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维生素C对过氧化氢诱导人A375黑素瘤细胞氧化损伤的保护

发布时间:2016-11-03 18:39

  本文关键词:维生素C对过氧化氢诱导人A375黑素瘤细胞氧化损伤的保护,由笔耕文化传播整理发布。


《南华大学》 2015年

维生素C对过氧化氢诱导人A375黑素瘤细胞氧化损伤的保护

范英姬  

【摘要】:目的:观察维生素C对受H2O2氧化损伤后人A375黑素瘤细胞的抗氧化保护作用,为维生素C作为抗氧化剂治疗白癜风提供实验依据。方法:1.将100μmol/L、250μmol/L、500μmol/L的H2O2溶液分别处理人A375黑素瘤细胞1h、2h、4h后,用MTT比色法筛选最适浓度及时间建立H2O2损伤模型。2.予H2O2损伤模型用0.1μmol/ml、0.5μmol/ml、1.0μmol/ml、1.5μmol/ml、2.0μmol/ml、2.5μmol/ml、3.0μmol/ml、4.0μmol/ml、5.0μmol/ml的维生素C溶液处理12小时后,行MTT比色法筛选出最适实验浓度;用2.0μmol/ml维生素C处理H2O2损伤模型2h、6h、12h、24h、36h、48h后,同法筛选出最适实验时间。3.用终浓度为0.1μmol/ml、1.0μmol/ml、2.0μmol/ml、4.0μmol/ml的维生素C分别处理H2O2损伤模型6h、12h、24h、36h后,MTT比色法检测细胞增殖,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,Na OH裂解法测定黑素含量。结果:1.H2O2对人A375黑素瘤细胞带来氧化损伤,细胞发生形态学改变且增殖受抑制,损伤程度呈浓度依赖性。2.MTT结果显示:0.1μmol/ml、1.0μmol/ml、2.0μmol/ml、4.0μmol/ml四种浓度的维生素C加入后,细胞增殖水平高于H2O2损伤组,差异显著(P0.05);维生素C浓度为4μmol/ml、培养时间为12h时,A490值达最大(0.945±0.044)。3.流式细胞术结果显示:各维生素C实验组的细胞存活率呈浓度依赖性升高;早期凋亡率及晚期凋亡率逐渐下降,皆低于H2O2损伤组。4.Na OH裂解法结果显示:0.1μmol/ml、1.0μmol/ml、2.0μmol/ml、4.0μmol/ml四种浓度的维生素C可促进H2O2损伤后人A375黑素瘤细胞黑素合成的恢复,黑素含量高于H2O2损伤组,差异显著(P0.05);维生素C浓度为4μmol/ml、培养时间为12h时,A490值达最大(0.360±0.031)。结论:1.H2O2使人A375黑素瘤细胞产生氧化损伤,抑制人A375黑素瘤细胞增殖,诱导凋亡。2.一定浓度的维生素C可促进损伤后人A375黑素瘤细胞增殖及黑素合成的恢复,降低凋亡率。

【关键词】:
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R739.5
【目录】:

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本文编号:163436

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