ZAP70在干皮性瘙痒中的作用
发布时间:2017-10-24 06:24
本文关键词:ZAP70在干皮性瘙痒中的作用
【摘要】:目的:干皮性瘙痒在老年人中很常见,严重的影响了患者的生活质量。越来越多的文献报道,T细胞所介导的免疫反应,是诱发干皮性瘙痒发生的重要原因之一。Zeta链相关蛋白激酶70(ZAP70)在T细胞信号传导通路中发挥重要作用了,参与T细胞信号传导过程,促进了下游细胞因子的分泌。在本实验中,我们主要探究了ZAP70干皮性瘙痒在老年模型中的表达情况。方法:分别使用18月龄和5月龄的C57小鼠来模拟老年和青年状态,使用丙酮/乙醚和水引起皮肤干燥进而诱发瘙痒,此模型在瘙痒领域中,是公认的干皮瘙痒模型;年龄和性别相同的C57小鼠通过涂抹生理盐水处理,作为空白对照。使用动物后肢抓挠次数,作为反映瘙痒的严重程度的指标。通过实时荧光定量PCR,Western Blot和免疫组化来检测ZAP70在干皮性瘙痒动物模型中的表达和定位。然后,通过ELISA检测T细胞信号下游的白细胞介素2(IL-2)和神经生长因子(NGF)的表达水平。结果:经过AEW建模后发现,老年模型比青年模型有着更加严重的瘙痒反应。蛋白水平检测发现,老年模型组的皮肤中ZAP70表达量要远远高于青年组。Western-bolt结果用平均光密度值(MOD)来表示,老年模型组为1.84±0.09,青年模型组为1.17±0.06,P0.05。目的WB检测的蛋白的表达趋势与qRT-PCR检测的基因趋势结果一致。免疫组化的结果证实,ZAP70定位在皮肤真皮层的毛囊附近。通过ELISA证实,IL-2和NGF在老年模型皮肤组织中,其分泌量均有明显的升高。结论:实验结果证实,高表达的ZAP70参与到了老年干皮性瘙痒的发生过程中,并且可能是通过促进T细胞分泌IL-2和NGF,引起了干皮性老年瘙痒的发生。
【关键词】:老年 瘙痒 ZAP70 IL-2 NGF
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R758.31
【目录】:
- 英汉缩略语名词对照4-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 前言10-12
- 1. 材料与方法12-25
- 1.1 主要试剂和仪器12-14
- 1.2 实验动物分组及动物模型的建立14-15
- 1.3 实验方法15-24
- 1.4 统计学分析24-25
- 2. 结果25-29
- 2.1 抓挠行为学的观察结果25-26
- 2.2 免疫组化检测ZAP70 在皮肤中的定位26
- 2.3 检测干皮性瘙痒模型的ZAP70 的蛋白和m RNA的表达26-28
- 2.4 ELISA检测干皮性瘙痒模型的NGF、IL-2 的表达28-29
- 3. 讨论29-30
- 4. 小结与思考30-33
- 参考文献33-36
- 文献综述36-44
- 参考文献41-44
- 致谢44-45
- 攻读硕士期间发表的论文45
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1 赵楠;ZAP70在干皮性瘙痒中的作用[D];重庆医科大学;2016年
,本文编号:1087469
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