紫外线及黄芪甲苷对人皮肤成纤维细胞E3连接酶Hrd1表达的影响
本文关键词: 紫外线 人皮肤成纤维细胞 E连接酶 羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白 黄芪甲苷 出处:《临床皮肤科杂志》2014年04期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的:探讨紫外线(UV)对人皮肤成纤维细胞中E3连接酶Hrd1表达的影响及黄芪甲苷的干预作用。方法:分离培养人原代成纤维细胞,分别以10J/cm~2UVA和30mJ/cm~2 UVB进行照射,黄芪甲苷进行干预处理。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的黄芪甲苷对成纤维细胞增殖活性的影响;荧光定量PCR法检测成纤维细胞中Hrd1的mRNA表达;免疫组化法观察成纤维细胞Hrd1的蛋白表达。结果:MTT结果示:在适宜浓度下,黄芪甲苷对体外培养的成纤维细胞有显著的促增殖作用,药物浓度为10、20、30mg/L时最为明显(P0.001);荧光定量PCR结果示:UVA、UVB照射组成纤维细胞Hrd1 mRNA表达量明显高于正常对照组,而黄芪甲苷可显著抑制UV辐射后成纤维细胞中Hrd1的表达(P0.001);免疫组化结果示:UV照射(UVA或UVB)可增加Hrd1的蛋白表达,黄芪甲苷可显著抑制UV照射后成纤维细胞中Hrd1的蛋白表达。结论:UV辐射可以上调人皮肤成纤维细胞中E3连接酶Hrd1的表达,而黄芪甲苷对这一现象具有逆转作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of UV on the expression of E3 ligase Hrd1 in human skin fibroblasts and the effect of astragaloside A. methods: the primary fibroblasts were isolated and cultured and irradiated with 10 J / cm ~ (2) UVA and 30 mg / cm ~ (2) UVB, respectively. The effects of different concentrations of astragaloside on the proliferation of fibroblasts were detected by MTT colorimetry, and the mRNA expression of Hrd1 in fibroblasts was detected by fluorescence quantitative PCR. The expression of Hrd1 protein in fibroblasts was observed by immunohistochemistry. Results: under the appropriate concentration, astragaloside A could significantly promote the proliferation of fibroblasts cultured in vitro. The results of fluorescence quantitative PCR showed that the expression of Hrd1 mRNA was significantly higher than that of the normal control group when the concentration was 10 ~ 20 ~ 30 mg / L, and the results of fluorescence quantitative PCR showed that the expression of Hrd1 mRNA was significantly higher than that of the normal control group. Astragaloside A could significantly inhibit the expression of Hrd1 in the fibroblasts after UV irradiation, and the immunohistochemical results showed that the protein expression of Hrd1 was increased by WUV irradiation. Astragaloside A can significantly inhibit the expression of Hrd1 protein in fibroblasts after UV irradiation. Conclusion the expression of E3 ligase Hrd1 in human skin fibroblasts can be upregulated by 1: UV irradiation, and Astragaloside A can reverse this phenomenon.
【作者单位】: 南京医科大学第一附属医院皮肤性病科;南京医科大学代谢疾病研究中心;
【基金】:江苏省“六大人才高峰”基金(2008101)资助项目 江苏省中医药局科技基金(LZ11082)资助项目
【分类号】:R758.1
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