MiR-150介导CXCR4调控糖尿病肾病间充质干细胞归巢
本文关键词：MiR-150介导CXCR4调控糖尿病肾病间充质干细胞归巢
更多相关文章： miR-150 糖尿病肾病 骨髓间充质干细胞 归巢
【摘要】：目的:探讨miR-150对DN间充质干细胞趋化归巢的影响是否是通过靶向调控CXCR4/SDF-1信号通路实现方法:提取C57BL/6J小鼠的骨髓间充质干细胞,通过成骨,成脂诱导及表面分子鉴定建立原代骨髓间充质干细胞细胞系。Lipofectamine2000转染miR-150 mimic,miR-150 inhibit及control至原代骨髓间充质干细胞,通过RT-PCR技术检测骨髓间充质干细胞miR-150的表达情况。通过western-blot检测CXCR4和SDF-1蛋白的表达,采用生物信息学软件检测miR-150的靶基因,通过transwell实验和划痕实验检测骨髓间充质干细胞的迁移;移植已构建好的miR-150慢病毒表达载体至DN小鼠,检测小鼠的24小时尿蛋白,血糖,肾脏比重;HE染色观察肾脏的形态变化,western-blot检测肾脏指标蛋白的表达。结果:骨髓间充质干细胞CD29,CD90阳性表达(97±2.25%)、(99±0.6%),CD45呈阴性表达(17±4.5%),并且可向脂肪细胞、骨细胞分化,符合干细胞特性。DN组骨髓间充质干细胞miR-150的表达较Normal组显著降低(p㩳0.05),DN组小鼠骨髓间充质干细胞中迁移相关蛋白CXCR4和SDF-1表达均显著高于正常小鼠骨髓间充质干细胞(p㩳0.05);生物信息学研究发现CXCR4含有miR-150的结合位点,且在多个物种中呈高度保守。骨髓间充质干细胞中过表达mi R-150后CXCR4表达水平明显下降(p㩳0.05),而抑制miR-150的表达CXCR4表达显著增加(p㩳0.05);Transwell迁移实验和划痕实验发现,过表达miR-150能显著抑制骨髓间充质干细胞迁移,抑制miR-150后细胞迁移能力提高;尾静脉注射移植感染miR-150慢病毒的骨髓间充质干细胞入DN小鼠,治疗4周后,mi R-150 inhibitor-MSC组小鼠尿蛋白明显低于DN未治疗组,血糖也比DN组小鼠明显下降,肾脏指数同样比DN组有所降低(p㩳0.05),HE染色发现miR-150 inhibitor-MSC组肾脏组织病理形态学明显改善。Western-blot检测发现肾脏组织中DN组高表达CXCR4/SDF-1蛋白,miR-150 inhibitor-MSC治疗后CXCR4和SDF-1蛋白表达降低(p㩳0.05)。结论:抑制miR-150的表达会引起CXCR4表达增加,从而刺激骨髓间充质干细胞归巢,修复受损的肾脏组织。
【关键词】：miR-150 糖尿病肾病 骨髓间充质干细胞 归巢
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R692.9
【目录】：
- 英汉缩略语名词对照4-5
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 前言9-11
- 第一部分 C57BL/6J小鼠骨髓间充质干细胞提取与鉴定11-18
- 1 实验材料11-12
- 2 实验方法12-13
- 3 实验结果13-16
- 4 讨论16-17
- 结论17-18
- 第二部分 miR-150 通过CXCR4 调控糖尿病肾病BMSCs迁移18-30
- 1 实验材料与方法18-19
- 2 实验方法19-23
- 3 实验结果23-27
- 4 讨论27-28
- 结论28-30
- 第三部分 miR-150 调控骨髓间充质干细胞向db/db小鼠肾脏归巢30-39
- 1 实验材料30-31
- 2 实验方法31-33
- 3 结果33-37
- 4 讨论37-38
- 结论38-39
- 参考文献39-42
- 文献综述42-52
- 参考文献47-52
- 致谢52-53
- 研究生期间发表论文53
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 本刊编辑部;;我国首家间充质干细胞库在天津落成[J];中国药业;2006年07期
2 张鑫;赵桂秋;;间充质干细胞在眼科领域的研究与应用[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年06期
3 史春梦;;间充质干细胞表述中需要注意的几个问题[J];第三军医大学学报;2009年14期
4 瞿海龙;边剑飞;张冰;王颖;周英莲;;间充质干细胞临床应用的前景与困惑[J];医学研究与教育;2011年05期
5 郭子宽;;间充质干细胞及其临床应用中的几个问题[J];中国组织工程研究;2012年01期
6 李炳尧;武晓云;吴岩;;间充质干细胞的分离与培养:从实验室到临床[J];中国组织工程研究;2013年14期
7 吴实;邓列华;;皮肤间充质干细胞在促进皮肤愈合中的作用[J];实用皮肤病学杂志;2013年03期
8 吴清法,王立生,吴祖泽;间充质干细胞的来源及临床应用[J];军事医学科学院院刊;2002年03期
9 黄定强;间充质干细胞的研究进展[J];国外医学(耳鼻咽喉科学分册);2003年03期
10 付文玉,路艳蒙,乔东访,朴英杰;运用组织工程学原理构建间充质干细胞的三维培养体系[J];潍坊医学院学报;2003年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈可;王丁;韩之波;朱德林;韩忠朝;;人脐带间充质干细胞体外发挥免疫活性的研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
2 金明顺;张毅;贾秀芬;周燕华;闫妍;刘慧雯;;小鼠脂肪间充质干细胞的分离、培养以及多潜能分化的研究[A];中国解剖学会第十一届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会论文汇编[C];2009年
3 李争艳;刘杨;翟丽丽;杨迷玲;王立峰;;间充质干细胞在肿瘤发展过程中的作用[A];中华医学会病理学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
4 张彦;李尚珠;;间充质干细胞在血管工程中的机制及应用[A];2009全国中西医结合周围血管疾病学术交流会论文集[C];2009年
5 石玉;戴\戎;;周期性拉应力对间充质干细胞分化影响的研究[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年
6 黎娇;朱争艳;杜智;骆莹;王鹏;高英堂;;人脐带间充质干细胞分泌物对肝细胞增殖和凋亡的影响[A];天津市生物医学工程学会第30次学术年会暨生物医学工程前沿科学研讨会论文集[C];2010年
7 谭远超;Kevin;姜红江;黄相杰;周纪平;;间充质干细胞在骨伤疾病治疗中的应用[A];首届全国中西医结合骨科微创学术交流会暨专业委员会成立大会论文汇编[C];2011年
8 唐佩弦;;间充质干细胞及其临床应用前景[A];第三届全国血液免疫学学术大会论文集[C];2003年
9 戴育成;;间充质干细胞的生物学特性和应用[A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2005年
10 胡琳莉;王昕荣;钱坤;李舟;杨薇;朱桂金;;小鼠间充质干细胞向子宫内膜分化的实验研究[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 满学杰;天津滨海新区建最大间充质干细胞生产基地[N];新华每日电讯;2008年
2 满学杰;津昂赛打造间充质干细胞生产基地[N];医药经济报;2008年
3 第三军医大学西南医院输血科 李忠俊 整理 吴刘佳;间充质干细胞研究又见新方法[N];健康报;2013年
4 上海生科院 上海交大医学院健康科学研究所 曹楷;间充质干细胞：干细胞中的孙悟空[N];上海科技报;2014年
5 记者 陈建强;首家间充质干细胞库在津建成[N];光明日报;2006年
6 记者 冯国梧;细胞产品国家工程中心建设方案获准[N];科技日报;2007年
7 实习生 刘霞;间充质干细胞有望用于面部整形[N];科技日报;2007年
8 本报记者 王新佳;我国“原始间充质干细胞”注射液进入临床研究[N];中国高新技术产业导报;2005年
9 冯国梧;全球首个脐带间充质干细胞库规模化运营[N];科技日报;2008年
10 刘莹清;全球首个脐带间充质干细胞库泰达规模运营[N];北方经济时报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王皓;五指山小型猪OCT-4、SOX-2基因在骨髓间充质与脐带间充质干细胞中的过表达研究[D];中国农业科学院;2013年
2 孔德晓;间充质干细胞及胰岛素分泌细胞治疗糖尿病的临床及应用基础研究[D];山东大学;2015年
3 董苑;SDF-1复合PDPBB的构建及对间充质干细胞趋化影响的研究[D];昆明医科大学;2015年
4 王磊;诱导胎盘来源间充质干细胞向成牙骨质细胞分化的实验研究[D];山东大学;2015年
5 房贺;连接黏附分子A在促进MSC修复CC14肝损伤中的作用及其机制[D];第二军医大学;2015年
6 陈洁;间充质干细胞外泌体对急性肺损伤小鼠的影响及相关机制的实验研究[D];中国人民解放军医学院;2015年
7 许婷;转化生长因子β1在蟑螂过敏原诱导的哮喘中对间充质干细胞募集迁移的影响[D];南方医科大学;2015年
8 周雅丽;携氧间充质干细胞对胃癌化疗效果的影响及其机制研究[D];兰州大学;2015年
9 沈舒宁;CKIP-1负调控间充质干细胞成骨分化研究[D];第四军医大学;2015年
10 姚惟琦;脂肪来源间充质干细胞治疗急性肾损伤[D];武汉大学;2015年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李超;小鼠骨髓间充质干细胞中AC基因亚型的表达及AC3对其纤毛长度的影响[D];河北大学;2015年
2 林涛;壳聚糖水凝胶复合脂肪间充质干细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究[D];川北医学院;2015年
3 彭龙英;心肌营养素1促进人脐血间充质干细胞神经分化存活及PI3K/Akt信号通路机制研究[D];遵义医学院;2015年
4 乔晓慧;酸性环境对人脐带间充质干细胞的影响[D];内蒙古大学;2015年
5 张红霞;人脐带间充质干细胞的分离、鉴定及其对人肺癌细胞恶性表型的影响[D];内蒙古大学;2015年
6 顾立超;BTK抑制剂对间充质干细胞miR-21的调节作用[D];河北联合大学;2014年
7 王文杰;鸭胚间充质干细胞生物学特性及其移植修复肝损伤研究[D];中国农业科学院;2015年
8 张猛;血管内皮前体细胞对间充质干细胞分化潜能的影响[D];石河子大学;2015年
9 马丽媛;利用MyoD基因诱导绵羊脐带间充质干细胞分化为成肌细胞的研究[D];东北林业大学;2015年
10 宋维文;MicroRNA-133诱导绵羊间充质干细胞分化为成肌细胞的研究[D];东北林业大学;2015年
，本文编号：890935
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/890935.html
