体外培养的人恶性黑色素瘤球体细胞干细胞特性观察
本文选题:黑色素瘤 + 肿瘤干细胞 ; 参考:《山东医药》2016年19期
【摘要】:目的观察体外培养的人恶性黑色素瘤球体细胞的干细胞特性。方法利用无血清培养基培养人恶性黑色素瘤A375细胞系,获得黑色素瘤球体细胞(球体组)和普通贴壁细胞(贴壁组)。采用Transwell小室检测两组细胞迁移能力。采用免疫荧光法检测两组细胞中的CD20、CD133。取BALB/c小鼠16只,分实验组和对照组(各8只),于小鼠肩胛骨处皮下分别注射球体组、贴壁组细胞各1 m L(10~4个细胞),观察并比较两组细胞致瘤能力。6周后处死小鼠,取瘤。结果 A375细胞接种于无血清培养基后,可见小的类圆形悬浮细胞球形成并逐渐变大,球内细胞连接紧密,折光性好。球体组细胞迁移能力及细胞中CD20、CD133表达强度均高于贴壁组。注射细胞6周后,实验组小鼠均长出较大肿瘤,对照组小鼠均未见肿瘤生长。取实验组小鼠的肿瘤组织行HE染色,病理诊断为恶性黑色素瘤。结论体外培养的人恶性黑色素瘤球体细胞具有干细胞特性,迁移能力和致瘤能力强,高表达免疫标记CD20、CD133,恶性黑色素瘤存在肿瘤干细胞。
[Abstract]:Objective to observe the stem cell characteristics of human malignant melanoma cells cultured in vitro. Methods Human malignant melanoma cell line A375 was cultured in serum-free medium and the spherical melanoma cells (spherical group) and common adherent cells (adherent group) were obtained. The migration ability of the two groups was measured by Transwell chamber. CD20 and CD133 were detected by immunofluorescence assay. Sixteen BALB/c mice were divided into experimental group (n = 8) and control group (n = 8). The mice were injected subcutaneously into the shoulder scapula of the experimental group and the adherent group were injected with 10 ~ 4 cells respectively. The tumorigenic ability of the two groups was observed and compared. After 6 weeks, the mice were killed and the tumor was removed. Results after A375 cells were inoculated in serum-free medium, the small round suspension cell spheres were formed and gradually enlarged, the cells in the spheres were closely connected, and the refraction was good. The cell migration ability and the expression of CD20 + CD133 in the spherical group were higher than those in the adherent group. After 6 weeks of injection, the mice in the experimental group all developed large tumors, while the control mice did not see the tumor growth. The tumor tissues of the experimental group were stained with HE and diagnosed as malignant melanoma by pathology. Conclusion the cultured human malignant melanoma corpuscle cells have the characteristics of stem cells, strong ability of migration and tumorigenesis, high expression of CD20 and CD133. malignant melanoma has tumor stem cells.
【作者单位】: 南昌大学第一附属医院;
【基金】:江西省科技支撑计划项目(2010BSA14600)
【分类号】:R739.5
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