人源性抗bFGF抗体抑制人黑色素瘤生长的作用研究

  本文关键词：人源性抗bFGF抗体抑制人黑色素瘤生长的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

·578·免疫学杂志2013年7月第29卷第7期IMMUNOLOGICALJOURNALVol.29No.7Jul.2013

[文章编号]1000-8861（2013）07-0578-05

·论著·

人源性抗bFGF抗体抑制人黑色素瘤生长的作用研究

杜超超，亢中奎，陈文慧，潘

[摘

磊，宋其芳，王宏，黄建芳，邓宁*

要]目的研究人源性抗bFGF抗体对人黑色素瘤A375细胞的体内外增殖抑制作用。方法体外培养人黑色素瘤A375

细胞，CCK-8法检测人源性抗bFGF抗体对A375细胞增殖的影响；Westernblot检测人源性抗bFGF抗体对bFGF下游信号通路中ERK1/2磷酸化的影响；建立裸鼠皮下移植瘤模型，通过记录各处理组裸鼠皮下移植瘤的体积、质量及裸鼠体质量变化，研究人源性抗bFGF抗体在体内对人黑色素瘤生长的抑制作用；免疫组化检测肿瘤组织内的微血管密度。结果CCK-8实验结果表明人源性抗bFGF抗体能抑制A375细胞的生长，在800ng/ml的质量浓度下，抑制率为24%；Westernblot结果表明人源性抗bFGF抗体显著抑制FGFR下游信号通路中ERK1/2的磷酸化；裸鼠体内试验中，人源性抗体明显抑制了肿瘤的生长，抑制率为28.12%。免疫组化结果显示各组肿瘤组织中微血管密度均有下降。结论该株人源性抗体在体外可有效的抑制人黑色素瘤细胞的生长，并能在体内抑制肿瘤生长及血管新生。

[关键词]黑色素瘤；碱性成纤维细胞生长因子；人源性抗体[中图分类号]R739.5

[文献标识码]A

Theeffectofhumanantibodyagainstbasicfibroblastgrowthfactoronthegrowthofhumanmelanoma

ＤＵＣｈａｏｃｈａｏ，ＫＡＮＧＺｈｏｎｇｋｕｉ，ＣＨＥＮＷｅｎｈｕｉ，ＰＡＮＬｅｉ，ＳＯＮＧＱｉｆａｎｇ，ＷＡＮＧＨｏｎｇ，ＨＵＡＮＧＪｉａｎｆａｎｇ，ＤＥＮＧＮｉｎｇ＊GuangdongProvincialKeyLaboratoryofMolecularImmunologyandAntibodyEngineering,JinanUniversity,Guangzhou510632,China

*CorrespondingAuthor:DENGNing,E-mail:tdengn@

[Abstract]Thisstudydesignedtoinvestigatetheinhibitoryeffectsofhumananti-bFGFantibodyonhumanmelanomainvitroandinvivo.Firstlytheproliferationinhibitionofhumanmelanomacellsbyhumananti-bFGFantibodywasanalyzedbyCCK-8,andthephosphorylationlevelofERKwasdetectedbyWesternblot.Xenograftnudemousemodelwasestablishedtostudytheinhibitoryeffectsofhumananti-bFGFantibodyonmelanomainvivo;microvesseldensity(MVD)ofthetumortissuewasanalyzedbyimmunohistochemistry.Theresultsoftheproliferationinhibitionshowedthattheproliferationofmelanomacellscouldbeinhibitedbyhumananti-bFGFantibody,andtheinhibitionratewasabout24%attheantibodyconcentrationof800ng/ml;WesternblottingresultsshowedthatERK1/2phosphorylationwasinhibitedbyhumananti-bFGFantibody,whichdemonstratedthathumananti-bFGFantibodycouldinhibittheproliferationoftumorcellsbyinhibitingtheERKsignalpathway.Thetumorxenograftsnudemicemodelshowedthathumananti-bFGFantibodycouldinhibitthetumorgrowthinvivo,andtheinhibitionratewasabout28.12%.Furthermore,themicrovessledensityoftumortissuewasdecreasedobviously.Theseresultsdemonstratedthathumananti-bFGFantibodycouldinhibittheproliferationofhumanmelanomacellinvitroandinhibittumorgrowthandangiogenesisinvivo.

[Keywords]Melanoma;Basicfibroblastgrowthfactor;Humanantibody

碱性成纤维细胞生长因子（basicfibroblast

性、分化等[2]。bFGF在多种肿瘤组织中高表达，是一个重要的促生长因子和促血管新生因子，在细胞增殖和血管新生的各个环节发挥作用[3-5]。bFGF是人黑色素瘤细胞的一个组成性表达的细胞因子[6]，Rodeck等检测到bFGF、PDGF-A、PDGF-B、TGF-β、TGF-α、

growthfactor,bFGF）是一种重要的多肽生长因子[1]，参

与调解多种细胞活动包括细胞增殖、细胞迁移、趋药

基金项目：国家863项目（2009AA02Z112）；中央高校基本科研业务费专项资金（21612112）；国家自然科学基金青年基金项目（81202449）；广东省科技计划项目（2012B010300016）

作者单位：510632广州，暨南大学抗体工程研究中心广东省分子免疫与抗体工程重点实验室

melanomagrowth-stimulatingactivity(MGSA)等细胞因子mRNA在黑色素瘤细胞系中稳定转录，而在正常

的生成黑色素细胞中则未检测到。每个细胞系都有

*通信作者：邓宁，Tel：020-85223259，E-mail：tdengn@

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