活血化痰配伍对高脂血症合并铁代谢异常小鼠的保护效应研究

发布时间：2017-09-29 00:10

  本文关键词：活血化痰配伍对高脂血症合并铁代谢异常小鼠的保护效应研究

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【摘要】：目的:1.明确高脂饮食对Fpn1 Tek-cre小鼠铁代谢的影响及其与内皮损伤、氧化应激及铁调素相关性;2.明确活血化痰配伍对高脂血症合并铁代谢异常小鼠的保护效应及其分子机制。方法:1.将16只8周龄雄性fpn1 tek-cre小鼠,适应性饲养一周后,随机分为2组,每组8只,其中8只喂养高脂饲料,做实验组(MOD,model group);8只喂饲普通饲料,为正常对照组(NOR,normal group)。造模8周处死两组小鼠。所有小鼠均取血、分离肝脏及主动脉。全自动生化分析仪检测:TC、TG、LDL-C、HDL-C、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);ELISA法测定血清铁调素(hepcidin)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、白介素-6(IL-6);2.40只8周龄雄性Fpn1 Tek-cre小鼠予以高脂饲料喂养8周后,随机分为模型组(MOD)、阿托伐他汀组(ATO,Atorvastatin group)、丹参组(SM,Salvia miltiorrhiza group)、瓜蒌组(TKM,Trichosanthes Kirilowii Maxim group)、丹参瓜蒌组(SM-TKM),每组8只。继续高脂喂养,按人体重和动物间体表面积折算的等效比值的临床推荐剂量分别给予生理盐水、阿托伐他汀混悬液5.1mg/kg、丹参组2.56g/kg、瓜蒌组3.84g/kg、丹参瓜蒌组6.4g/kg连续灌胃2周后处死,分离血清、肝脏及主动脉。全自动生化分析仪检测:TC、TG、LDL-C、HDL-C、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);ELISA法测定血清铁调素(hepcidin)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、白介素-6(IL-6);免疫组织化学法观察主动脉组织内骨形态发生蛋白(BMP-6,bone morphogenetic protein-6)表达;Western blotting检测主动脉组织p-smad1/5/8、p-stat3蛋白表达量。结果:1.高脂饮食后,与NOR组比较,MOD小鼠血清中TG、TC、LDL及hepcidin水平均明显增高(P0.01),肝脏铁细胞计数增多(P0.05),出现明显的铁沉积;同时血清ET-1、IL-6、MDA水平显著升高(P0.05),NO及SOD水平显著下降(P0.05);此外,MOD组内皮BMP-6、p-stat3、p-smad1/5/8蛋白表达水平均显著增加(P0.05)。2.药物干预后,与MOD组比较,各药物组hepcidin显著下降;肝脏内铁细胞计数显著减少(P0.05),铁沉积得到显著缓解;同时,血清ET-1、IL-6、MDA水平显著降低(P0.05),NO及SOD水平明显升高(P0.05);此外,各药物组主动脉内皮BMP-6、p-stat3、p-smad1/5/8蛋白水平均显著降低(P0.05或P0.01)。各药物组间比较,丹参瓜蒌组(活血化痰)效果要优于丹参组(活血)及瓜蒌组(化痰)。结论:1.高脂饮食可诱导Fpn1 Tek-cre小鼠出现明显的铁沉积和内皮功能损伤及氧化应激,同时可引发铁调素相关信号通路表达异常;2.丹参和瓜蒌的活血化痰配伍对高血脂合并铁代谢异常小鼠具有显著地保护效应,其保护机制与调节脂质代谢、改善血管内皮细胞功能、减轻炎症反应、抗氧化损伤相关,同时也与调控铁调素及其相关信号通路间密切相关。
【关键词】：铁代谢异常 铁调素 活血化痰配伍 高脂血症
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R589
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 符号说明9-11
• 前言11-12
• 实验一 高脂血症对小鼠铁调素表达的影响12-24
• 1. 材料与方法12-17
• 2. 结果17-20
• 2.1. 一般观察17-18
• 2.2. 体质量18
• 2.3. 血脂检测18
• 2.4. 肝组织病理形态学变化18-19
• 2.5. 血清铁调素表达情况19
• 2.6. NO、ET-1 水平变化19-20
• 2.7. IL-6 水平变化20
• 2.8. MDA含量、SOD活性变化20
• 3. 讨论20-24
• 实验二 活血化痰配伍对高脂血症小鼠铁调素及相关信号通路的干 预效应24-44
• 1. 材料与方法24-33
• 1.1. 材料24-25
• 1.2. 方法25-33
• 2. 结果33-39
• 2.1.各组小鼠血清脂质代谢33-34
• 2.2.肝脏病理学观察34-39
• 2.2.1.普鲁士蓝染色35-36
• 2.2.2.各组小鼠ET-1、NO水平变化36-37
• 2.2.3.各组小鼠血清hepcidin表达、IL-6 水平、MDA含量及SOD活性变化37-38
• 2.2.4.各组小鼠免疫组化主动脉BMP-6 蛋白表达38
• 2.2.5.各组小鼠WB测p-stat3、p-smad1/5/8 磷酸化水平38-39
• 3. 讨论39-44
• 参考文献44-49
• 附录49-51
• 1. 技术路线图49-50
• 2. 铁调素代谢相关途径50
• 3. 铁调素相关信号蛋白调节50-51
• 结语51-52
• 1. 结论51
• 2. 展望51-52
• 文献综述52-69
• 参考文献61-69
• 致谢69-70
• 在校期间学术成果70

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：938846