白介素35蛋白在糖尿病视网膜病变中作用的初步研究

发布时间：2017-09-21 21:38

  本文关键词：白介素35蛋白在糖尿病视网膜病变中作用的初步研究

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【摘要】：目的:白介素35在调节T细胞及B细胞免疫应答及炎症反应中起重要作用,本文将通过测定其在糖尿病视网膜病变患者血清及玻璃体中的表达,以及体外实验探讨白介素35蛋白对人视网膜色素上皮细胞(Acute retinal pigment epithelial cell,ARPE-19)功能的影响,以期探讨其与糖尿病视网膜病的关系。方法:选择在2014年9月至2015年11月期间重庆医科大学附属第一医院眼科住院部的2型糖尿病患者,根据国际标准将其分为糖尿病无视网膜病变组(DWR)、非增殖性糖尿病视网膜病变组(NPDR)及增殖性糖尿病视网膜病变组(PDR),纳入特发性黄斑前膜需行玻璃体切割术患者作为对照组。分别抽取2型糖尿病及患者对照组患者及静脉血,离心分离出血清;于手术中抽取增殖性糖尿病视网膜病变患者及对照组患者玻璃体液,离心取上清。使用酶联免疫吸附试验分别测定各血清及玻璃体液中白介素35的蛋白表达水平。将ARPE-19细胞分为低糖组(5.5mmol/L D-葡萄糖)、高渗对照组(5.5mmol/L D-葡萄糖加20mmol/L甘露醇)、高糖组(25mmol/L D-葡萄糖)、高糖+IL-35蛋白组A(25mmol/L D-葡萄糖加重组白介素35蛋白20ng/ml)、高糖+IL-35蛋白组B(25mmol/L D-葡萄糖加重组白介素35蛋白50ng/ml)、高糖+IL-35蛋白组C(25mmol/L D-葡萄糖加重组白介素35蛋白100ng/ml)。利用RT-PCR测定ARPE-19细胞中IL-35及其受体各亚基、IL-6、MCP-1及VEGF mRNA的表达,利用CCK8测定各组细胞活力,ELISA测定各组细胞上清中IL-6、MCP-1及VEGF的表达水平。结果:PDR患者血清中白介素35蛋白表达水平显著降低(P0.05),PDR组患者玻璃体液中IL-35蛋白表达水平较对照组显著降低(P0.001)。而白介素35蛋白表达水平在DWR组患者及NPDR组患者血清中表达水平与对照组无显著性差异(P0.05)。体外实验结果显示:高糖培养下的ARPE-19细胞中IL-35及其受体各亚基mRNA表达显著降低(P0.05);重组IL-35蛋白可显著缓解高糖处理对ARPE-19细胞活力的抑制作用,并可对高糖促进ARPE-19细胞分泌炎症因子IL6及MCP-1、生长因子VEGF的能力有显著的抑制(P0.05)。结论:白介素35可能与增殖性糖尿病视网膜病变的发病机制相关。
【关键词】：增殖性糖尿病视网膜病变 白介素35蛋白 炎症 免疫调节
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R774.1
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 第一部分 白介素35蛋白在糖尿病视网膜病变患者血清及玻璃体中的表达12-18
• 1 材料及方法12-14
• 2 实验结果14-18
• 第二部分 白介素35蛋白在高糖培养的视网膜色素上皮细胞中作用初步探究18-33
• 1 材料及方法18-25
• 2 实验结果25-33
• 第三部分 讨论33-37
• 全文总结37-38
• 参考文献38-42
• 文献综述42-48
• 参考文献46-48
• 致谢48-49
• 攻读硕士学位期间发表的论文49

【参考文献】

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1 万俊;罗英;杨春平;柳佳丽;杜云艳;王坤;;变应性鼻炎患者外周血IL-35及EBI3 mRNA和IL-12A mRNA表达的研究[J];临床耳鼻咽喉头颈外科杂志;2014年13期

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本文编号：897048