mGluR6通过ERK通路调节人角质形成细胞的吞噬功能
本文关键词:mGluR6通过ERK通路调节人角质形成细胞的吞噬功能
更多相关文章: 代谢型谷氨酸受体6 角质形成细胞 吞噬 细胞外调节蛋白激酶
【摘要】:目的:探讨代谢型谷氨酸受体6调节人角质形成细胞吞噬作用的分子机制。方法:1.人永生化角质形成细胞系(HaCaT细胞)的体外培养.冻存和复苏。 2.Western blot法检测HaCaT细胞中代谢型谷氨酸受体6(metabotropic glutamate receptor6,mGluR6)蛋白水平的表达。 3.构建慢病毒稳定转染细胞系:将下调mGluR6 基因的慢病毒载体转染至人角质形成细胞系,并建立稳定低表达细胞系(HaCaT-mGluR6),同时建立空病毒载体对照组(HaCaTNC- )。 4.Western blot法检测HaCaT细胞中mGluR6 的敲低效率。 5.运用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白F-actin在下调mGluR6的HaCaT细胞中的分布及变化。 6.Western blot法检测HaCaT.HaCaTNC-.HaCaTm-GluR- 6 各组细胞中pERK.ERK水平的表达。 7.Western blot法检测HaCaT.HaCaTNC-.HaCaTm-GluR-6各组细胞中p Ca M KII.Ca MKII水平的表达。 8.Western blot法检测HaCaT.HaCaTNC-.HaCaTm-GluR-6 各组细胞中pMLC.MLC水平的表达。结果:1.HaCaT细胞表达mGluR6且表达量丰富。 2.成功构建稳定下调mGluR6的HaCaT细胞,敲低效率达到~80%。 3.运用激光共聚焦显微镜观察到下调mGluR6 的HaCaT细胞与对照组相比,细胞骨架蛋白F-actin重新分布,细胞周边表达量较少,核周增多。 4.下调mGluR6 的HaCaT细胞中p ERK的表达量较对照组降低,ERK的表达量大致相同,pERK/ERK的比值明显降低。 5.下调mGluR6 的HaCaT细胞中pCaM KII的表达量较对照组降低,Ca M KII的表达量大致相同,pCaM KII/CaM KII的比值明显降低。 6.下调mGluR6 的HaCaT细胞中p MLC的表达量较对照组降低,,MLC的表达量大致相同,pMLC/MLC的比值明显降低。结论:1.人角质形成细胞系表达mGluR6。 2.mGluR6参与调节人角质形成细胞骨架蛋白F-actin的重新分布。 3.mGluR6可能通过CaM KII/ERK/MLC信号通路调节人角质形成细胞的吞噬功能。
【关键词】:代谢型谷氨酸受体6 角质形成细胞 吞噬 细胞外调节蛋白激酶
【学位授予单位】:大连医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R751
【目录】:
- 论文一 光动力疗法治疗多发性光线性角化病合并鲍温病一例6-12
- 查体6
- 诊断6
- 治疗6-9
- 讨论9-11
- 参考文献11-12
- 论文二 mGluR6通过ERK通路调节人角质形成细胞的吞噬功能12-31
- 摘要12-14
- ABSTRACT14-16
- 前言16-17
- 材料与方法17-21
- 结果21-25
- 讨论25-27
- 结论27-28
- 参考文献28-31
- 综述 表皮中黑素小体的转运机制研究31-38
- 参考文献35-38
- 攻读学位期间发表文章情况38-39
- 致谢39-40
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本文编号:1100540
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