人着色性干皮病基因D对HepG2细胞Mdm2和Mdm4表达的影响

发布时间：2018-05-18 00:31

  本文选题：着色性干皮病基因D + HepG细胞　； 参考：《中国病理生理杂志》2014年01期

【摘要】：目的:探讨人剪切修复基因着色性干皮病基因D(xeroderma pigmentosum D,XPD)对肝癌细胞鼠双微体2(murine double minute 2,Mdm2)和鼠双微体4(murine double minute 4,Mdm4)表达的影响。方法:用脂质体转染法将重组质粒pEGFP-N2/XPD和空载质粒pEGFP-N2转染进入人肝癌细胞株HepG2,实验分为3组:(1)空白对照组;(2)pEGFP-N2组;(3)pEGFP-N2/XPD组。用MTT法观察细胞的增殖活力;用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;用RT-PCR和Western blotting检测XPD、Mdm2、Mdm4和P53表达量的变化。结果:MTT结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染抑制了肝癌细胞的增殖活力;流式细胞术结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染引起了G1期细胞增加,S期减少,凋亡率增加。RT-PCR和Western blotting检测发现,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染使得XPD表达增高,同时使得Mdm2和Mdm4表达降低,P53表达增高。结论:XPD能下调肝癌细胞中Mdm2和Mdm4的表达,上调P53表达,并能抑制肝癌细胞增殖及诱导其凋亡。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of human shearing repair gene (D(xeroderma pigmentosum DX PDD) on the expression of 2(murine double minute _ 2 (Mdm2) and 4(murine double minute _ 4 (Mdm4) in hepatoma cells. Methods: recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD and empty plasmid pEGFP-N2 were transfected into human hepatoma cell line HepG2 by liposome transfection. The proliferative activity was observed by MTT assay, the cell cycle and apoptosis rate were detected by flow cytometry, and the expression of Mdm4 and p53 were detected by RT-PCR and Western blotting. Results the transfection of recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD inhibited the proliferative activity of hepatoma cells, and the flow cytometry showed that the transfection of recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD resulted in the increase of S phase and the increase of apoptosis rate. RT-PCR and Western blotting analysis showed that the transfection of recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD inhibited the proliferation of hepatoma cells. The transfection of recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD increased the expression of XPD and decreased the expression of Mdm2 and Mdm4. Conclusion: XPD can down-regulate the expression of Mdm2 and Mdm4, upregulate p53 expression, inhibit the proliferation and induce apoptosis of HCC cells.
【作者单位】： 南昌大学第二附属医院消化内科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81300348) 江西省教育厅科学技术研究项目(No.GJJ13158)
【分类号】：R758.58

【参考文献】

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本文编号：1903579