他扎罗汀与卤米松对角质形成细胞维A酸受体表达的影响

发布时间：2017-11-06 01:13

  本文关键词：他扎罗汀与卤米松对角质形成细胞维A酸受体表达的影响

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【摘要】：研究背景与目的皮肤是人体最大的器官,具有屏障、吸收、感觉及内分泌等重要功能,参与全身的多种功能活动和维持内环境的稳定,对机体的健康非常重要。角质形成细胞是皮肤之表皮的主要构成细胞,不但与表皮屏障功能正常发挥密切相关,还与多种皮肤病的病理生理学改变密切相关。核受体是机体内广泛存在并具有重要调节功能的一大类细胞内受体,迄今已发现一百余种核受体超家族成员。人们所熟知的糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptors,GRs)、维甲酸受体(Retinoic acid receptors,RARs)、维甲酸类X受体(Retinoid X receptors,RXRs)和维生素D3受体(Vitamin D3 receptors,VDRs)等均属于核受体超家族的范畴。核受体与各自相对应的反应元件相识别并结合,进而对靶基因进行转录调控,在机体发生发育和内环境稳态的过程中发挥重要作用。核受体在表皮中也有丰富的表达。众多研究表明核激素受体在皮肤中也发挥着至关重要的作用,如抑制表皮细胞增殖、调节角质形成细胞分化、促进细胞凋亡及参与炎症过程等。银屑病是皮肤科临床上常见的慢性、炎症性、复发性的皮肤疾病,以鳞屑性红斑、丘疹及斑块为主要临床特征,其病因及发病机制尚未完全明确。寻常型银屑病在病理上以表皮细胞过度增殖、异常分化等为主要特征。外用药物是轻中度寻常型银屑病的主要治疗手段。外用激素、维甲酸类药物、维生素D3衍生物以及上述药物的联合使用,已得到国内外银屑病治疗指南的肯定。糖皮质激素与维A酸均通过与其各自的受体结合而发挥药理效应,鉴于核受体超家族成员间可能存在着一定程度的相互影响,当外用激素与他扎罗汀联合治疗银屑病时,二者的治疗效应仅仅是简单的协同作用吗?糖皮质激素是否会对他汀罗汀的治疗效应产生影响呢?他扎罗汀的使用是否会引起角质形成细胞出现配基依赖的受体表达下调呢?针对上述问题,本实验以HaCaT角质形成细胞为研究对象,以表皮中表达量最高的维A酸受体RAR-γ和RXR-α为主要研究指标,观察不同浓度卤米松和他扎罗汀作用对角质形成细胞中RAR-γ和RXR-α表达的影响,以探讨卤米松对他扎罗汀治疗银屑病效应的可能影响。(9)基金项目:中华医学会皮肤性病学分会银屑病研究基金资助项目(张斌,2014年)研究方法与结果1.cell counting kit-8检测不同浓度卤米松、他扎罗汀、卤米松联合他扎罗汀对体外培养的人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)增殖的影响。结果发现,卤米松、他扎罗汀均能抑制角质形成细胞的增殖,呈浓度依赖性效应;卤米松联合他扎罗汀对角质形成细胞增殖能力的抑制效应强于单用他扎罗汀或(和)单用卤米松。2.Real-time PCR法检测不同浓度卤米松、他扎罗汀、卤米松联合他扎罗汀作用对体外培养人永生化角质形成细胞维A酸受体RAR-γ和RXR-α在mRNA表达的影响。结果发现,卤米松作用角质形成细胞后RAR-γ和RXR-α的mRNA表达量增加;他扎罗汀作用于角质形成细胞后,RAR-γ和RXR-α的mRNA表达量降低;卤米松联合他扎罗汀作用角质形成细胞后,RAR-γ和RXR-α的mRNA表达量12h增加,在24h RAR-γ和RXR-α的mRNA表达量却降低。3.Western Blot法检测不同浓度卤米松、他扎罗汀、卤米松联合他扎罗汀作用对体外培养人永生化角质形成细胞RAR-γ和RXR-α蛋白质表达的影响。结果发现,卤米松作用角质形成细胞后,RAR-γ和RXR-α的蛋白表达量均增加;他扎罗汀作用角质形成细胞12h后RAR-γ和RXR-α的蛋白表达量增加,而24h后RAR-γ和RXR-α的蛋白表达量降低;卤米松联合他扎罗汀作用,对角质形成细胞RAR-γ和RXR-α蛋白的表达无明显影响。结论1.第三代维A酸类药物他扎罗汀与强效激素卤米松均能抑制角质形成细胞的增殖。卤米松联合他扎罗汀对角质形成细胞增殖的抑制效应强于单独使用他扎罗汀或(和)单独使用卤米松。这为临床上联合使用卤米松与他扎罗汀治疗银屑病提供了实验依据。2.他扎罗汀作用于角质形成细胞后,可下调维A酸受体RAR-γ和RXR-α的表达。这提示他扎罗汀作用于角质形成细胞在短期内可能引发配体诱导的受体表达下调。3.卤米松作用角质形成细胞后,可上调维A酸受体RAR-γ和RXR-α表达。这提示卤米松上调维A酸受体表达的效应,在一定程度上可增强他扎罗汀对角质形成细胞的作用。4.卤米松联合他扎罗汀作用,对角质形成细胞RAR-γ和RXR-α蛋白的表达无明显影响。这为两者联合用药的可行性提供了一定的实验依据。
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R751

【参考文献】

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1 郑志忠;;寻常性银屑病的常用外用药物治疗[J];临床皮肤科杂志;2012年04期

2 郁博;何威;张斌;杨玲;吴军;;地塞米松对HaCaT细胞糖皮质激素受体α表达的影响[J];临床皮肤科杂志;2008年04期

3 楚瑞琦;彭振辉;谭升顺;王咏梅;丑广程;刘春梅;赵建伟;;他扎罗汀对培养角质形成细胞表达RAR和RXR mRNA的影响[J];中国皮肤性病学杂志;2008年01期

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本文编号：1146686