白藜芦醇对小鼠黑色素瘤RUNX3基因的作用及机制

发布时间：2018-04-03 12:56

  本文选题：白藜芦醇　切入点：黑色素瘤　出处：《华中科技大学》2012年硕士论文

【摘要】：第一部分：白藜芦醇对小鼠黑色素瘤B16F10细胞RUNX3的影响 目的：探讨RES对小鼠黑色素瘤细胞B16F10中RUNX3基因的作用及其机制。方法：小鼠黑色素瘤细胞B16F10，分为5组：对照组，低、中、高剂量RES组（20μM，40μM，80μM），阳性药物组[5-氮杂-2-脱氧胞苷（5-Aza-CdR），10μM]，孵育48h后，用RT-PCR和Western-blotting分别从基因水平和蛋白表达水平反映RUNX3的变化；用MSP法分析RUNX3启动子甲基化程度。结果：1）B16F10细胞中RUNX3表达缺失，5-Aza-CdR上调B16F10细胞的RUNX3基因和蛋白表达；2）给予RES干预后，其RUNX3基因和蛋白表达较对照组均有不同程度的上调，并且呈剂量依赖；3）B16F10细胞中RUNX3启动子处于甲基化状态，给予5-Aza-CdR处理后RUNX3启动子呈去甲基化状态，RES低、中、高三个剂量均可以使RUNX3启动子甲基化程度降低，且呈剂量依赖。 第二部分：白藜芦醇对C57BL小鼠荷黑色素瘤模型RUNX3的影响 目的：探讨RES对C57BL小鼠荷黑色素瘤模型中RUNX3基因的作用。方法：通过对C57BL小鼠皮下注射B16F10黑色素瘤细胞，建立皮下移植瘤模型。实验动物分为4组：模型对照组（10%CMC-Na），低、高剂量RES组（50、100mg/kg/d），连续灌胃21d；阳性药物[达卡巴嗪（DTIC），40mg/kg]组，腹腔注射每三天一次，共21d。末次给药后测量肿瘤体积和肿瘤组织重量，观察药物对肿瘤组织的抑制作用；用RT-PCR法检测外周血和肿瘤组织中RUNX3mRNA的相对表达；Western-blotting法测定RUNX3蛋白的相对含量。结果：1）在C57BL移植瘤模型中，低、高剂量RES和DTIC均可使肿瘤体积缩小，分别为对照组的0.83、0.59、0.27倍，其差异均有统计学意义（P0.05）；2）DTIC对外周血和肿瘤组织RUNX3基因、蛋白表达没有影响，，而RES低、高剂量可以不同程度上调外周血和肿瘤组织中RUNX3mRNA和蛋白的表达。 结论:RES上调小鼠黑色素瘤B16F10细胞及荷瘤小鼠RUNX3基因表达。RES通过去甲基化作用影响RUNX3表达，可能是RES抑制黑色素瘤的机制之一。
[Abstract]:The first part: the effect of resveratrol on RUNX3 of mouse melanoma B16F10 cellsAim: to investigate the effect and mechanism of RES on RUNX3 gene in B16F10 of mouse melanoma cells.鏂规硶:灏忛紶榛戣壊绱犵槫缁嗚優B16F10,鍒嗕负5缁

本文编号：1705286