论文一：糠酸莫米松乳膏和湿疡气雾剂联合外用治疗亚急性湿疹的疗效观察 论文二：砷致HaCaT细胞恶性转化相关微小RNA差异

发布时间：2017-10-28 01:24

  本文关键词：论文一：糠酸莫米松乳膏和湿疡气雾剂联合外用治疗亚急性湿疹的疗效观察 论文二：砷致HaCaT细胞恶性转化相关微小RNA差异表达的筛选验证及初步功能研究

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【摘要】：目的:通过临床实验观察糠酸莫米松乳膏和湿疡气雾剂联合外用对亚急性湿疹的治疗效果及使用的安全性。方法:此次临床观察所有研究对象全部来自2015年2月至2016年1月就诊于大连医科大学附属第一医院皮肤科门诊的患者,所有研究对象均符合亚急性湿疹的诊断标准,并且皮损总面积≤体表面积的10%。患者按就诊先后顺序随机分为两组,试验组接受糠酸莫米松乳膏与湿疡气雾剂联合治疗,对照组仅接受糠酸莫米松乳膏治疗。所有药物均按说明书推荐方法用药,糠酸莫米松乳膏每日1次,湿疡气雾剂每日4次,涂于患处。患者总共用药时间为2周,分别于就诊的当日、用药的第7天及用药第14天记录患者的临床表现、判断疗效并观察不良反应。治疗期间接受治疗者一旦达到临床治愈标准,即可停止继续用药。结果:本次研究总共70例研究对象,观察期间试验组1例失访,对照组5例失访。共计有效病例64例,试验组34例,对照组30例。患者年龄在20-69岁之间,平均年龄为(45.7±19.45)岁。其中男性35例,女性29例,治疗7天后,两组的平均SCORAD评分值较治疗前均有下降,但是两组下降程度无明显差异,并无统计学意义(P0.05)。治疗14天后,两组SCORAD评分值均进一步下降,进行组间比较,对照组和治疗组SCORAD评分差异不明显,无统计学意义(P0.05)。治疗第7天,对照组有效率70.0%,试验组有效率79.4%,两组有效率进行对比,差异无统计学意义(P0.05)。治疗第14天,对照组有效率76.6%,治疗组有效率94.1%,两者差异明显,有统计学意义(P0.05)。治疗过程中患者未出现严重不良反应。患者用药后,大多数自觉湿疡气雾剂的性质良好,使用方便,且大部分患者认为加用湿疡气雾剂后自己的皮损情况以及生活质量都得到了较为明显的改善。综上所述,本研究证实应用糠酸莫米松乳膏联合湿疡气雾剂和单纯使用糠酸莫米松乳膏治疗亚急性湿疹均有较理想的效果,联合治疗组比单一用药对照组治疗的有效率高。结论:1.糠酸莫米松乳膏联合湿疡气雾剂治疗亚急性湿疹疗效确切,比单纯使用糠酸莫米松乳膏治疗有效率高,可以缩短病程,避免长期应用激素引起不良反应。2.湿疡气雾剂有较好的安全性,患者依从性好,可在临床上进一步推广使用。背景:砷作为一种有毒物质在自然界中分布广泛,也是常见的饮用水污染物。慢性砷暴露会导致各种皮肤肿瘤,例如基底细胞癌、鳞状细胞癌、柱状细胞癌等。国外现有较多成熟的研究文献表明Ha Ca T细胞在浓度为100n M的三氧化二砷的持续作用下可导致细胞异常生长、增殖、克隆复制增多、形态异常改变而形成砷转化细胞(Arsenic-transformed cell,AS-TM细胞)。将AS-TM细胞注射于裸鼠体内可形成鳞状细胞癌。微小RNA(mi RNAs)是一类长约19—25个核苷酸的小分子非蛋白质编码RNA,其对基因表达的调节与控制主要通过调节对应m RNA的蛋白质翻译过程或与特定m RNA结合来完成,从而参与细胞的生长、分化、增殖、凋亡等过程。越来越多的研究表明,mi RNAs在肿瘤的发生发展中扮演着极其重要的角色。但mi RNAs异常表达与砷致Ha Ca T细胞恶性转化的关系,尚有待研究阐明。目的:本研究通过检测低剂量砷长期暴露Ha Ca T细胞过程中微小RNA的差异表达并对其初步功能进行研究,为进一步探讨mi RNAs在砷致皮肤癌发病机制中的作用提供理论依据。方法:1.用三氧化二砷持续培养Ha Ca T细胞制备AS-TM细胞,采用mi RNA芯片技术筛选差异表达的mi RNAs,用荧光定量PCR进行验证。2.化学合成mi R-181b-5p inhibitor、mi R-513a-5p mimics和各自阴性对照,通过Lipofectamin 2000转染试剂分别将模拟物、抑制物、阴性对照转染入AS-TM细胞。设立未转染细胞为空白对照组,其余转染细胞为mi R-513a-5p过表达组、mi R-181b-5p抑制组、过表达阴性对照组和抑制阴性对照组,细胞转染后24、48小时以Real-time PCR方法分别检测五组细胞内转染mi RNAs表达量的差异。3.通过细胞增殖实验(CCK8)、流式细胞术检测细胞凋亡率以及细胞周期来观察上调mi R-513a-5p和下调mi R-181b-5p表达对AS-TM细胞的生物学行为的影响。结果:1.基因芯片结果显示,与Ha Ca T细胞对比,AS-TM细胞存在26个差异表达的mi RNAs,上调12个,下调14个。荧光定量PCR验证了显著上调hsa-mir-6739-5p,hsa-mir-4521,hsa-mir-181b-5p,hsa-mir-100-5p,hsa-mir-3919,显著下调hsa-mir-513a-5p,与芯片检测结果一致。2.mi R-513a-5p mimics、mi R-181b-5p inhibitor和各自阴性对照能被高效转染入AS-TM细胞。通过mi R-513a-5p mimics转染AS-TM细胞可显著增强细胞内mi R-513a-5p的表达(P0.05),通过mi R-181b-5p inhibitor转染AS-TM细胞可有效抑制细胞内mi R-181b-5p的表达量(P0.05),转染各自阴性对照试剂的对照组和无转染空白对照组之间,相对应mi RNAs的表达量无统计学差异(P0.05)。3.CCK8实验及凋亡实验中,过表达组、抑制组与过表达阴性对照组、抑制阴性对照组和空白对照组之间细胞增殖、凋亡没有明显差异(P0.05);细胞周期实验中,抑制组与阴性对照组相比S期比例明显增加G2期比例明显减少差异有统计学意义(P0.05),而G1期没有明显变化(P0.05)。过表达组周期没有明显变化(P0.05)。结论:1.砷致Ha Ca T细胞恶性转化过程中伴随mi RNAs差异性表达,mi RNAs可能与砷致皮肤癌的发生、发展密切相关。2.mi R-181b-5p的下调可能影响AS-TM细胞的细胞周期。
【关键词】：湿疡气雾剂 糠酸莫米松乳膏 联合应用 亚急性湿疹 砷 Ha Ca T细胞 微小RNA 转染 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R758.23
【目录】：

• 糠酸莫米松乳膏和湿疡气雾剂联合外用治疗亚急性湿疹的疗效观察7-18
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-12
• 一、研究对象12
• 二、研究方法12-13
• 三、结果13-14
• 四、讨论14-16
• 结论16-17
• 参考文献17-18
• 砷致Ha Ca T细胞恶性转化相关微小RNA差异表达的筛选验证及初步功能研究18-38
• 中文摘要18-20
• 英文摘要20-23
• 前言23-24
• 研究材料和方法24-30
• 结果30-34
• 讨论34-36
• 参考文献36-38
• 综述38-46
• 参考文献44-46
• 致谢46-47

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本文编号：1106064