促甲状腺激素对男性骨代谢的影响及其机制的研究

发布时间：2017-10-02 09:18

  本文关键词：促甲状腺激素对男性骨代谢的影响及其机制的研究

  更多相关文章： 骨代谢 TSH BMD 成骨细胞

【摘要】：骨质疏松症在中老年人群中发病率越来越高,但其具体的发病机制仍未十分明确。近几年研究发现,促甲状腺激素(TSH)可能直接影响骨代谢。本研究总共分为两部分：临床分析及体外实验,针对TSH对男性骨代谢的影响及其进一步作用于成骨细胞的可能机制进行了相关探讨。第一部分临床分析：甲状腺功能正常男性骨密度与血清TSH水平的关系目的：分析甲状腺功能正常男性血清TSH水平与骨密度(BMD)变化的关系。方法：以2009年10月-11月在济南市阳光舜城社区调查的年龄在20-75岁之间731例男性常住居民为研究对象(居住年限5年),严格按照排除标准纳入,共有114名男性纳入分析。采用罗氏检测血清FT3、FT4、TSH,应用双能X线方法测量受检者前臂BMD。记录并整理研究对象基本资料,并分别根据TSH和BMD水平,将研究对象进行分组,分析比较TSH与BMD的关系。结果：低TSH组与高TSH组两组对象在年龄、BMI、FT3、FT4上相匹配,TSH水平与BMD呈正相关,随血清TSH浓度的升高,甲功正常男性BMD也随之升高。结论：甲状腺功能正常男性血清中TSH与BMD呈正相关,表明TSH能够直接影响骨代谢。第二部分体外实验：TSH对原代成骨细胞增殖及分化的影响目的：观察在大鼠原代成骨细胞体外培养过程中,TSH对成骨细胞的增殖以及分化过程中相关基因mRNA、蛋白表达的影响。方法：取新生SD大鼠颅骨,采用改良二次酶消化法体外分离培养原代成骨细胞并进行鉴定,加入不同浓度(1、10、100 mu/m1)TSH进行处理,分别于加入处理后第12、24、48 h进行MTT比色试验,观察对其增殖的影响。利用Real-TimePCR检测成骨细胞分化及调节相关基因碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原(COI1)、骨形成蛋白(BMP2)、Runx2 mRNA的表达变化；应用ELISA法检测TSH对ALP、BMP2蛋白表达的影响；应用Western blot方法检测TSH对成骨细胞分化过程中关键转录因子Runx2、Osterix蛋白表达的影响。结果：1.经鉴定,体外分离提取的细胞为原代成骨细胞。2.在TSH为100mu/ml时对成骨细胞的增殖具有促进作用并且作用最强,TSH为10mu/m1时对其增殖也有一定的促进作用,但弱于前者,TSH为lmu/ml对成骨细胞的增殖无促进作用。3. RT-PCR表明与对照组相比,实验组OB分化调节相关基因ALP、C0I1、BMP2、Runx2mRNA表达呈增加趋势,并且不同浓度TSH可剂量依赖性增加这些基因mRNA表达。4. ELISA结果示：与对照组相比,实验组ALP、BMP2蛋白表达水平增高,与RT-PCR结果相一致。5. Western-Blot结果示：与对照组相比,实验组随着TSH浓度增加Runx2、 Osterix表达呈增高趋势。结论：TSH可以促进原代成骨细胞的增殖及分化,这也可能是TSH促进由成骨细胞介导的骨形成的部分作用机制。
【关键词】：骨代谢 TSH BMD 成骨细胞
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R580
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 符号说明10-11
• 第一部分 甲状腺功能正常男性密度与血清促甲状腺技术水平的关系11-20
• 前言11-13
• 资料和方法13-14
• 结果14-16
• 讨论16-19
• 结论19-20
• 第二部分 TSH对原代成骨细胞增殖及分化的影响20-50
• 前言20-23
• 资料和方法23-38
• 结果38-44
• 讨论44-49
• 结论49-50
• 参考文献50-57
• 致谢57-58
• 攻读学位期间发表的论文58-59
• 学位论文评阅及答辩情况表59

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本文编号：958789