自噬在紫草素诱导人A375黑素瘤细胞凋亡中的作用

发布时间：2016-12-07 13:29

  本文关键词：自噬在紫草素诱导人A375黑素瘤细胞凋亡中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

《扬州大学》 2014年

自噬在紫草素诱导人A375黑素瘤细胞凋亡中的作用

刘国华  

【摘要】：目的： 1、检测紫草素及自噬抑制剂3-MA预处理后紫草素在体外对人A375黑素瘤细胞增殖影响 2、研究紫草素诱导人A375黑素瘤细胞自噬产生以及通过应用3-MA抑制自噬后探讨自噬在紫草素诱导人A375黑素瘤细胞凋亡中的作用。 方法： 1、WST-1法检测紫草素及自噬抑制剂3-MA预处理后紫草素对人A375黑素瘤细胞增殖的影响 2、形态学观察紫草素联合3-MA对人A375黑素瘤细胞生长的影响 3、Western blot法检测紫草素联合3-MA对人A375黑素瘤细胞自噬相关蛋白Beclinl和LC3B及凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响 结果： 1、增殖试验结果显示,不同浓度(0.1μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml、1.5μg/ml、2.0μg/ml、2.5μg/ml)的紫草素均对A375细胞均产生了抑制作用,抑制作用呈现出时间和浓度的依赖性。3-MA抑制自噬后,紫草素对A375细胞生长抑制率增加。 2、倒置相差显微镜下观察,与未处理组相比,紫草素组以及紫草素+3-MA组的A375肿瘤细胞培养基液面细胞碎片增多,细胞数目减少、萎缩变圆,发生明显凋亡,并且紫草素+3-MA组凋亡比紫草素组凋亡更加明显。 3、Western blot检测自噬相关蛋白显示,与对照组相比,紫草素组自噬相关蛋白的表达明显升高,表明紫草素诱导A375细胞自噬产生。 4、Western blot检测结果显示,抑制自噬可促进紫草素诱导的A375细胞凋亡相关蛋白Caspase-3的表达。 结论： 紫草素可诱导人A375黑素瘤细胞产生自噬；紫草素和3-MA联合用药可增加人A375黑素瘤细胞凋亡。紫草素诱导人A375黑素瘤细胞凋亡的过程中自噬起到保护作用,3-MA特异性抑制自噬后可增强紫草素诱导的人A375黑素瘤细胞的凋亡。本研究为今后以自噬为切入点,通过调控自噬来改善抗肿瘤药物的疗效提供了新的思路。

【关键词】：
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.5
【目录】：

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