核桃多肽防治糖尿病物质基础及作用机制研究

发布时间：2017-10-04 15:01

  本文关键词：核桃多肽防治糖尿病物质基础及作用机制研究

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【摘要】：糖尿病已成为继肿瘤、心血管疾病之后严重威胁人类健康的第三大疾病,但目前传统降糖药物不能满足现代社会对糖尿病治疗需求,寻找高效、安全的防治糖尿病药物仍是全球关注的热点。本课题以药食两用的核桃作为原料,以复合酶酶解法制备的核桃多肽作为研究对象,考察核桃蛋白及多肽的降糖活性。论文的主要内容和结论:1.核桃多肽最佳制备工艺:以中性蛋白酶在底物浓度为2%,酶解时间为1 h,酶解pH为7,酶用量为8000μg/g条件下对核桃蛋白酶解,再加入碱性蛋白酶在底物浓度为2%,酶解时间为2 h,酶解pH为9,酶用量为10000μg/g条件下酶解,核桃蛋白水解度达40%左右,同时酶解产物核桃多肽对α-淀粉酶抑制率达85.9%。2.采用Superdex ~(TM) Peptide 10/300 GL柱对酶解产物核桃多肽最佳分离条件为:Nacl浓度为0.15 mol/L,多肽上样浓度8 mg/ml,流速0.5 ml/min。核桃多肽中分离组分JRP-1,平均分子量约为10077,含量为38.94%;JRP-2平均分子量约为1083,含量为40.92%。3.核桃蛋白及多肽皆具有一定的抗氧化活性,并且核桃多肽的抗氧化活性明显高于蛋白。以GSH作为阳性对照,发现核桃多肽对DPPH·清除能力接近75.00%,达到GSH的80%;核桃多肽对O2ˉ·清除率为70.70%,是GSH的87%;核桃蛋白及多肽的总还原能力明显低于对照品GSH,但相同浓度的核桃多肽总还原能力几乎是核桃蛋白的2倍;核桃多肽对·OH清除率明显优于核桃蛋白,且达到对照品GSH的50%以上。4.核桃蛋白及多肽均具有体外降糖效果,能促进酿酒酵母对葡萄糖的利用,并且多肽效果略优于蛋白。当核桃多肽的添加量为15 mg/50 ml时,促进作用最佳,超过空白组的2倍,葡萄糖平均消耗速率达0.026 mg/(ml·h)。5.分别采用核桃蛋白、多肽对T2DM小鼠进行治疗,核桃蛋白及多肽能显著改善T2DM小鼠进食后对葡萄糖调节能力,有效的控制葡萄糖水平,具有较好的降血糖效果,能显著降低血清中TC、TG水平,具有改善糖尿病发病过程中糖脂代谢功能障碍的作用,对糖尿病所致的心脏、肝脏及肾脏病变具有一定的改善作用,能够减轻糖尿病并发症。
【关键词】：核桃 蛋白 多肽 降血糖
【学位授予单位】：武汉工程大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.1
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 第1章 文献综述12-25
• 1.1 胡桃科资源概述12-13
• 1.2 核桃营养价值13-18
• 1.3 核桃仁药理活性18-22
• 1.4 本课题研究目的与意义22-23
• 1.5 本课题研究内容及主要创新点23-24
• 1.6 课题实验流程图24-25
• 第2章 核桃多肽制备25-41
• 2.1 引言25
• 2.2 实验材料25-27
• 2.2.1 实验药材25
• 2.2.2 实验试剂25-27
• 2.3 实验方法27-34
• 2.3.1 核桃蛋白的提取27
• 2.3.2 核桃蛋白质含量测定27-29
• 2.3.3 核桃多肽的制备29-34
• 2.4 结果与讨论34-39
• 2.4.1 标准曲线的绘制34
• 2.4.2 核桃蛋白含量测定结果34
• 2.4.3 核桃蛋白酶解结果34-39
• 2.5 本章总结39-41
• 第3章 核桃多肽的分离纯化41-50
• 3.1 引言41
• 3.2 实验材料41-42
• 3.3 实验方法42-43
• 3.3.1 实验试剂的配制42
• 3.3.2 确定核桃多肽分离最佳条件42-43
• 3.3.3 JRP-1 和JRP-2 分子量的测定43
• 3.4 结果与讨论43-49
• 3.4.1 核桃多肽最佳分离条件结果43-46
• 3.4.2 最佳分离条件的验证46-47
• 3.4.3 JRP-1 和JRP-2 分子量的测定结果47-49
• 3.5 本章总结49-50
• 第4章 核桃蛋白及多肽抗氧化活性测定50-58
• 4.1 引言50
• 4.2 实验材料50-52
• 4.3 实验方法52-54
• 4.3.1 DPPH·清除率测定52
• 4.3.2 O_2~-·清除率测定52-53
• 4.3.3 总还原能力测定53
• 4.3.4 ·OH清除率测定53-54
• 4.4 结果与讨论54-57
• 4.4.1 核桃蛋白及多肽对DPPH·清除能力54-55
• 4.4.2 核桃蛋白及多肽对O_2~-·清除能力55
• 4.4.3 核桃蛋白及多肽的总还原能力55-56
• 4.4.4 核桃蛋白及多肽对·OH清除能力56-57
• 4.5 本章小结57-58
• 第5章 核桃蛋白及多肽降糖研究58-76
• 5.1 引言58
• 5.2 实验材料58-60
• 5.2.1 实验动物及菌种58
• 5.2.2 实验试剂与仪器58-60
• 5.3 实验部分60-63
• 5.3.1 体外降糖活性初探60-61
• 5.3.2 体内降糖活性初探61-63
• 5.4 结果与讨论63-74
• 5.4.1 体外降糖活性初探63-67
• 5.4.2 体内降糖活性初探67-74
• 5.5 本章小结74-76
• 第6章 总结76-78
• 参考文献78-86
• 攻读硕士期间发表的论文86-87
• 致谢87

【参考文献】

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本文编号：971273