TH1082的合成及其诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡的作用及机制研究

发布时间：2017-10-14 20:16

  本文关键词：TH1082的合成及其诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡的作用及机制研究

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【摘要】：氮杂吲哚是一类在材料科学、配位化学、药物设计及合成方向有重要作用的杂环分子，在抗肿瘤、抗菌、抗病毒和治疗高血压等方面具有良好的效果。7-氮杂吲哚是经过sp2-杂化后，N原子取代吲哚母环上的7-位C原子而形成，同样具有生物学活性。本研究设计并合成了一个新的7-氮杂吲哚衍生物TH1082，分子式为C21H27O2N5，选用人黑色素瘤A375细胞作为研究对象，探讨TH1082诱导A375细胞凋亡作用及其机制。 本研究采用MTT法、荧光染色法、流式细胞术、Western Blot和QPCR等方法，从形态学、基因和蛋白水平，探讨TH1082诱导A375细胞凋亡的作用及机制。 结果表明，TH1082可降低线粒体膜电位，上调Bax/Bcl-2比率，促进Cyt c、Smac和AIF释放到细胞浆中，活化caspase-3和caspase-9，使caspase-3和caspase-9蛋白表达增加，促使caspase-3底物PARP剪切，激活内源性途径诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡；TH1082也可以活化caspase-8，使caspase-8、Fas和FasL蛋白表达增加，激活外源性途径诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡。TH1082亦可使MAPK信号通路活化，促使ERK1/2磷酸化，加入抑制剂PD98059后，TH1082诱导A375细胞凋亡作用减轻。TH1082可以使p53和p27kip1蛋白表达增加，使c-myc、CDK4和cyclin D1蛋白表达降低，，将细胞阻滞在G0/G1期，加入抑制剂PD98059后，这种阻滞效果降低。TH1082能抑制PI3K/Akt信号通路活化，使p-PTEN、GSK-3β蛋白表达上升，PTEN、p-Akt（Thr308）和p-Akt（Ser473）蛋白表达下降，诱导A375细胞凋亡。 TH1082能激活MAPK信号通路，将A375细胞阻滞在G0/G1期，通过内源性和外源性途径诱导A375细胞凋亡。
【关键词】：7-氮杂吲哚衍生物 人黑色素瘤A375细胞 细胞凋亡 周期阻滞 MAPK信号通路 PI3K/Akt信号通路
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.5
【目录】：

• 提要4-5
• 中文摘要5-10
• Abstract10-18
• 英文缩写表18-21
• 第1章 绪论21-39
• 综述 1 黑色素瘤与细胞凋亡21-39
• 1.1 黑色素瘤的治疗进展21-22
• 1.2 细胞凋亡的概念及其生物学特征22-23
• 1.2.1 细胞凋亡的形态学特征22
• 1.2.2 细胞凋亡的生物化学特征22-23
• 1.3 启动细胞凋亡的分子机制23-32
• 1.3.1 外源性通路-死亡受体信号转导通路23-29
• 1.3.2 内源性通路-线粒体信号转导通路29-32
• 1.4 细胞凋亡的调控因素32-33
• 1.4.1 凋亡抑制蛋白32
• 1.4.2 活性氧32-33
• 1.4.3 p53 蛋白33
• 1.5 肿瘤细胞凋亡信号转导通路33-39
• 1.5.1 PI3K/Akt 通路与细胞凋亡33-34
• 1.5.2 MAPK 通路与细胞凋亡34-39
• 综述2 7-氮杂吲哚衍生物的研究进展39-43
• 第2章 TH1082 的合成及其诱导细胞凋亡作用的研究43-69
• 2.1 引言43
• 2.2 材料与方法43-50
• 2.2.1 主要试剂与仪器43-46
• 2.2.2 实验方法46-50
• 2.3 实验结果50-67
• 2.3.1 TH1082 的结构50-51
• 2.3.2 TH1082 对肿瘤细胞增殖的影响51-62
• 2.3.3 形态学观察62-63
• 2.3.4 AO/EB 染色63-65
• 2.3.5 Hoechst33342/PI 染色65
• 2.3.6 DAPI 染色65-67
• 2.4 小结67-69
• 第3章 TH1082 诱导人黑色素瘤 A375 细胞凋亡机制研究69-103
• 3.1 引言69
• 3.2 材料与方法69-80
• 3.2.1 主要试剂与仪器69-73
• 3.2.2 实验方法73-80
• 3.3 实验结果80-102
• 3.3.1 TH1082 对 A375 细胞线粒体途径的影响80-88
• 3.3.2 TH1082 对 A375 细胞死亡受体途径的影响88-90
• 3.3.3 TH1082 对 A375 细胞周期的影响90-93
• 3.3.4 TH1082 对 A375 细胞 PI3K/Akt 信号通路的影响93-94
• 3.3.5 TH1082 对 A375 细胞 MAPK 信号通路的影响94-102
• 3.4 小结102-103
• 第4章 结论103-105
• 第5章 讨论105-111
• 本论文创新性111-113
• 参考文献113-125
• 作者简介及在读期间取得科研成果125-126
• 致谢126

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 谭雪;周莹;姚其正;;7-氮杂吲哚及其类似物的合成与抗肿瘤和抗菌活性研究[J];国外医药(抗生素分册);2010年05期

本文编号：1032988