人皮肤成纤维细胞衰老过程中表观遗传学相关基因表达的初步研究

发布时间：2018-07-01 16:49

  本文选题：表观遗传学 + 成纤维细胞　； 参考：《中南大学》2010年硕士论文

【摘要】： 目的探讨多种表观遗传学相关基因在人皮肤成纤维细胞自然衰老和氧化应激诱导衰老过程中的表达差异及意义。 方法提取年轻组(16岁以下)及衰老组(55岁以上)人皮肤成纤维细胞中总RNA(自然衰老模型)及亚致死量H2O2处理诱导衰老组与未处理年轻对照组人皮肤成纤维细胞总RNA(氧化应激诱导衰老模型),分别通过逆转录合成cDNA,利用倍比稀释法建立表观遗传性相关催化酶基因EZH2、Bmi-1、JMJD3、DNMT1、MLL1和内参基因β-actin的标准曲线,选用104浓度梯度进行实时荧光定量PCR检测其基因表达水平的差异。 结果在各实验组中,PCR产物的浓度在(1.0×10-2)-(1.0×10-7)范围时,上述目的基因与内参基因均得到一条平滑的扩增曲线,模板浓度与可检测的荧光信号的循环数之间呈负相关。在自然衰老模型和氧化应激诱导衰老模型中,衰老组的EZH2、Bmi-1及DNMT1基因表达水平要显著低于年轻组(P0.05),JMJD3、MLL1无明显差异(P0.05)。 结论EZH2、Bmi-1及DNMT1基因在人皮肤成纤维细胞衰老过程中含量逐渐下降,在皮肤成纤维细胞衰老过程中起到重要的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the expression differences and significance of several epigenetic related genes in natural senescence of human skin fibroblasts and oxidative stress induced senescence. Methods Total RNA (natural aging model) of human skin fibroblasts was extracted from young group (under 16 years old) and senescent group (over 55 years old), and the total number of human skin fibroblasts in aging group and untreated control group was induced by H2O2. RNA (oxidative stress induced senescence model) was used to synthesize cDNAs by reverse transcription, and the standard curves of EZH2Bmi-1, JMJD3DNMT1MLL1 and 尾 -actin were established by double dilution method. The difference of gene expression level was detected by real-time fluorescence quantitative PCR with 104 concentration gradient. Results when the concentration of PCR products was in the range of (1.0 脳 10 ~ (-2)-(1.0 脳 10 ~ (-7), a smooth amplification curve was obtained between the target gene and the internal reference gene, and there was a negative correlation between the template concentration and the cycle number of the detectable fluorescence signal. In natural senescence model and oxidative stress induced senescence model, the expression levels of EZH2OBmi-1 and DNMT1 gene in aging group were significantly lower than those in young group (P0.05) and JMJD3MLL1 had no significant difference (P0.05). Conclusion EZH2 Bmi-1 and DNMT1 genes decrease gradually during the senescence of human skin fibroblasts and play an important role in the process of skin fibroblast senescence.
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R751

【共引文献】

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本文编号：2088425