一种荧光定量PCR方法检测血液标本中梅毒螺旋体的应用研究

发布时间：2018-12-19 20:40

【摘要】：目的建立基于TpN17基因检测血液中梅毒螺旋体的荧光定量PCR方法。方法根据梅毒螺旋体TpN17基因保守区域设计引物,构建质粒标准品pTpN17,优化定量PCR反应体系检测该体系的灵敏度和特异性;同时,采用该方法对梅毒确证阳性的血液样本进行检测。结果研究表明,基于TpN17基因的SYBR GREEN荧光定量PCR方法可以有效检测血液中106~101copies/μL的梅毒螺旋体并通过熔解曲线判定结果的特异性。结论以TpN17基因为扩增目的基因的SYBR GREEN荧光定量PCR方法具有灵敏快速便宜的特点,适用于在血液检测梅毒螺旋体,能广泛应用于献血及血液样本检测等领域,提高我国的血液安全。
[Abstract]:Objective to establish a fluorescence quantitative PCR method based on TpN17 gene for detection of Treponema pallidum in blood. Methods primers were designed according to the conserved region of TpN17 gene of Treponema pallidum, and the sensitivity and specificity of the system were determined by constructing the plasmid standard pTpN17, to optimize the quantitative PCR reaction system. At the same time, the method was used to detect syphilis positive blood samples. The results showed that SYBR GREEN quantitative PCR method based on TpN17 gene could effectively detect 106~101copies/ 渭 L Treponema pallidum in blood and determine the specificity of the result by melting curve. Conclusion the method of SYBR GREEN fluorescence quantitative PCR with TpN17 gene as the amplification target gene is sensitive, rapid and cheap. It is suitable for the detection of Treponema pallidum in blood, and can be widely used in blood donation and blood sample detection. Improve blood safety in our country.
【作者单位】： 泸州医学院形态实验室;泸州医学院生物医学工程系;重庆市北碚区中医院重症医学科;
【分类号】：R446.11;R759.1

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2387423