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肾上腺素能β2受体参与慢性应激诱导大鼠瘙痒机制研究

发布时间:2017-12-17 18:05

  本文关键词:肾上腺素能β2受体参与慢性应激诱导大鼠瘙痒机制研究


  更多相关文章: 慢性应激 瘙痒 交感神经系统 肾上腺素受体 β2受体


【摘要】:目的:1、明确慢性应激实验能否增加大鼠瘙痒的行为学表现。2、探讨慢性应激诱导大鼠瘙痒的分子机制。方法:1)慢性应激大鼠模型(HIS)的建立:三种不同应激源:45分钟4°C冷束缚,20分钟强迫游泳,1小时孤岛实验。重复三次进行连续九天应激实验模拟出慢性应激大鼠模型。在应激结束后第一天,第四天,第七天分别在大鼠一侧脸颊注射致痒剂5-HT(200μg)。2)大鼠脸颊瘙痒模型的建立:在大鼠脸颊皮内注射5-HT引发大鼠后肢搔抓的动作,记录注射后一小时内搔抓的次数可以反应瘙痒程度。3)毁损外周交感神经系统:采取胍乙啶(50mg/kg,ip)持续皮下注射12天毁损大鼠交感神经法,将大鼠分为胍乙啶+应激组,胍乙啶+未应激组,NS+应激组,观察不同组别在处理结束后大鼠对致痒原5-HT的瘙痒反应程度。4)通过药物干预,确定α,β受体中哪个受体参与到应激引起的大鼠瘙痒的病理过程中:α受体阻滞剂酚妥拉明,β受体阻滞剂普萘洛尔(10mg/kg)分别在应激大鼠与非应激大鼠中连续腹腔注射9天,第十天脸颊皮下注射5-HT,记录注射后1小时内不同组别的搔抓次数,明确哪个受体能够降低应激后瘙痒现象。5)确定相应的受体后,采取同样的方法确定是哪个受体的亚型参与这一过程,进一步采取同样方法利用受体激动剂是否能够模拟出应激引起的瘙痒现象。6)运用Western Blotting方法检测对照组和HIS模型大鼠皮肤组织中肾上腺素能β2受体以及TNF-α炎性因子表达情况。7)通过QPCR检查不同组别的皮肤炎症因子的表达程度:取应激组,非应激组,应激+药物干预组的大鼠非注射侧的脸颊皮肤,进行QPCR检测TNF-α,IL-1β,IL-6,NGF炎性因子的表达。结果:1)应激大鼠能够增加5-HT的致痒效果,且在应激结束后至少持续4天,在第7天,应激产生的瘙痒作用消失。2)胍乙啶系统性损毁外周儿茶酚胺的释放后,应激增加大鼠瘙痒的作用消失。3)普萘洛尔、布托沙明能够显著减轻应激增加的瘙痒程度,使用β2受体激动剂特布他林能够模拟出应激对瘙痒的增加程度。4)脸颊注射不同剂量的肾上腺素(E)与去甲肾上腺素(NE)(0.1μg,1μg,10μg),能够增加大鼠对5-HT的瘙痒程度,并且存在剂量关系。5)Western Blotting检测发现,在应激后大鼠皮肤组织中肾上腺素能β2受体以及TNF-α炎性因子表达量均明显增加。6)应激组中炎症因子(TNF-α,IL-1β,IL-6,NGF)的表达均升高。并且在使用β受体阻滞剂与β2受体阻滞剂的应激大鼠中,炎症因子有不同程度的降低,在NE与E组别的大鼠皮肤上,炎症因子有不同程度的增加,在β2受体激动剂的大鼠皮肤上能够显著增加TNF-α,IL-1β的表达量。结论:1)应激能够显著增加大鼠的瘙痒症状。2)交感系统参与到应激增加的瘙痒现象中,抑制交感肾上腺素系统释放E与NE能够显著减轻应激引起的瘙痒反应。3)β受体尤其是β2受体在应激增加的瘙痒中发挥重要作用。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R758.31

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