谷氨酸信号通路在表皮细胞伪足形成及黑素小体转运中的作用研究

发布时间：2016-11-04 09:27

  本文关键词：谷氨酸信号通路在表皮细胞伪足形成及黑素小体转运中的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

《大连医科大学》 2012年

谷氨酸信号通路在表皮细胞伪足形成及黑素小体转运中的作用研究

王楠  

【摘要】：目的：探讨谷氨酸信号通路在黑素细胞及角质形成细胞伪足形成及黑素小体转运中的作用机制。 方法： 1原代培养并纯化黑素细胞、角质形成细胞。 2.扫描电镜观察离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)非竞争性拮抗剂地卓西平(dizocilpine，MK-801)，激动剂(N-Methy-D-aspartic acid, NMDA)作用下黑素细胞、角质形成细胞的伪足形态变化。以311nmUVB对黑素细胞伪足形态的影响的观察作为阳性对照。 3建立黑素细胞和角质形成细胞体外共培养体系；扫描电镜观察共培养体系下，MK801、NMDA作用后细胞伪足形态的变化。 4免疫荧光双染色，，激光共聚焦显微镜下观察MK801、NMDA对黑素小体的转运的调节作用。 结果： 1扫描电镜下观察发现黑素细胞在拮抗剂100μM MK801作用24h后黑素细胞树突末端明显变细、树突变长，细胞表面伪足数量明显变少，且伪足长度变短；激动剂100μM NMDA作用黑素细胞24h后发现细胞树突的末端明显变宽、树突变短，表面伪足数量明显增多，并且伪足长度变长。黑素细胞之间没有丝状伪足互相联系。角质形成细胞在100μM MK801、100μM NMDA作用24h后细胞形态及表面伪足较对照组无明显变化。 2.黑素细胞与角质形成细胞共培养体系中，黑素细胞与角质形成细胞间有丝状伪足相连接，黑素细胞上靠近角质形成细胞方向的丝状伪足数量多于反方向。 3.100μM MK801作用于共培养体系24h后，黑素细胞和角质形成细胞之间的丝状伪足连接数量及黑素细胞伸向角质形成细胞的丝状伪足数量减少；100μMNMDA作用于共培养体系24h，黑素细胞和角质形成细胞之间的丝状伪足连接数量及黑素细胞伸向角质形成细胞的丝状伪足数量增多。 4．共培养体系下，激光共聚焦显微镜观察NKI/BETEB抗体标记的黑素小体、细胞角蛋白14抗体标记的角质形成细胞，发现在角质形成细胞中存在黑素小体。经100μM MK801作用24h后角质形成细胞中的黑素小体数量减少，100μM NMDA作用24h后角质形成细胞中的黑素小体数量增多。且与黑素细胞不相邻的角质形成细胞中也发现黑素小体的存在。 结论： 1抑制谷氨酸受体NMDAR可使黑素细胞树突末端变窄、树突变长，黑素细胞表面的伪足数量减少、伪足长度变短；激动谷氨酸受体NMDAR可使黑素细胞树突末端变宽、树突变短，黑素细胞表面伪足数量增多、伪足长度增加。激动或抑制谷氨酸受体NMDAR对角质形成细胞影响不大。 2黑素细胞和角质形成细胞共培养体中，抑制谷氨酸受体NMDAR可以使黑素细胞和角质形成细胞之间的丝状伪足连接数量减少；激动谷氨酸受体NMDAR可以使黑素细胞和角质形成细胞之间的丝状伪足连接数量增多。 3抑制谷氨酸受体NMDAR可以使共培养体系中黑素小体的转运减少，激动谷氨酸受体NMDAR可以使共培养体系中黑素小体的转运增多。 4谷氨酸信号通路调节黑素细胞伪足形成进一步调节黑素小体转运。

【关键词】：
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R751
【目录】：

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