特应性皮炎的屏障功能与filaggrin基因突变及客观评估的研究

发布时间：2020-03-26 22:29

【摘要】： 前言 特应性皮炎(atopic dermatitis,AD),是一种与遗传有关的,复杂的、慢性炎症性皮肤功能紊乱的皮肤病,其发病机制及临床表现复杂。中间丝相关蛋白是皮肤屏障功能的一个重要蛋白。最近研究表明位于编码中间丝相关蛋白(filaggrin,FLG)基因上的突变是欧洲家族鱼鳞病(ichthyosis vulgaris,IV)的一个致病因素,也是特应性皮炎的一个重要的易感因素。FLG突变引起的表达的缺失或减少影响皮肤的屏障功能。AD的临床评估有多个评分系统,SOCRAD评分方法是目前对于AD的一个常用的临床评分方法,主要的评估标准是依靠我们主观上对皮损严重性和累积范围的判定。objective severity assessment of atopic dermatitis(OSAAD)评分是近年来发展起来的AD评估标准,主要组成为用客观的测量方法评估表皮的屏障功能,测量表皮水分含量,油脂含量和PH值,和用非侵袭性的生物工程学方法和计算机辅助计算评估疾病的严重程度。OSAAD评分方法避免了SCORAD评分方法的主观性的缺点。 目的 本实验通过对中国人群AD患者的FLG多态性的研究,讨论FLG突变与AD发生的相关性及与AD患者表皮屏障功能的相关性。并通过对正常人和AD患者的表皮水分、油脂含量及PH值的检测,探讨表皮水分、油脂含量及PH值与屏障功能的相关性。 方法 对59名AD患者(Williams诊断标准确诊为AD患者)和169名正常人,辽宁籍,年龄在6个月至21岁,进行提取外周血DNA,进行聚合酶链反应(PCR),扩增目的片段,限制性内切酶消化、电泳,结果检测,观察分析FLG突变E2422X,S2554X,S2889X,S3296X,和R4307X。并采用无创检测技术,用客观评估的方法,对其中的32名AD患者和30名正常对照组,进行表皮水分、油脂含量及PH值的测量。检测部位为前额、肘窝、手背、胸骨前、腰骶、胫前,分别检测患者皮损部位,患者的正常皮肤,及正常人的检测,患者皮损根据干燥,轻度红斑脱屑,和红斑、丘疹、水疱、渗出分为轻度和重度,分别以相同部位进行比较。 结果 研究组及正常对照组均未检测出FLG突变的阳性结果。对于水分、油脂、PH值的测量参数根据皮肤状态的不同而不同。AD患者无皮损的正常皮肤及正常人皮肤相应部位的水分、油脂、PH值存在显著差异(p0.05),患者不同轻重程度的皮损相应部位的水分、油脂、PH值存在差异(p0.05)。对患者皮损相应部位的水分、油脂、PH值做线性回归,显示患者皮损处皮肤前额、肘窝、胸骨前油脂与水分呈正相关(r=1.830 r=1.057 r=0.294 P0.05),皮损处皮肤胸骨前、腰骶及胫前水分与PH值呈负相关(r=-17.792 r=-10.683 r=-14.143 P0.05)。 结论 FLG突变检测结果为阴性可能与样本量少有关,或者种族或地域之间的差别有关。水分、油脂、PH值与皮肤的不同状态有关,AD患者皮损处皮肤及无皮损的正常皮肤的水分、油脂、PH值与正常人皮肤的水分、油脂、PH值均存在显著差异,其各测量值可以反映出AD患者皮肤的屏障功能存在异常,并随着皮损的轻重程度的变化而变化。通过这些客观值的测量,可以掌握皮肤屏障功能或疾病的严重程度。
【图文】：

FLG各突变位点在FLG基因中的位置E2422X/Q2417X(FLGrepeat6)目的片段:185bPE2422X/Q2417XE2422X/Q2417X5’一CCACACGTGGCCGGTCAGCA一3’5’一GTCCTGACCCTTTGGGACGT-3’52554X(FLGrepeat7)目的片段:slZbP52554XFS’一CCACACGTGGCCGGTCAGCA一3’52554XRS’一CTGGCTAAAACTGGAI，CCCCA一3’sZssgx(FLGre讲ats)目的片段:878bp52889XFS’一GATGGACGGGGCCCAGCACrLA一3’52889XRS’一CTTGGTGGCTCTGCTGATGGGA一3’53296X(FLGrePeatg)目的片段:slgbp53296XFS’一CAGAAACCAI，CGTGGATCTGT-3’53296XRS’一GCTTCArGGTGArGCGACCA一3’

E2422x基因位点检测的PcR电泳图(l.5%琼脂糖凝胶)185bpM:DLZ000TIANGENDNAMarker200051ZbP，

本文编号：2602046