白土混悬液 洗胃 血浆百草枯浓度
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R595.4;R-332
【目录】：

• 摘要6-9
• Abstract9-13
• 缩略词表13-14
• 前言14-16
• 立项依据16-23
• 一、急性百草枯中毒定义16
• 二、流行病学16-21
• (一) 中毒途径16
• （二）中毒类型16-17
• （三）急性百草枯中毒的治疗17-18
• （四）洗胃18-21
• 三、目前临床存在的问题21-22
• 四、本课题研究的目的与内容22-23
• （一）研究目的22
• （二）研究内容22-23
• 急性百草枯中毒不同洗胃方案的设计23-29
• 一、研究方法23
• 二、实验对象与分组23
• 三、实验方法23-26
• （一）饲养环境23-24
• （二）实验药物24
• （三）SD大鼠急性百草枯中毒模型构建24
• （四）洗胃方法24-25
• （五）主要实验试剂25
• （六）主要实验器材25
• （七）其他实验试剂配置25-26
• （八）采血及制作血标本26
• （九）高效液相色谱法（HPLC）检测26
• （十）制作病理切片26
• 四、结果评价指标26-27
• 五、技术路线27
• 六、统计方法27-29
• 实验结果29-46
• 一、染毒 30min后不同洗胃液浓度对血浆百草枯浓度的影响分析29-30
• 二、染毒 1.5h后不同洗胃液浓度对血浆百草枯浓度的影响分析30-33
• 三、染毒 2.5h后不同洗胃液浓度对血浆百草枯浓度的影响分析33-35
• 四、染毒 4.5h后不同洗胃液浓度对血浆百草枯浓度的影响分析35-37
• 五、各组大鼠不同时间点血浆百草枯浓度比较分析37-39
• 六、肺脏病理切片观察39-41
• 七、讨论41-45
• （一）构建SD大鼠百草枯中毒模型41
• （二）漂白土混悬液洗胃对急性百草枯中毒的治疗作用41-44
• （三）漂白土混悬液洗胃对急性百草枯中毒后肺病理切片的影响44-45
• 八、结论45-46
• 全文总结46-48
• 附录48-50
• 参考文献50-55
• 综述 急性百草枯中毒后洗胃液的研究进展55-63
• 参考文献59-63
• 硕士在读期间发表论文和参加科研工作情况63-64
• 致谢64

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