高表达OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1细胞能有效活化小鼠抗原提呈细胞

发布时间：2017-11-05 13:34

  本文关键词：高表达OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1细胞能有效活化小鼠抗原提呈细胞

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【摘要】：目的:在细胞水平上分析高表达OAZI-1的小鼠B16-F1细胞能否活化抗原提呈细胞,促进抗原提呈细胞对肿瘤的吞噬以及抗原递呈作用。方法:转染重组质粒后,用RT-PCR和Western blot技术筛选获得高表达OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1肿瘤细胞(B16/OAZI-1),同时构建转染空载体质粒p CDNA3.1(+)的小鼠黑色素瘤B16-F1肿瘤细胞(B16/3.1)用作实验对照。制备BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞、脾淋巴细胞和骨髓来源的树突状细胞(DC),将B16/OAZI-1和B16/3.1分别与小鼠腹腔巨噬细胞和DC按照1∶5和1∶1的细胞个数比例混合培养4 h,流式细胞术检测巨噬细胞和DC对肿瘤细胞的吞噬率。将B16/OAZI-1和B16/3.1分别与小鼠DC按照1∶5的细胞个数比例混合培养24 h后,流式细胞术检测DC表面分子CD40、CD80和CD86表达的变化。将经肿瘤细胞活化的DC与小鼠脾淋巴细胞混合培养24 h后,ELISA检测细胞上清中IFN-γ的含量。结果:巨噬细胞和DC对B16/OAZI-1细胞吞噬率分别为24.7%和53.9%,与B16/3.1细胞(8.2%和13.8%)相比有较显著性差异。与B16/3.1细胞相比,DC细胞与B16/OAZI-1细胞混合培养24 h后,成熟DC细胞表面分子标志CD40、CD80、CD86的表达分别从24.2%、20.8%和16.4%增加到46.8%、32.5%和36.1%(P0.05);经B16/OAZI-1细胞活化的DC与小鼠脾淋巴细胞混合培养后,细胞上清中IFN-γ的含量为32.9 pg/ml,与B16/3.1细胞处理的DC相比(15.1 pg/ml)有显著性差异(P0.05)。结论:高表达OAZI-1的肿瘤细胞能更有效地被巨噬细胞和DC细胞吞噬,且这一过程能诱导DC细胞成熟活化,成熟的DC细胞将肿瘤抗原递呈给T淋巴细胞并诱导T淋巴细胞活化,从而激活机体抗肿瘤免疫应答。
【作者单位】： 三峡大学分子生物学研究所;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81372265)
【分类号】：R739.5
【正文快照】： 多胺是广泛存在于生物组织中的一类带多价正电荷的脂肪族小分子化合物,高多胺含量是肿瘤快速生长所必需的条件之一[1]。鸟氨酸脱羧酶(Orni-thine decarboxylase,ODC)是多胺合成的限速酶,其活性对调节细胞内多胺水平起重要作用。细胞内同时存在一种ODC抑制蛋白,即鸟氨酸脱羧酶

【共引文献】

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【相似文献】

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本文编号：1144440