慢性温和非预期应激加重斑秃模型小鼠脱毛及其机制的探讨

发布时间：2017-10-26 22:16

  本文关键词：慢性温和非预期应激加重斑秃模型小鼠脱毛及其机制的探讨

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【摘要】：目的:斑秃是一种常见的脱发疾病,其发病机制尚未完全阐明,但研究表明斑秃疾病的发生发展可能涉及免疫、微循环、精神心理等多种因素。本实验第一部分是运用人工合成的小分子干扰素诱导剂咪喹莫特,利用其免疫修饰的作用来制备斑秃小鼠模型。实验的第二部分是在斑秃模型的基础上,对实验小鼠进行慢性温和非预期性应激,并采用扩血管药前列地尔,利用其改善微循环的作用来干预慢性温和非预期性应激的影响。目的是探讨慢性温和非预期应激在咪喹莫特诱导斑秃模型过程中的作用及其分子机制,为斑秃疾病的心理干预提供新思路和实验依据。方法:1.采用咪喹莫特乳膏涂抹法建立C3H/HeJ小鼠斑秃模型,与空白对照组(Control组)比较,观察咪喹莫特对小鼠皮肤组织的影响。2.将小鼠随机分为空白对照组(Control组)、咪喹莫特组(M组)、咪喹莫特+慢性温和非预期应激组(MS组)、咪喹莫特+慢性温和非预期应激+前列地尔组(MSAL组)。选取实验开始前1天和第7、14、21天对小鼠体重进行测量和拍照,实验结束后,对4组小鼠进行行为学评估、采集标本及检测血中促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量;采用ELISA试剂盒检测小鼠皮肤中干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;采用血管内皮细胞标记物CD31标记血管,并计算微血管密度(MVD);采用免疫组织化学法检测小鼠皮肤中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)的表达变化。结果:1.以咪喹莫特涂抹法造模可见小鼠项部皮肤脱毛现象明显,呈斑片状,检测其皮肤组织的免疫因子显示IFN-γ和TNF-α因子的含量增高,皮损特点与人类斑秃具有相似性,可成功诱导斑秃模型。2.(1)MS组和MSAL组小鼠体重显著低于Control组和M组小鼠(P0.05),运动总距离和修饰行为次数显著少于Control组和M组小鼠(P0.05),而中央格停留时间显著多于Control组和M组小鼠(P0.05),MS和MSAL组小鼠血清ACTH含量显著高于M组(P0.05),提示慢性温和非预期应激成功模拟应激反应。(2)实验结束时,同Control组相比,M组、MS组和MSAL组小鼠毛发均发生不同程度的脱落,MS组与MSAL组严重程度近似,M组较轻;M组、MS组和MSAL组小鼠皮肤组织中出现大量炎性细胞聚集,Control组小鼠只有少量或者没有出现。(3)与Control组相比,M组、MS组和MSAL组小鼠皮肤组织中IFN-γ与TNF-α含量显著增高(P0.05),MS组和MSAL组小鼠皮肤组织中IFN-γ与TNF-α含量显著高于M组(P0.05)。(4)和Control组小鼠相比,M组、MS组和MSAL组小鼠皮肤组织中的血管密度显著降低(P0.05);和M组小鼠相比,MS组皮肤组织中的血管密度显著降低(P0.05);和MS组相比,MSAL组小鼠皮肤组织中的血管密度显著增高(P0.05)。(5)和Control组小鼠相比,M组、MS组和MSAL组小鼠皮肤组织中VEGF和BFGF的免疫组织化学染色得分显著降低(P0.05);和M组小鼠相比,MS组小鼠皮肤组织中VEGF和BFGF的免疫组织化学染色得分显著降低(P0.05);和MS组相比,MSAL组小鼠皮肤组织中VEGF的免疫组织化学染色得分显著增高(P0.05)。结论:1.外用咪喹莫特可以引起毛发脱落,显示成功建立小鼠斑秃模型。2.慢性温和非预期应激能较好地模拟机体应激反应。3.慢性温和非预期应激加重斑秃模型小鼠的毛发脱落,促进了小鼠皮肤组织免疫的进一步紊乱。4.慢性温和非预期应激导致了小鼠的微循环变化,造成皮肤组织的血管密度降低,血管生成相关因子VEGF和BFGF表达降低。5.前列地尔可以部分逆转慢性温和非预期应激对小鼠皮肤微循环的影响,但是没有明显改善小鼠毛发脱落现象。
【关键词】：慢性温和非预期应激 斑秃 IFN-γ TNF-α 微循环
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R758.71
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-14
• 一、心理应激与斑秃10-11
• 二、心理应激与皮肤的免疫紊乱和微循环变化11-12
• 三、C3H/HEJ鼠与斑秃12-13
• 四、研究思路13-14
• 第一部分 咪喹莫特诱导小鼠斑秃模型的建立14-21
• 一、试剂和仪器14-15
• 二、实验动物和分组15
• 三、实验方法15-16
• 四、实验结果16-19
• 五、讨论19-20
• 六、小结20-21
• 第二部分 慢性温和和非预期应激加重斑秃模型小鼠脱毛的机制探讨21-44
• 一、试剂和仪器21-22
• 二、实验动物和分组22-23
• 三、实验方法23-29
• 四、实验结果29-39
• 五、讨论39-43
• 六、小结43-44
• 结论和展望44-45
• 参考文献45-53
• 综述 心理应激对斑秃影响的相关机制探讨53-63
• 参考文献57-63
• 英文缩略词表63-64
• 攻读学位期间公开发表的论文64-65
• 致谢65-66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：1100699