土茯苓粗提物对11种黑素细胞株增殖和凋亡的影响
发布时间：2019-10-04 04:50
【摘要】：目的:观察土茯苓提取物(rhizoma smilacis glabrae extract,RSGE)对黑素细胞株增殖的抑制作用,并探讨其机制。方法:CCK8法观察RSGE对黑素细胞株及正常人黑素细胞活性影响;流式细胞仪检测RSGE对细胞凋亡及周期的影响;采用反转录(RT)-PCR法检测黑素瘤A2058、HT-144等11种细胞株和正常人黑素细胞中c-kit m RNA表达情况;western blot法检测RSGE对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、c-kit等蛋白的影响;real-time PCR法检测RSGE对c-kit基因转录水平的影响。结果:RSGE对c-kit m RNA高表达黑素细胞株A2058增殖的抑制作用强于低表达株HT-144,RSGE处理A2058细胞24 h半抑制浓度(IC50)为(10.55±0.29)g/L;对正常人黑素细胞生长无影响。结论:RSGE通过抑制c-kit基因表达,诱导黑素细胞凋亡,从而发挥抗癌作用。
【图文】：
临床皮肤科杂志2016年45卷第3期JClinDermatol,March2016,Vol．45,No．32结果2.1RSGE对不同黑素瘤细胞株增殖抑制影响RSGE0g/L、1g/L、2g/L、5g/L、10g/L及20g/L作用于黑素瘤细胞株12、24和48h后均具有剂量时间依赖性增殖抑制作用（图1）。RSGE对A2058、A375.S2、B16和WM-266-4细胞增殖抑制作用明显强于HT-144、SK-mel-1、SK-mel-2、WM-115和UACC-62；RSGE对正常人黑素细胞生长无明显抑制作用。通过SPSS软件计算得出RSGE对黑素瘤A2058细胞24h的IC50为（10.55±0.295）g/L，对HT-144细胞的IC50为（21.95±1.345）g/L；比较两组IC50值，差异有统计学意义（P<0.01）。黑素瘤化疗药物达卡巴嗪（DTIC）对A2058细胞24h的IC50值为（1.89±0.514）g/L（表3）。20g/L为RSGE相对耐受的HT-144细胞IC50值，敏感株A2058IC50值的2倍，此浓度值对两株细胞皆有效，所以以下针对20g/LRSGE进行实验。2.2RSGE诱导A2058细胞凋亡20g/LRSGE处理正常人黑素细胞及黑素瘤细胞24h后，通过流式细胞仪检测正常人黑素细胞、黑素瘤细胞株HT-144的亚G1凋亡峰比例分别为（2.33±0.325）%、（2.55±0.014）%；A2058细胞株无药物处理组亚G1凋亡峰比例为（6.64±1.047）%，1g/LDTIC处理组为（15.85±3.479）%，20g/LRSGE处理组为（59.80±3.246）%（图2）。A2058细胞株RSGE处理组与正常人黑素细胞、HT-144细胞株RSGE处理组和A2058细胞株无药物处理组比较亚G1期细胞比例均有显著性升高（P<0.001）。RSGE可诱导A2058细胞株凋亡。20g/LRSGE处理黑素瘤细胞A2058细胞株12、24、48h后，亚G1凋亡峰比例分别为（39.80±3.246）%，（54.80±3.825）%和（64.30±1.704）%（图2）。RSGE诱导黑素瘤A2058细胞株凋亡呈时间依赖性。2.3不同黑素瘤细胞株c-k
临床皮肤科杂志2016年45卷第3期JClinDermatol,March2016,Vol．45,No．32结果2.1RSGE对不同黑素瘤细胞株增殖抑制影响RSGE0g/L、1g/L、2g/L、5g/L、10g/L及20g/L作用于黑素瘤细胞株12、24和48h后均具有剂量时间依赖性增殖抑制作用（图1）。RSGE对A2058、A375.S2、B16和WM-266-4细胞增殖抑制作用明显强于HT-144、SK-mel-1、SK-mel-2、WM-115和UACC-62；RSGE对正常人黑素细胞生长无明显抑制作用。通过SPSS软件计算得出RSGE对黑素瘤A2058细胞24h的IC50为（10.55±0.295）g/L，对HT-144细胞的IC50为（21.95±1.345）g/L；比较两组IC50值，差异有统计学意义（P<0.01）。黑素瘤化疗药物达卡巴嗪（DTIC）对A2058细胞24h的IC50值为（1.89±0.514）g/L（表3）。20g/L为RSGE相对耐受的HT-144细胞IC50值，敏感株A2058IC50值的2倍，此浓度值对两株细胞皆有效，所以以下针对20g/LRSGE进行实验。2.2RSGE诱导A2058细胞凋亡20g/LRSGE处理正常人黑素细胞及黑素瘤细胞24h后，通过流式细胞仪检测正常人黑素细胞、黑素瘤细胞株HT-144的亚G1凋亡峰比例分别为（2.33±0.325）%、（2.55±0.014）%；A2058细胞株无药物处理组亚G1凋亡峰比例为（6.64±1.047）%，1g/LDTIC处理组为（15.85±3.479）%，，20g/LRSGE处理组为（59.80±3.246）%（图2）。A2058细胞株RSGE处理组与正常人黑素细胞、HT-144细胞株RSGE处理组和A2058细胞株无药物处理组比较亚G1期细胞比例均有显著性升高（P<0.001）。RSGE可诱导A2058细胞株凋亡。20g/LRSGE处理黑素瘤细胞A2058细胞株12、24、48h后，亚G1凋亡峰比例分别为（39.80±3.246）%，（54.80±3.825）%和（64.30±1.704）%（图2）。RSGE诱导黑素瘤A2058细胞株凋亡呈时间依赖性。2.3不同黑素瘤细胞株c-k
【作者单位】： 汕头市皮肤性病防治院皮肤科;汕头市妇幼保健院门诊部;汕头市中医药技工学校生物化学教研室;
【分类号】：R739.5
本文编号：2545756
【图文】：
临床皮肤科杂志2016年45卷第3期JClinDermatol,March2016,Vol．45,No．32结果2.1RSGE对不同黑素瘤细胞株增殖抑制影响RSGE0g/L、1g/L、2g/L、5g/L、10g/L及20g/L作用于黑素瘤细胞株12、24和48h后均具有剂量时间依赖性增殖抑制作用（图1）。RSGE对A2058、A375.S2、B16和WM-266-4细胞增殖抑制作用明显强于HT-144、SK-mel-1、SK-mel-2、WM-115和UACC-62；RSGE对正常人黑素细胞生长无明显抑制作用。通过SPSS软件计算得出RSGE对黑素瘤A2058细胞24h的IC50为（10.55±0.295）g/L，对HT-144细胞的IC50为（21.95±1.345）g/L；比较两组IC50值，差异有统计学意义（P<0.01）。黑素瘤化疗药物达卡巴嗪（DTIC）对A2058细胞24h的IC50值为（1.89±0.514）g/L（表3）。20g/L为RSGE相对耐受的HT-144细胞IC50值，敏感株A2058IC50值的2倍，此浓度值对两株细胞皆有效，所以以下针对20g/LRSGE进行实验。2.2RSGE诱导A2058细胞凋亡20g/LRSGE处理正常人黑素细胞及黑素瘤细胞24h后，通过流式细胞仪检测正常人黑素细胞、黑素瘤细胞株HT-144的亚G1凋亡峰比例分别为（2.33±0.325）%、（2.55±0.014）%；A2058细胞株无药物处理组亚G1凋亡峰比例为（6.64±1.047）%，1g/LDTIC处理组为（15.85±3.479）%，20g/LRSGE处理组为（59.80±3.246）%（图2）。A2058细胞株RSGE处理组与正常人黑素细胞、HT-144细胞株RSGE处理组和A2058细胞株无药物处理组比较亚G1期细胞比例均有显著性升高（P<0.001）。RSGE可诱导A2058细胞株凋亡。20g/LRSGE处理黑素瘤细胞A2058细胞株12、24、48h后，亚G1凋亡峰比例分别为（39.80±3.246）%，（54.80±3.825）%和（64.30±1.704）%（图2）。RSGE诱导黑素瘤A2058细胞株凋亡呈时间依赖性。2.3不同黑素瘤细胞株c-k
临床皮肤科杂志2016年45卷第3期JClinDermatol,March2016,Vol．45,No．32结果2.1RSGE对不同黑素瘤细胞株增殖抑制影响RSGE0g/L、1g/L、2g/L、5g/L、10g/L及20g/L作用于黑素瘤细胞株12、24和48h后均具有剂量时间依赖性增殖抑制作用（图1）。RSGE对A2058、A375.S2、B16和WM-266-4细胞增殖抑制作用明显强于HT-144、SK-mel-1、SK-mel-2、WM-115和UACC-62；RSGE对正常人黑素细胞生长无明显抑制作用。通过SPSS软件计算得出RSGE对黑素瘤A2058细胞24h的IC50为（10.55±0.295）g/L，对HT-144细胞的IC50为（21.95±1.345）g/L；比较两组IC50值，差异有统计学意义（P<0.01）。黑素瘤化疗药物达卡巴嗪（DTIC）对A2058细胞24h的IC50值为（1.89±0.514）g/L（表3）。20g/L为RSGE相对耐受的HT-144细胞IC50值，敏感株A2058IC50值的2倍，此浓度值对两株细胞皆有效，所以以下针对20g/LRSGE进行实验。2.2RSGE诱导A2058细胞凋亡20g/LRSGE处理正常人黑素细胞及黑素瘤细胞24h后，通过流式细胞仪检测正常人黑素细胞、黑素瘤细胞株HT-144的亚G1凋亡峰比例分别为（2.33±0.325）%、（2.55±0.014）%；A2058细胞株无药物处理组亚G1凋亡峰比例为（6.64±1.047）%，1g/LDTIC处理组为（15.85±3.479）%，，20g/LRSGE处理组为（59.80±3.246）%（图2）。A2058细胞株RSGE处理组与正常人黑素细胞、HT-144细胞株RSGE处理组和A2058细胞株无药物处理组比较亚G1期细胞比例均有显著性升高（P<0.001）。RSGE可诱导A2058细胞株凋亡。20g/LRSGE处理黑素瘤细胞A2058细胞株12、24、48h后，亚G1凋亡峰比例分别为（39.80±3.246）%，（54.80±3.825）%和（64.30±1.704）%（图2）。RSGE诱导黑素瘤A2058细胞株凋亡呈时间依赖性。2.3不同黑素瘤细胞株c-k
【作者单位】： 汕头市皮肤性病防治院皮肤科;汕头市妇幼保健院门诊部;汕头市中医药技工学校生物化学教研室;
【分类号】：R739.5
本文编号：2545756
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